wolbachia株系篩選、人工轉(zhuǎn)染及煙粉虱種群控制實(shí)驗(yàn)

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1、分類號：單位代碼：密級：公幵學(xué)號：蚴十犬學(xué)位論文株系篩選、人工轉(zhuǎn)染及煙粉虱種群控制實(shí)驗(yàn)國家自然科學(xué)基金和教育部博士點(diǎn)基金資助研究胡紅巖指導(dǎo)教李西教授合作指導(dǎo)教師申請學(xué)位門類級別：農(nóng)學(xué)博士專業(yè)名稱：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究方向：昆蟲分子生態(tài)學(xué)所在學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院年獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中已經(jīng)注明引用和致謝的內(nèi)容外，論文中不包含本人和其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而

2、使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名媽紅名時(shí)間：《年月乂日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保存及向國家有關(guān)部門和機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》或《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進(jìn)行出版，并享受相關(guān)權(quán)益。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）學(xué)位論

3、文作者簽名：時(shí)間：江年月日導(dǎo)師簽名：年月日：時(shí)間摘要煙粉是蔬菜和觀賞植物的重要害蟲之一，在全世界廣泛分布。煙粉風(fēng)通過多種方式危害植物，給我國的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。是節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的一種內(nèi)共生菌，對宿主的生殖起到調(diào)控作用。煙粉虱種群中有很高的感染率，但與煙粉虱之間的互作及其對宿主種群的調(diào)控作用還有待澄清。本研究從米蛾中分離出一株，經(jīng)過和序列分析和分子鑒定，提示該株系可能誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生胞質(zhì)不親和作用（。因此，本文采用顯微注射的方式，將該外源轉(zhuǎn)染到煙粉虱體內(nèi)，旨在探討該菌株在煙粉虱中誘導(dǎo)的表

4、型。同時(shí)，利用知誘導(dǎo)宿主的原理，通過釋放人工轉(zhuǎn)染的煙粉虱雄蟲來進(jìn)行煙粉虱種群控制研究。本文獲得的主要研究結(jié)果和結(jié)論簡括如下：為了篩選到合適的株系用于人工轉(zhuǎn)染，本文對幾種常見昆蟲進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示幾種昆蟲感染的『分為和兩個(gè)大組。對米蛾感染的階進(jìn)行了和分析，結(jié)果表明米蛾體內(nèi)菌株（與能夠引起作用的幾種菌株聚在一起，據(jù)此推測該菌株可能誘導(dǎo)宿主的胞質(zhì)不親和性。因此，本文選取了米蛾作為人工轉(zhuǎn)染的供體昆蟲。采用顯微注射煙粉虱偽蛹的方式，本文將米蛾中提取出的轉(zhuǎn)染到煙粉虱體內(nèi)，建立起了人工轉(zhuǎn)染煙粉虱種群。通過對轉(zhuǎn)染

5、煙粉虱種群進(jìn)行分子檢測，結(jié)果表明轉(zhuǎn)染煙粉虱體內(nèi)（能夠檢測到來自米蛾的肌株系，說明外源已成功轉(zhuǎn)入煙粉虱體內(nèi)，并能夠穩(wěn)定地遺傳給后代。運(yùn)用技術(shù)對人工感染煙粉虱體內(nèi)進(jìn)行定位觀察，結(jié)果表明，與野生型種群相比，轉(zhuǎn)染煙粉虱的各個(gè)蟲態(tài)均有很強(qiáng)的焚光信號，說明菌株己經(jīng)在新宿主煙粉虱中轉(zhuǎn)染和傳播。本研究設(shè)置了在個(gè)體水平和群體水平上的生物雜交實(shí)驗(yàn)，以研究外源所菌株對煙粉虱生殖的調(diào)控作用。結(jié)果表明，各個(gè)處理后代的雌雄比有很大的差異。對照組的雜交沒有發(fā)現(xiàn)現(xiàn)象；野生種群（雌性轉(zhuǎn)染種群（雄性之間產(chǎn)生了完全的而雌性雄性表現(xiàn)出高水

6、平的不完全。上述研究結(jié)果表明，外源能誘導(dǎo)煙粉虱產(chǎn)生高水平的雙向。在籠罩條件下，以一定的比例釋放雌性、雄性和雄性三種煙粉虱成蟲。研究結(jié)果表明，以的比例釋放并群交時(shí)，后代中雄蟲的比例相對于對照組有明顯的增加，說明轉(zhuǎn)染雄蟲影響了野生型煙粉虱之間的生殖。釋放轉(zhuǎn)染的煙粉虱雄蟲對野生種群有一定的控制效果，但外源菌株控制煙粉虱種群的潛力尚待更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑u估。煙粉風(fēng)作為世界性重要的農(nóng)業(yè)害蟲和我國重要的入侵害蟲，對其實(shí)施可持續(xù)控制尚需多方面的努力。本文的研究結(jié)果為昆蟲互作關(guān)系提供了直接證據(jù)，也為利用昆蟲體內(nèi)普遍攜帶的菌株

7、控制煙粉虱種群提供了新思路。關(guān)鍵詞：煙粉虱；胞質(zhì)不親和性，人工轉(zhuǎn)染；種群控制AbstractThewhitefly,Bemisiatabaci，，，，，(4)Underlaboratoryconditions,cagepopulationcontroltestswereconductedwiththereleaseofWTfemale,WTmaleandTImaleinacertainproportion.Thestudyshowedthat,theratioofmaleoffspringhadob

8、viousincreaseswhentheproportionwas1:1:10comparedwiththecontrolgroup.Theresultsindicatedthatthereproductionof5.Tabacipopulationcouldbeaffectedbytransfectionmales.Althoughithassomeefectsonthecontrolofwhitefly,thereismuchmorerigorousworkne