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《大豆根際土壤溶無機(jī)磷細(xì)菌的溶磷特性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號(hào)：Q93單位代碼：10193密級(jí)：公開學(xué)號(hào)：2012089碩士學(xué)位論文大豆根際土壤溶無機(jī)磷細(xì)菌的溶磷特性研究Solubilizingpropertiesoftheinorganicphosphate-solubilizingbacteriaisolatedfromsoybeanrhizospheresoil作者姓名：王春紅學(xué)位類別：理學(xué)碩士專業(yè)名稱：微生物學(xué)研究方向：生物降解與酶學(xué)工程指導(dǎo)教師：楊美英副教授所在學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院2015年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝所列內(nèi)
2、容外，論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學(xué)位論文所有內(nèi)容若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)一切相關(guān)法律責(zé)任和后果。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)所有，并同意將本論文的版權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用
3、影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。2、本人（同意/不同意，務(wù)必打印后填寫）吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進(jìn)行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡(luò)出版以及其他形式出版（涉密學(xué)位論文解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學(xué)位期間完成的論文及相關(guān)的學(xué)術(shù)成果，必須以吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)作為第一署名單位。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日指導(dǎo)教師簽名：簽字日期：年月日摘要溶磷微生物能將土壤中難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為能被植物吸收利用的可溶性磷形態(tài)，從而提高土壤磷素利用效率，在農(nóng)業(yè)磷素循環(huán)利用方面有著重要作用。本論文針對(duì)大豆根際土壤中溶無機(jī)磷細(xì)菌溶磷特性進(jìn)行一系列的研究
4、，主要取得以下成果：本試驗(yàn)從東北大豆根際土壤中分離和篩選出4株具有較強(qiáng)溶磷能力的細(xì)菌，其最大溶磷量分別為558μg/mL、478μg/mL、596μg/mL和586μg/mL。經(jīng)過Vitek2生理生化系統(tǒng)分析和16SrDNA序列測(cè)定，鑒定4株菌株分別為假單胞菌、腸桿菌、蒼白桿菌、克雷伯氏菌，并命名為wj1、wj3、wj5和wj6。本文以NBRIP分離培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，利用L325(5)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，從碳源、氮源及pH值三個(gè)方面對(duì)菌株溶磷培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明：最佳碳源為葡萄糖，氮源為蛋白胨，初始pH值為8。對(duì)wj6溶解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4特性的研究發(fā)現(xiàn)
5、，該菌株能不同程度的降解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4三種磷酸鹽，最高溶磷量分別為409.28μg/mL、60.59μg/mL、32.90μg/mL。但是，在溶解FePO4和AlPO4時(shí)受培養(yǎng)環(huán)境pH的影響較大，將wj6接種到pH8的溶磷培養(yǎng)基中，該菌株能溶解FePO4和AlPO4，在培養(yǎng)基原液（pH3）中不具有溶磷能力。從溶磷菌產(chǎn)酸角度對(duì)溶磷機(jī)制進(jìn)行了研究。在以磷酸鈣為唯一磷源的條件下，菌株溶磷過程中伴隨著pH值的降低。采用GC-MS對(duì)菌株在溶磷過程中產(chǎn)生的有機(jī)酸分析：4株溶磷菌主要產(chǎn)生的有機(jī)酸有：2，2-二甲氧基丙酸、α-酮戊二酸、4-hexadiened
6、ioicacid、3-hydroxydecanoicAcid、蘋果酸、hepta-2,4-dienoicacid、乙酸、琥珀酸、檸檬酸等。酶活性檢測(cè)結(jié)果表明，在溶磷過程中菌液磷酸酶活性顯著增強(qiáng)。從wj1、wj3、wj5和wj6溶磷菌中克隆GDH基因，分別獲得大小為2007bp、2066bp、1727bp、2391bp的基因片段。序列分別與GenBank中Pseudomonasbrassicacearumsubsp.brassicacearumNFM421、EnterobacterasburiaeL1、OchrobactrumanthropiATCC49188、Klebsi
7、ellapneumoniaesubsp.pneumoniaeKP5-1中的GDH基因相似性達(dá)到92.30%、96.51%、85.12%、99.29%。綜合12h和48h時(shí)間下wj1和wj3GDH基因在不同磷源以及不同pH值的NBRIP培養(yǎng)基中GDH基因表達(dá)量的變化結(jié)果表明，菌株在溶磷過程中GDH基因都有表達(dá)，同種菌在不同磷源的NBRIP培養(yǎng)基中表達(dá)量差異較大，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)量也在變化。培養(yǎng)相同時(shí)間，wj1和wj3兩種菌株GDH基因在pH值為5~9的NBRIP培養(yǎng)基中表達(dá)量變化趨勢(shì)一致。12h時(shí)，在pH5的培養(yǎng)基中表達(dá)
