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《雙重熒光定量rt-pcr檢測豬o型口蹄疫病毒gx和xj株方法的建立及應用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、分類號Ｓ８５２．６５學校代碼１０１２９ＵＤＣ６３６學號２０１３２１６０巧Ａ寒古落寺乂攀碩±學位論文．■＞雙重巧光定量ＲＴ－ＰＣＲ檢測豬０型口蹄疫病毒ＧＸ和ＸＪ株方法的建立及應用－Ｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄ－ｐＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａＤｕｐｌｅｘＲｅａｌｔｉｍｅＲＴＰＣＲＡｓｓａｙｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＧＸａｎｄＸＪＳｔｒａｉｎｏｆＰｏｒｃｉｎｅＴｙｐｅＯＦＭＤＶ１Ｔ．氣、Ｖ．．一＇、
2、‘．、．ｒ．申請人：張帆１＾若心學位類別；獸醫(yī)碩±＇：—ｔ領域：指導教師：周偉光副教授論文提交日期二〇－五年六月：巧蒙古農業(yè)大學研究生學位論文獨創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｌ乂標注和致謝的地方外，論義中不包括其他人己經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括為獲得我?；蚱渌逃龣C構的學位或證書而使用過的材一料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明
3、確的說明并表示謝意。之處一，本人承捏切相關責任申請學位論文與資料若有不實。Ｉ，日期－誠論文作者簽名：旅郵：少內蒙古巧業(yè)大學研究生學位論文版權使用授權書本人完全了解巧蒙古農業(yè)大學有關保護知巧產權的規(guī)琴，即：研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產權單位屬巧蒙古農業(yè)大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文王作成果時署名單位為內蒙古農業(yè)１大學，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署《為巧蒙古農業(yè)大學。學校有權保留并向國家有關部口或機構送交論文的復印件和電子文檔，允
4、許論文被查閑和借閱。學?？丧靵V公布學位論文的全部或部分內容（保密、內容除外），采用影印縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：旅似今指導教師簽名：＇日期Ｘ、：１Ｍ中Ｉ摘要為了建立檢測０型口蹄疫病毒不同基因型的雙重巧光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，本試－７株和Ｏ－驗根據(jù)口蹄疫病毒Ｏ／ＧＸ／０９／ＸＪ／１０Ｕ株ＶＰ１基因序列設計合成１對通用引物和２個Ｔａｑｍａｎ探針。通過制備ＧＸ與ＸＪ株標準品ＲＮＡ，優(yōu)化反應條件，建立雙重茨光定量ＲＴ－ＰＣＲ價其靈敏性，特異性、重復性。利用
5、建立的雙重焚，并評光定量ＲＴ—ＰＣＲ檢測方法對豬０型ＦＭＤ疫苗中的ＧＸ和ＸＪ株進行鑒別檢測，Ｗ及對疫苗中病毒ＲＮＡ含量進行定量測定。－結果顯示，檢測ＧＸ與ＸＪ株雙重定量ＲＴＰＣＲ標準曲線的相關系數(shù)分別為２２－民＝＝立的雙重巧光定量ＲＴ０．９９７和Ｒ０．９９５；建ＰＣＲ方法能夠同時鑒別檢測滅活病毒中口蹄疫病毒不同基因型，具有良好的特異性與靈敏性；ＲＮＡ含量最低檢測限為１０拷貝／＾Ｌ。應用此方法能夠滿足對企業(yè)生產車間的不同批次口蹄疫滅活病毒和種毒的ＲＮＡ含量進行有效的檢測，，還可
6、用于種毒的純化檢驗并且為疫苗的生產質一種新的檢測方法量控制提供了。雙重巧光定量ＲＴ－關鍵詞：口ＰＣＲ蹄疫病毒；疫苗；ｃａｔｉｏｎｏｆ－ＤｅｖｅｍｅｎｔａｎｄＡｌｉａＤｕｌｅｘ民ｅａｌｔｉｍｅＲＴ奪Ｃ民ｌｏｐｐｐｐＡｓｓａｙｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＧＸａｎｄＸＪＳｔｒａｉｎｏｆＰｏｒｃｉｎｅＴｅＯｙｐＦＭＤＶＡｂｓｔｒａｃｔＴｏｄｅｖｒｅａｌ－ｔｉｍｅ艮Ｔ－ｆｏｒｄｄｉｆｆｅｌｏｐｉ打ａｄｕｌｅｘＰＣＲｍｅｔｈｏｄ巧ａｃｔｉ
7、ｎｇｅｒｅｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅｓｇｐｆｒｏｍ－ａｎｄ－ｄｖｉｒｕＦＭＤＶｒｏｆｕｎｉｖｒｓａｒｉｍｒｓａｔｙｐｅＯｆｂｏｔｍｏｕｔｈｉｓｅａｓｅｓｅｓ（），ｏｎｅｐａｉｅｌｐｅｎｄｔｗｏＴａｑｍａｎｐｒｏｂｅｓｗｅｒｅｄｅｓｉｇｎｅｄａｎｄｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄａｃｃｏｒｄｉｎｇ化ｔｈｅＶＰ１ｇｅｎｅ化ｑｕｅｎｃｅｓ－－ｏｆＦＭＤＶＯ／ＧＸ／０９７ａｎｄ０／ＸＪ／ｌ０１１ｓｔｒａｉｎ．ＴｈｒｏｕｇｈｒｅａｒｉｎｏｆＧＸａ
8、ｎｄＸＪｓｔｒａｉｎｐｐｇｓａｎｄａｒｄｈｔ－－ｔＲＮＡｔｅｎｏｔｉｍｉｚｉｎｒｅａｃｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｔｈｅｄｕｌｅｘｒｅａｌｔｉｍｅＲＴＰＣ艮ｗｉｌｌｂｅ，ｐｇ，ｐｄｅｖｅｌｏｅｄｉ打ｔｈｉｓｓｈａｄ．ＡｎｄｉｔｓｓｅｎｓｉｔｉｖＵｙｓｅｃｉｆｉｃｉｔａ打ｄｒｅｅａｔａｂｉｌｉｔｉｌｌｂｅｅｖａｈｘａｔｅｄ．ｐｙ，ｐｙｐｙｗＴｈｅｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄｐｏｒｃｉｎｅ
