葉酸與dnkmt1對(duì)fhit基因在宮頸癌細(xì)胞中表達(dá)的影響

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1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文分類(lèi)號(hào)：R183密級(jí)：?jiǎn)挝淮a：10114學(xué)號(hào)：201010075葉酸與DNMT1對(duì)F?T基因在宮頸癌細(xì)胞中表達(dá)的影響研究生：白蘭指導(dǎo)教師：王金桃教授申請(qǐng)學(xué)位門(mén)類(lèi)級(jí)別：醫(yī)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)研究方向：腫瘤流行病學(xué)所在學(xué)院：公共衛(wèi)生學(xué)院二。一三年五月十日山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文系在導(dǎo)師指導(dǎo)下本人獨(dú)立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明確標(biāo)注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用

2、于其他學(xué)位申請(qǐng)的論文或成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。本文如違反上述聲明，愿意承擔(dān)以下責(zé)任和后果：1、交回學(xué)校授予的學(xué)位證書(shū)；2、學(xué)?？稍谙嚓P(guān)媒體上對(duì)作者本人的行為進(jìn)行通報(bào)；3、本文按照學(xué)校規(guī)定的方式，對(duì)因不當(dāng)取得學(xué)位給學(xué)校造成的名譽(yù)損害，進(jìn)行公開(kāi)道歉。4、本人負(fù)責(zé)因論文成果不實(shí)產(chǎn)生的法律糾紛。論文作者簽名：芻蘭學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解山西醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借

3、閱；本人授權(quán)山西醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表或使用學(xué)位論文或與該論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，署名單位仍然為山西醫(yī)科大學(xué)。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名：魚(yú)蘭．日期：墨絲年—窆月盈日指導(dǎo)教師簽名：二fff藝笙IVI*匠,．w同期：哩乒年—[月』；日(本聲明的版權(quán)!J!]山西醫(yī)科大學(xué)所有，未經(jīng)許可，任何單位及任何個(gè)人不得擅自使用)山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄中文摘要???????????????

4、?IAbstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1I‘中英文縮寫(xiě)對(duì)照表?????????????．X前言????????????????．．1刖舌????????????????．．1材料與方法???????????????．4結(jié)果????????????????．211．葉酸對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及DNMTl、FHIT基因表達(dá)的影響?212．DNMTl對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及FHIT基因表達(dá)的影響???293．葉酸、DNMTl對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及FHIT基因表

5、達(dá)的影響?37討論????????????????．49一、葉酸對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及DNMTl、FHIT基因表達(dá)的影響．49二、DNMTl對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及FHIT基因表達(dá)的影響??．50三、葉酸、DNMTl對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及FHIT基因表達(dá)的影響．51四、葉酸、DNMTl對(duì)Caski細(xì)胞HPVl6E6、E7表達(dá)的影響?．53參考文獻(xiàn)???????????????．．55綜述?????????????????61致謝????????????????．．72個(gè)人簡(jiǎn)介???????????????．．73山西醫(yī)科大學(xué)碩士

6、學(xué)位論文葉酸與DNMTl對(duì)F?T基因在宮頸癌細(xì)胞中表達(dá)的影響中文摘要目的：宮頸癌是常見(jiàn)的女性惡性腫瘤，流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)研究均表明，高危型人乳頭瘤病毒(HR—HPV)的持續(xù)感染是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的原因之一，但不是唯一因素。葉酸參與DNA的合成和DNA甲基化，其在宮頸癌中的作用日益受到關(guān)注。DNA甲基化是目前研究最為廣泛的表觀遺傳學(xué)事件，而DNMTl作為這一過(guò)程中的關(guān)鍵酶，已被證實(shí)與多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)。脆性組氨酸三聯(lián)基因(FragileHistidineTriadgene，F(xiàn)HIT)是目前宮頸癌研究中報(bào)道最多的抑癌基因之一

7、。其5’端CpG島的超甲基化可能是其失活的主要機(jī)制。已有研究報(bào)道，葉酸可影響DNMTl的活性；且補(bǔ)充葉酸可使FHIT蛋白表達(dá)升高，但葉酸是否通過(guò)DNA甲基化過(guò)程而影響宮頸癌細(xì)胞中FHIT基因的表達(dá)，目前未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本次實(shí)驗(yàn)將采用體外研究方法對(duì)其加以探討。方法：運(yùn)用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)將重組質(zhì)粒和空質(zhì)粒導(dǎo)入宮頸癌C33A和Caski細(xì)胞中，設(shè)立未轉(zhuǎn)染組作為對(duì)照，分別向未轉(zhuǎn)染組、空質(zhì)粒組和重組組中添加不同濃度葉酸，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞的增殖及凋亡情況，Real—timePCR檢測(cè)DNMTl

8、、FHIT及HPVl6癌基因E6、E7mRNA的表達(dá)情況，Western—blot法檢測(cè)DNMTl和FHIT蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：1．葉酸對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及DNMTl、FHIT基因表達(dá)的影響：(1)隨著葉酸濃度的增加抑制率呈上升趨勢(shì)(C33A：r=O．976，P