anp信號在小鼠哮喘發(fā)病中的作用及其機制探討

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1、分類號：民５６２．２學(xué)校代碼；１０６０１密級：公開編號；Ｙ１２００２０６５禱掛各ｇ聲處ＧＵＩＬＩＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ碩±學(xué)位論文１ＡＮＰ信號在小鼠哮喘發(fā)病中的作用及其機制探討學(xué)科專業(yè)：內(nèi)科學(xué)研究方向：支氣管哮喘研究生姓名：高遠學(xué)號：Ｙ１２００２０６５學(xué)位類型：科學(xué)學(xué)位導(dǎo)師姓名：曾錦榮教授二０—五年五月獨創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中特別加＾＾標注和致謝的地方外，論文中不包含

2、其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含未獲得桂林醫(yī)學(xué)院或其一他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我同王作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名；簽字曰期；Ｔ年《月巧鳥＞１云學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解桂林醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留及使用學(xué)位論文的規(guī)定，：學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)桂林醫(yī)學(xué)院可ｌｉｌ將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可（＾采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保、匯編學(xué)位論文、存

3、。同時授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國優(yōu)秀博碩±學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》、《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名；導(dǎo)師簽字為達；／＂簽字曰期＾月名：曰；＞１＾年日簽字曰期ｗｔ（月３目錄ANP信號在小鼠哮喘發(fā)病中的作用及其機制探討（論文題目）……………………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………………1ABSTRACT………………………

4、……………………………………………3英漢縮略詞對照表…………………………………………………………6前言…………………………………………………………………………81材料與方法…………………………………………………………………101.1實驗對象…………………………………………………………………101.2主要實驗儀器和試劑……………………………………………………101.2.1主要儀器設(shè)備…………………………………………………………101.2.2主要試劑和耗材………………………………………………………111.3主要試劑的配制…………………………………………

5、………………121.3.1小鼠致敏和激發(fā)溶液OVA的配制…………………………………121.3.2ANP霧化吸入溶液的配制…………………………………………121.3.3支氣管肺泡灌洗液（BALF）的配制…………………………121.3.4PBS溶液的配制…………………………………………………121.3.5封閉液的配制………………………………………………………132.實驗方法…………………………………………………………………132.1支氣管哮喘模型小鼠的建立……………………………………………132.2小鼠肺組織病理學(xué)檢測及病理學(xué)分析……………………………

6、…142.3小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)的搜集……………………………162.4ELISA測定正常組和哮喘組小鼠支氣管肺泡灌洗液中的ANP因子的量……………………………………………………………………………1632.5ELISA測定4組小鼠支氣管肺泡灌洗液中的IL-4因子的含量…………………………………………………………………………162.6ELISA法測定4組小鼠支氣管肺泡灌洗液（BALF）中IFN-γ因子的含量……………………………………………………………………………172.7各組小鼠肺組織轉(zhuǎn)錄因子T-Bet和GATA-3的免疫組織化學(xué)染色…1

7、82.8Western-blot(WB)法，檢測4組小鼠肺組織特異性轉(zhuǎn)錄因子NPRA、T-Bet及GATA-3蛋白變化趨勢……………………………………………182.8.1蛋白提取……………………………………………………………192.8.2蛋白定量……………………………………………………………192.8.3凝膠、電泳及轉(zhuǎn)膜…………………………………………………202.8.4加一抗、二抗及顯色曝光后并分析………………………………212.8.5條帶分析……………………………………………………………213統(tǒng)計分析…………………………………………………………

8、………224結(jié)果…………………………………………………………………………234.1小鼠造模后行為學(xué)變化…………………………