藏豬源大腸桿菌和腸球菌耐藥性調(diào)查及其耐藥機(jī)制的研究

藏豬源大腸桿菌和腸球菌耐藥性調(diào)查及其耐藥機(jī)制的研究

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時(shí)間:2019-03-13

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1、分類丹:單位代碼:密級號:博士學(xué)位論文藏豬源大腸捍菌和腸球菌耐藥性調(diào)查及其耐藥機(jī)制的研究研究生:李鵬指導(dǎo)教師:林德貴教授申請學(xué)位門類級別:農(nóng)學(xué)博士專業(yè)名稱:臨床獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)臨床所在學(xué)院:動物醫(yī)學(xué)院年月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中已經(jīng)注明引用和致謝的內(nèi)容外,論文中不包含本人和其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、

2、使用學(xué)位論文的規(guī)定。本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保存及向國家有關(guān)部門和機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》或《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進(jìn)行出版,并享受相關(guān)權(quán)益。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)導(dǎo)師簽名:時(shí)間年『月日本研究受西藏自治區(qū)年度地方自然科學(xué)基金項(xiàng)目“西藏動物源細(xì)菌的抗生素耐藥表征及分子流行病學(xué)研究”資助摘要大腸埃希氏菌、和腸球菌是人和動物腸道共生菌,可以作為社區(qū)和農(nóng)場中各種細(xì)菌耐藥性發(fā)生情況的指標(biāo)菌,而藏豬原產(chǎn)于西藏地區(qū),在藏區(qū)普遍將藏豬放養(yǎng)于自然環(huán)境中,自由覓食,從不用藥

3、。對藏豬源大腸桿菌和腸球菌開展耐藥性調(diào)查及其耐藥機(jī)制研究,在獸醫(yī)及人醫(yī)領(lǐng)域均有重要的公共衛(wèi)生意義。試驗(yàn)菌株分離自年從西藏林芝市覺木溝附近山林采集的份新鮮藏豬糞便樣本,該地區(qū)藏豬采用放牧式養(yǎng)殖方式,管理十分粗放,調(diào)查未發(fā)現(xiàn)使用抗生素和抗菌促生長劑。經(jīng)選擇性培養(yǎng)、生化鑒定和確證,共分離出株大腸桿菌和株腸球菌,分離率分別為和其中屎腸球菌株占腸球菌的、糞腸球菌株占、希拉腸球菌株占、蒙氏腸球菌株占,首次分離到豬源蒙氏腸球菌。使用紙片擴(kuò)散法、微量肉湯稀釋法對分離的大腸桿菌進(jìn)行種常用抗菌藥物敏感性試驗(yàn),結(jié)果顯示,受試大腸桿菌表現(xiàn)出對四環(huán)素(較高水平的耐藥率,對氟苯尼考(、氨芐西林(、萘啶酸(、復(fù)方新諾明(°

4、。)、鏈霉素(和頭孢噻呋表現(xiàn)中等水平耐藥,對環(huán)丙沙星、慶大霉素和大觀霉素的耐藥率則比較低,未發(fā)現(xiàn)阿莫西林克拉維酸耐藥大腸桿菌菌株。有株大腸桿菌對三類以上的抗菌藥物同時(shí)表現(xiàn)出耐藥性,多重耐藥率為。使用紙片擴(kuò)散法、微量肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法測定對分離的腸球菌進(jìn)行種常用抗菌藥物敏感性試驗(yàn),結(jié)果顯示受試腸球菌對苯唑西林、克林霉素和紅霉素表現(xiàn)出高水平耐藥,這與腸球菌的固有耐藥有關(guān),腸球菌對四環(huán)素(表現(xiàn)出較高水平的耐藥率,對氟苯尼考(表現(xiàn)中等水平耐藥,對青霉素(和環(huán)丙沙星(的耐藥率則比較低,對氨芐西林、左旋氧氟沙星、氨基糖苷類藥物的耐藥率很低,未發(fā)現(xiàn)對阿莫西林克拉維酸或萬古霉素耐藥腸球菌菌株,統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),除

5、四環(huán)素、紅霉素和青霉素外,四種腸球菌對其他藥物耐藥性無顯著性差異。通過方法對所有分離的菌株進(jìn)行耐藥基岡檢測,結(jié)果顯示,大腸桿菌中攜帶株(、株(、株(、株(、鐵、株(、吹株(未檢出、、、、、、、’、和耐藥基因,發(fā)現(xiàn)內(nèi)酰胺酶基因與基因的連鎖流行;腸球菌中攜帶株(、株(、次株(,有兩株氟苯尼考耐藥菌株未檢出、和測序結(jié)果顯不檢出的全部為,檢出的有株為么株為全部為。應(yīng)用脈沖場凝膠電泳分型技術(shù)對攜帶耐藥基因的大腸桿菌和對氟苯尼考耐藥腸球菌進(jìn)行研究,結(jié)果顯示,內(nèi)酰胺酶基因性大腸桿菌、基因陽性大腸桿菌和基因陽性大腸桿菌中存在克隆現(xiàn)象,氟苯尼考腸球菌耐藥菌種的同源性較低,未發(fā)現(xiàn)克隆傳播,提示內(nèi)酰胺類藥物、喹諾酮

6、類藥物和氟苯尼考的耐藥性在藏區(qū)藏豬源大腸桿菌中存在垂直傳播,大部分氟苯尼考耐藥基因則是通過水平轉(zhuǎn)移的途徑在藏區(qū)藏豬源腸球菌中傳播。綜上所述,藏豬源細(xì)菌除四環(huán)素外,對其他常見抗菌藥物敏感性較好,耐藥基因的檢山率較國內(nèi)其他養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達(dá)地區(qū)都低。但是大部分耐藥基因都是通過水平轉(zhuǎn)移的途徑在藏豬源細(xì)菌中傳播,提示相關(guān)部門要繼續(xù)嚴(yán)格控制抗菌藥物在藏豬養(yǎng)殖過程中的使陽,另外耍限制藏豬活動空間,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,避免人員和其他動物隨意進(jìn)入的可能。關(guān)鍵詞:藏豬,大腸桿菌,腸球菌,耐藥性,耐藥基因AbstractEscherichiacoliandEnterococcusarecommensalbacteriainhu

7、manandanimalintestinal,whichareregardedasindicatororganismforantimicrobialresistanceinthecommunityandfarms.TibetanpigoriginatedinTibetregion,whichisfree-ranginginitsnaturalenvironmentwithadequatewater

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