dha聯(lián)合葫蘆素b對(duì)人胃癌bgc-823細(xì)胞增殖及凋亡的影響

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1、授予單位代碼10089..~學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0123086HebeiMedicalUniversity碩士學(xué)位論文專業(yè)學(xué)位DHA聯(lián)合葫蘆素B對(duì)人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖及凋亡的影響研究生:周元龍導(dǎo)師:康建省教授專業(yè):外科學(xué)二級(jí)學(xué)院:第二醫(yī)院2015年3月河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公幵和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)

2、,試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名:導(dǎo)師簽章二級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章:>>/(年七月?曰河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:導(dǎo)師簽章年今月y日目錄中文摘要……………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………3研究論

3、文DHA聯(lián)合葫蘆素B對(duì)人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖及凋亡的影響前言……………………………………………………………………6材料與方法……………………………………………………………7結(jié)果…………………………………………………………………14附圖…………………………………………………………………16討論…………………………………………………………………28結(jié)論…………………………………………………………………32參考文獻(xiàn)……………………………………………………………33綜述DHA應(yīng)用于胃癌靶向治療的研究與進(jìn)展………………………36

4、致謝………………………………………………………………………51個(gè)人簡(jiǎn)歷…………………………………………………………………52中文摘要DHA聯(lián)合葫蘆素B對(duì)人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖及凋亡的影響摘要目的:研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoicacid,DHA)聯(lián)合葫蘆素B(cucurbitacinB)在體外對(duì)抗人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖及凋亡的影響作用。方法:1實(shí)驗(yàn)分組:RPMI1640培養(yǎng)基配置4組用無(wú)水乙醇溶解后的DHA,終濃度分別為10、20、30、40μg/mL,對(duì)照組加入無(wú)水乙醇(<0.5%,V/V);

5、用RPMI1640培養(yǎng)基配置5組用DMSO溶解夠得葫蘆素B,終濃度為0.01、0.1、1、10、100μg/mL,空白組為等體積培養(yǎng)基,對(duì)照組為加入DMSO(<2%,V/V)。得出各藥物的半對(duì)數(shù)抑制濃度(IC50)值,選取均小于單種藥物IC50的DHA(20μg/mL)聯(lián)合葫蘆素B(10μg/mL)作用于人胃癌BGC-823細(xì)胞,對(duì)照組加入無(wú)水乙醇(<0.5%,V/V)和DMSO(<2%,V/V);2利用NADH酶染色顯微鏡下觀察人胃癌BGC-823細(xì)胞在分別加入DHA(20μg/mL)、葫蘆素B(10μg/mL)及DHA(

6、20μg/mL)聯(lián)合葫蘆素B(10μg/mL)后,細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的變化;3利用吉姆薩染色顯微鏡下觀察人胃癌BGC-823細(xì)胞在分別加入DHA(20μg/mL)、葫蘆素B(10μg/mL)及DHA(20μg/mL)聯(lián)合葫蘆素B(10μg/mL)后,細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的變化;4采用四氮唑藍(lán)比色法(MTT法),在限定時(shí)間,且不同濃度的前提下,研究DHA(10、20、30、40μg/mL)組、葫蘆素B(0.01、0.1、1、10、100μg/mL)組、DHA(20μg/mL)聯(lián)合葫蘆素B(0.01、0.1、1、10、100μg/mL)不同濃

7、度加藥組對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞增值的影響;5通過流式細(xì)胞檢測(cè)法分別檢測(cè)DHA(20μg/mL)加藥組、葫蘆素B(10μg/mL)加藥組、DHA(20μg/mL)聯(lián)合葫蘆素B(10μg/mL)加藥組細(xì)胞周期及凋亡的情況;1中文摘要6所有數(shù)據(jù)用mean±SD表示,采用SPSS16統(tǒng)計(jì)軟件包行單因素方差分析,在某些實(shí)驗(yàn)中用雙因素方差分析、Pearson相關(guān)分析,P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1NADH酶染色法在顯微鏡下明顯可見相同時(shí)間下,隨著藥物濃度的增加,DHA(20μg/mL)加藥組、葫蘆素B(10μg/mL)加藥組細(xì)

8、胞凋亡現(xiàn)象愈加明顯,且DHA(20μg/mL)聯(lián)合不同濃度葫蘆素B組用藥組凋亡比DHA(20μg/mL)組、葫蘆素B(10μg/mL)組更為徹底。2吉姆薩染色法在顯微鏡下明顯可見相同時(shí)間下,隨著藥物濃度的增加,DHA(20μg/mL)加藥組、葫蘆素B(10μg/mL)加藥組細(xì)胞凋亡現(xiàn)象愈加

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