檢測prrsv抗體的兩種間接elisa方法的建立和應(yīng)用

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1、分類號：S855.3學(xué)校代碼：10712UDC：578研究生學(xué)號：2013050700密級：公開gS灶衣林t枚大學(xué)2015屆全日制碩士專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文檢測PRRSV抗體的兩種間接ELISA方法的建立和應(yīng)用類型獸醫(yī)碩士領(lǐng)域、方向預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究生牛巧娜指導(dǎo)教師周恩民教授合作指導(dǎo)教師趙欽講師完成時間2015年4月中國陜西楊凌研究生學(xué)位論文的獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明：所呈交的全日制碩士專業(yè)學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作及取得的研究結(jié)果；論文中的研究數(shù)據(jù)及結(jié)果的獲得完全符合學(xué)?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行

2、規(guī)定〉〉，如果違反此規(guī)定，一切后果與法律責(zé)任均由本人承擔(dān)。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究結(jié)果，也不包含其他人和自己本人已獲得西北農(nóng)林科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文的致謝中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：t時間：>>丨<年(月I曰導(dǎo)師指導(dǎo)研究生學(xué)位論文的承諾本人承諾：我的全日制碩士專業(yè)學(xué)位研究生.聽呈交的碩士學(xué)位論文是在我指導(dǎo)下獨(dú)立開展研究工作及取得的研究結(jié)果，鴒丁祆現(xiàn)岡職務(wù)工作的結(jié)果，并嚴(yán)格按照學(xué)

3、?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定》而獲得的研究結(jié)果。如果違反學(xué)?！蛾P(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定》，我愿接受按學(xué)校有關(guān)規(guī)定的處罰處理并承擔(dān)相應(yīng)導(dǎo)師連帶責(zé)任。時間：年/月i曰關(guān)于研究生學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文的知識產(chǎn)權(quán)歸屬西北農(nóng)林科技大學(xué)。本人同意西北農(nóng)林科技大學(xué)保存或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版，允許論文被查閱和借閱；同意西北農(nóng)林科技大學(xué)將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進(jìn)行出版，并享受相關(guān)權(quán)益。本人保證，在畢業(yè)離開（或者工作調(diào)

4、離）西北農(nóng)林科技大學(xué)后，發(fā)表或者使用本學(xué)位論文及其相關(guān)的工作成果時，將以西北農(nóng)林科技大學(xué)為第一署名單位，否則，愿意按《中華人民共和國著作權(quán)法》等有關(guān)規(guī)定接受處理并承擔(dān)法律責(zé)任。任何收存和保管本論文各種版本的其他單位和個人（包括研究生本人)未經(jīng)本論文作者的導(dǎo)師同意，不得有對本論文進(jìn)行復(fù)制、修改、發(fā)行、出租、？文編等侵犯著作權(quán)的行為，否則，按違背《中華人民共和國著作權(quán)法》等有關(guān)規(guī)定處理并追究法律責(zé)任。(保密的學(xué)位論文在保密期限內(nèi)，不得以任何方式發(fā)表、借閱、復(fù)印、縮印或掃描復(fù)制手段保存、匯編論文）Classificationcode:

5、S855.3Universitycode:10712UDC:578Postgraduatenumber:2013050700Confidentialitylevel:PublicDissertationforMaster'sDegreeNorthwestA&FUniversityin2015DEVELOPMENTANDAPPLICATIONOFTWOINDIRECTELISAsFORDETECTIONOFANTIBODIESAGAINSTPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEVIRUS

6、Major:MasterofveterinarianResearchfield:PreventiveVeterinaryMedicineNameofPostgraduate:QiaonaNiuAdviser:Prof.EMZhouDateofsubmitted:May2015YanglingShaanxiChina檢測PRRSV抗體的兩種間接ELISA方法的建立和應(yīng)用摘要豬繁殖與呼吸綜合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome，PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)感染引

7、起的一種以懷孕母豬發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎等嚴(yán)重的繁殖障礙和仔豬與育肥豬的呼吸道癥狀為特征的傳染病，給全球養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，建立有效的診斷PRRSV方法是非常重要的。PRRSV核衣殼蛋白N，是病毒主要的結(jié)構(gòu)蛋白，并且具有很強(qiáng)的免疫原性，是該病毒血清學(xué)診斷方法中應(yīng)用最多的靶抗原。PRRSV的非結(jié)構(gòu)蛋白Nsp9蛋白，即RNA依賴RNA聚合酶(RdRp)，其僅在病毒的復(fù)制過程中產(chǎn)生，高度保守?；诖?，本研究就利用原核表達(dá)系統(tǒng)誘導(dǎo)表達(dá)PRRSVN和Nsp9蛋白為包被抗原，建立了檢測PRRSV抗體的兩種間接ELISA方法（N-

8、iELISA和Nsp9-iELISA），用以診斷PRRSV的感染及區(qū)分PRRSV滅活疫苗和弱毒疫苗（或者野毒）的感染，在臨床上具有一定免疫監(jiān)控和疫病凈化的應(yīng)用。首先，建立檢測PRRSVN和Nsp9抗體的間接ELISA方法，即N-iELISA和Nsp9-iELIS