基于糜子轉(zhuǎn)錄組的nced基因克隆及干旱脅迫下的表達(dá)分析

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1、？分類號．Ｓ５１６學(xué)號誦０６３＇？巧輔賴則；如苗：遲護(hù)、巧襲素丈聲全日制碩ｚｂ學(xué)位論文基于糜子轉(zhuǎn)錄組的／１／化》基因克?。崳娂案珊得{迫下的表達(dá)分析姓名：楊陽．指導(dǎo)教師；王瑞云副教授學(xué)科專業(yè)、：植物學(xué)培養(yǎng)單位；農(nóng)學(xué)院’‘巧’：蘭；驗(yàn)？；：叫＼１＇Ｖ１＞斗片強(qiáng)〇＾＾告４較駕竄藝１賽轟《誇冢轅鷄費(fèi)－＇＜竄印每辜呈：ｉ：／苦號與；；??；節(jié)：錯晉麗議讚讓鑽；叫看：詔：轉(zhuǎn)著；誦中園，山西．太谷＾Ｌ；■．■￣－川二０五年六月；扇：＞；；：．：：：，；：；：：：：；：：一＂＂’．？ｉ

2、：？？－－＾’■＇■：ｒ：ＶＪ：：‘１．，；ＳｈａｎｘｉＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＦｕ－ｌｌｔｉｍｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇ－ＡＮＣＥＤｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｂａｓｅｄｏｎＲＮＡＳｅｑｉｎｒｏｓｏｍｉｌｌｅｔｇｐＰａｎｉｃｕｍｍｉｌｉａｃｅｕｍＬ．ａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｓｉｓｕｎｄｅｒ（）ｐｙｄｒｏｕｈｔｓｔｒｅｓｓｇＮａｍｅ：ＹａｎＹａｎｇｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．

3、ＲｕｉｕｎＷａｎｙｇＭａｏｒ；ＢｏｔａｎｊｙＴｒａｉｎｉｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｅｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅｇｕｎｇｇＴａｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇ化ｎｅ．２０１５學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中６＞注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文研究做出過重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中切明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人７衣?lián)＃崳娮髡吆炦`（親筆）：Ａ年《月，戶日捉ｐ學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書？，本學(xué)位

4、論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。即學(xué)位論文的知識產(chǎn)權(quán)屬山西農(nóng)業(yè)大學(xué)；同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)＊口或機(jī)構(gòu)送交論文的原件部、復(fù)印件和電子版允許論文被查閱和借；閱；本人授權(quán)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)可將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)巧檢索＇〔，可從采用影印、縮印或擔(dān)描等復(fù)制手段保存、；編學(xué)位論文。作者簽為（親筆）：奮Ｍ心長年ｉ月作日谷月導(dǎo)師簽違（親筆）：日本研究論文由國家自然科學(xué)基金（３１２７１７９１）提供資助ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉ

5、ｏｎｏｆＣｈｉｎａ３１２７１７９１（）目錄摘要１一第胃前胃３１３．１引胃１．２糜子概述３１３４．糜子抗旱硏究現(xiàn)狀）１４．４功能基因ｉＶＣ邸的研究進(jìn)展１．５論文選題及研究意文６第二章干旱脅迫下糜子Ｈ葉期葉片的解剖結(jié)構(gòu)８２８．１材料與方法２丄１材料８２丄２方法８２．２結(jié)果和分析１０２．３艦１０第Ｈ章基于轉(zhuǎn)錄組的糜子ＡｍＭ：思）基因的克隆１２３口．１材料與方法３丄１材料１２３丄２糜子葉片總ＲＮＡ的提?。壙冢崳姡硜A３糜子葉片總ＲＮＡ完整性及純度檢測１３一３丄４ｃＤＮＡ－ＰＣＲ第鏈的合

6、成及ＲＴ１３３丄５目的基因的ＰＣＲ擴(kuò)増１３３丄６ＰＣ民產(chǎn)物的回收和純化１４３丄７ＤＮＡ片段的連接反應(yīng)１４３丄８轉(zhuǎn)化及培養(yǎng)１５１３丄９菌落ＰＣＲ及ＰＣＲ產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳檢測５）３丄１０１６ＪＶＣ邸基因及其編碼蛋白質(zhì)的分析３６．２結(jié)果與分析１３．２．１ＮＣＥＤ目的基因的獲得１６３ＰＣＲ１７．２．２ｉＶＣ￡公目的基因的克隆及菌落鑒定３．２．３Ｍ：正公基因序列分析１７３２．４Ｍ：說）基因的１８．糜子氨基酸序列、蛋白結(jié)構(gòu)及分子進(jìn)化樹分析３２１．３職第四章干旱脅迫下糜子戶ｗＭ：巧）基因的表達(dá)分析２２４．

7、１材辭與方法２２４丄１材料２２４丄２不同干旱脅迫時(shí)間ｃＤＮＡ樣品的制備２３４．１．３巧ｎｉＶＣ拉）基因的實(shí)時(shí)萊光定量２３４丄４干旱脅迫下糜子Ｈ葉期葉片可溶性糖含量的測定２４４丄５干旱脅迫下糜子Ｈ葉期葉片脯氨酸含量的測定２５４丄６干旱脅迫下糜子Ｈ葉期葉片相對含水量的測定２５４丄７干旱脅迫下糜子Ｈ葉期ＭＤＡ含量的測定２６４．２結(jié)果分析２６４．２．１干旱脅迫下糜