豬圓環(huán)病毒2型單克隆抗體研制與夾心elisa抗原檢測方法的建立

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1、PREPARATIONOFMONOCLONALANTIBODIESAGAINSTPORCINECIRC0ⅥRUSTYPE2ANDDEVELOPMENToFASANDWICHELISAFORTHEⅥRUSDETECTIONByZhaiShuyanAThesisSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementfortheMasterDegreeofAgronomyCompletedinApril,2013Commencem

2、entinMay,2013原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者c需親筆,簽名:翟淑絲川年f;月;日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授

3、權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密d在—L年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。(請在以上方框內(nèi)打“√”)學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:翟洋叉整導(dǎo)師(需親筆)簽為,事年6月;日仞,弓年‘月;日目錄摘要.??...??.????????????.????。.?????。..?。.?.??。??????.?..?。??????。?.IABSTRACT?。。????。??。?????.????????..????????????

4、.??.?.?.????.??..ⅡI上篇文獻綜述第一章豬圓環(huán)病毒2型及其診斷方法研究進展???????????????.11PCV2研究概述???????????????????????????.11.1病毒分類地位??????????????????????????.11.2病毒形態(tài)學(xué)及理化特性??????????????????????.21.3基因組結(jié)構(gòu)及編碼蛋白??????????????????????.31.4PCV2感染及豬圓環(huán)病毒病????????????????????。62豬圓環(huán)病毒病診斷方法???

5、?????????????????????..82.1病原學(xué)方法???????????????????????????.82.2血清學(xué)方法???????????????????????????112.3單克隆抗體研究進展???????????????????????12參考文獻???????????????????????????????.14下篇研究內(nèi)容第二章豬圓環(huán)病毒2型單克隆抗體的制備與鑒定??????????????231材料與方法????????????????????????????..241.1細(xì)胞、毒株、

6、實驗動物及試劑???????????????????241.2免疫原的制各??????????????????????????241.3小鼠免疫????????????????????????????261.4免疫小鼠抗體效價的測定?????????????????????271.5細(xì)胞融合????????????????????????????271.6雜交瘤細(xì)胞株的建立???????????????????????291.7雜交瘤細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇?????????????????????301.8單克隆抗體腹水的制各

7、??????????????????????301.9單克隆抗體的鑒定????????????????????????312結(jié)果???????????????????????????????..322.1病毒純化????????????????????????????322.2免疫小鼠抗體效價測定??????????????????????332.3雜交瘤細(xì)胞株的建立???????????????????????33豬圓環(huán)病毒2型單克隆抗體研制與夾心ELISA抗原檢測方法的建立2.4單克隆抗體的鑒定???????????

8、?????????????332.5單抗表位的初步鑒定???????????????????????363討論?????????????????????????????????????37參考文獻ADDINEN.REFLIST?????????????????????39第三章豬圓環(huán)病毒2型夾心ELISA抗原檢測方法

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