丹參素和半胱氨酸衍生物綴合物對huvecs和sh-sy5ys抗氧化和抗凋亡作用機制初步的研究

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1、萬方數(shù)據(jù)復凰碩士學位論文丹參索衍生物抗凋亡作用研究IlMIIIIIIILIIIIIllllllIII11111lY2705571目錄縮略詞表????????????????????l中文摘要???..??????????.??????1Abstract..?...........?.?.......?.?....。.。......??....3前言???.???????.??????????..5第一部分化合物1,2和3對SH-SY5Ys的抗凋亡作用的評估?????..6材料與方法??????????????????6一、材料????

2、????????????..6二、方法???????????.?????.7結(jié)果?????.?.?????????????ll討{念???????????????????..18第二部分化合物3對HUVEC細胞抗凋亡作用的研究???????20材料和方法?????????????????..20一、材料????????????????.20二、方法.????.???.????...?..?..23結(jié)果???.?.???????????????27討{侖?????.?.??????.?..????。..33總結(jié).?.??????????

3、?????????.35展望?.???..?.???.???????..???。.36參考文獻???.?..????..??????????37綜j鲞.?..?.????..?.????????.???.40后記.????..???????...????????45致謝???????????????????..45在讀期間已發(fā)表和擬發(fā)表的論文和專利?????????..46萬方數(shù)據(jù)復旦大學碩士論文縮略詞表丹參素衍生物抗凋亡機制研究FBSFetalbovineserum胎牛衄清BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白HUV

4、ECsHumanumbilicalveinendothelialcells人臍靜脈內(nèi)皮細胞SH.SY5YHumanneuroblastomacell人神經(jīng)母細胞瘤DMEM【/17.12Dulbecco’SmodifiedEagle’S含F(xiàn)—12的改良的Eagle培養(yǎng)基medium/F.12NACN·-acetyl·-L-·cysteineN一乙?;甃.半胱氨酸LDHlactatedehydrogenaseenzyme乳酸脫氫酶MTT3-(4,5-dimethylthiaz01)2,5-diphenyl甲基噻唑基四唑tetrazoli

5、umbromideSODsuperoxidedismutase超氧化物歧化酶GSHglutathione谷胱甘肽MDAMalondialdehyde丙二醛PVDFpolyvinylidenedifluoride偏聚氟乙烯TBSTfis.bufferedsaline三羥甲基氨基甲烷緩沖鹽水DMS0dimethylsulfoxide二甲基亞砜GPxGlutathionePeroxidase谷胱甘肽過氧化物酶CPARPCleaved-Poly(ADP-ribose)Polymerase斷裂的二磷酸腺苷多聚酶萬方數(shù)據(jù)復旦火學碩士論文中文摘要丹

6、參素衍生物抗凋亡作用研究【目的】丹參素作為中藥丹參中的有效成分,有著廣泛的生物活性,如擴張冠狀動脈、抑制血小板聚集、抗心肌細胞凋亡和抗炎作用等,而這些作用至少部分與其抗氧化和抗凋亡作用有關(guān)。但是由于丹參素的羥基的化學不穩(wěn)定性,所以很難從天然產(chǎn)物中分離和純化丹參素,而且丹參素因為脂溶性差,所以很難進入細胞膜,因此我們在已有的研究基礎(chǔ)上,我們將丹參素與半胱氨酸衍生物分子結(jié)合,以加強其穩(wěn)定性和脂溶性?;谝陨?,我們設(shè)計并合成了化合物l,2,3,并測定其對H202刺激的SH.SY5Ys和HUVECs的保護作用。COoMeHN入vs8nCOOM

7、eHN人√SBn【方法】因化合物l,2為手性異構(gòu)體,而化合物3為消旋體,所以我們先分析化合物l,2,3的藥效和結(jié)構(gòu)差異的關(guān)系。首先,我們將SH.SY5Y細胞分為6組,分別為:陽性藥組(NAC,5mM);化合物l、2、3組(50州);Model組以及Control組。將細胞種好后,部分細胞用500M的化合物l,2,3和5mM的NAC預給藥4小時,然后將除了Control組之外的細胞用2009M的H202刺激12小時。待實驗結(jié)束后,用MTT和LDH法來測定藥物對細胞的保護作用,用光鏡法和Hoechst染色法來測定藥物對細胞的凋亡的抑制作用

8、,最后再用MDA法、SOD法、GSH法和Gpx免疫熒光染色法來測定藥物抗氧化作用。而后,我們又用HUVEC細胞對化合物3進一步進行機制的研究,將HUVEC細胞分為6組,陽性藥組(NAC,5mM),59M、509M和100

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