乙型肝炎病毒核心抗體igg抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的研究

乙型肝炎病毒核心抗體igg抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的研究

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1、tf完,京i知如碌f中@聲3鐘《獻(xiàn)博i研究生學(xué)位論文北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究生院學(xué)校代碼1;0023:B20學(xué)號(hào)12022002博±學(xué)位論文乙型肝炎病毒核也抗體IG抑制乙型肝炎病毒復(fù)制的g研究所院;衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中也學(xué)科專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)姓名;勾宏娜指導(dǎo)教師:王露楠研究員導(dǎo)師小組;李金明研究員二〇—完成日期;五年五月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加W標(biāo)注和致謝的地方外,不包含其他人己經(jīng)發(fā)

2、表或撰寫過(guò)的研究成果,也不包含為獲得其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝。'琶、學(xué)位論文作者簽名:簽字日期:女年r月/日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院有關(guān)保存、使用學(xué)位論文的管理辦法。有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院可W將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可W采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(

3、保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名;3吝處巧導(dǎo)師簽名;了簽字日期■6:少年j月日簽字日期;年:T月戶日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向;工作單位:電話:通訊地址::郵編北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博±學(xué)位論文目錄英文縮略詞13中淵要5英文摘要刖胃11口.材料和方法1丄實(shí)驗(yàn)材料和試劑配制121丄1-.儀器(表11)121丄2-.主要實(shí)驗(yàn)耗材(表12)131...13細(xì)胞系和質(zhì)粒141.2.方法2212丄I22.乙型肝炎病

4、毒核也抗體gG純化與鑒定12HBcA22..1丄純化人源b的血清標(biāo)本篩選12丄2G純化27..己型肝炎病毒核也抗體Ig進(jìn)行測(cè)定:1.2丄3.對(duì)純化后乙型肝炎病毒核必抗體IgG的蛋白濃度巧.12.1.4.對(duì)純化后HBcAb效價(jià)進(jìn)行測(cè)定301.2.2.藝型肝炎病毒核也抗體IgG進(jìn)入巧細(xì)胞能力驗(yàn)證30123I巧...己型肝炎病毒核也抗體gG對(duì)核也蛋白亞細(xì)胞分布的影響1.2.3.1.激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)核也蛋白亞細(xì)胞分布W及免疫復(fù)合物形成....361.2.3.2.WesternBlot驗(yàn)證

5、HBcAbIgG對(duì)HBcAg亞細(xì)胞分布的影響371.2.4.乙型肝炎病毒核也抗體IgG對(duì)HepG2.2.巧細(xì)胞內(nèi)HBV復(fù)制的影響巧1.2.4.1用核也抗體IgG處理HepG2.2巧3912GHBABe:40.2.4.藝型肝炎病毒粉。抗體Ig對(duì)sg和HAg分泌的影響….…1.2.4.3.HBcAbIgG對(duì)HBV病毒釋放的影響41北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博±學(xué)位論文1.2.4.4.HBcAb對(duì)細(xì)胞內(nèi)HBVcccDNA和pgRNA的影響471.2.4.4.1.細(xì)胞內(nèi)總RNA和DNA

6、的提?。墸矗福崳姡保玻矗矗矊?shí)時(shí)定量巧光PCR檢巧?。菁?xì)胞內(nèi)HBVcccDNA的變化491.2.4.4.3.實(shí)時(shí)定量巧光逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HBVpgRNA的變化521.25統(tǒng)計(jì)學(xué)分54.析256.2.1.乙型肝炎病毒核也抗體IgG純化與鑒定562丄1.純化人源HBcAb的血清標(biāo)本篩選5662丄2.藝型巧炎病毒核也抗體IgG純化52丄3乙型肝炎病毒核也抗體IgG濃度測(cè)定562.1.4對(duì)純化后HBcAb效價(jià)進(jìn)行測(cè)定58:22HBcAIHeG22巧細(xì)胞能力驗(yàn)證巧.

7、.bgG進(jìn)入p..23HBcAb對(duì)He22巧細(xì)胞內(nèi)HBc的亞細(xì)胞分布的影響59..pG..23丄激HBcAbIHBcA亞細(xì)胞分布的影響巧.光掃描共聚焦顯微鏡驗(yàn)證gG巧g2tlt60.3.2.WesernBo驗(yàn)證HBcAbIgG對(duì)HBcAg亞細(xì)胞分布的影響2.4.1.HBcAbIgG對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞內(nèi)HBV復(fù)制的影響612.4丄1胃蛋白酶水解核也抗體分離結(jié)果612.4丄2HepG2.2.巧細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBsAg和HBeAg水平的檢測(cè)622.41.3HBcAbIG

8、對(duì)HeG2.2.15細(xì)胞分泌完整病毒顆粒的影響的.gpI26.4.2.2.4HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)上清的HBVDNA含量的檢汲J42.4.3.HBcAbIgG對(duì)細(xì)胞內(nèi)HBV復(fù)制的抑制作用662.4.3丄

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