石斛、北豆根、肉桂的dna條形碼鑒定及鐵皮石斛葉綠體基因組研究

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1、．中＠聲５劉《辦＞碩±研究生學(xué)位論文龜北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究生院學(xué)校代碼ｉ１００２３學(xué)號(hào)：Ｓ２０１２００９（Ｂ２碩ｄｒ?qū)W位論文石解、北豆根、肉桂的ＤＮＡ條形碼鑒定及鐵皮石解葉綠體基因組研究ＤＮＡＢａｒｃｏｄｉｎＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｉＣａｕｌｉｓｇ，ＭｅｎｉｓｅｒｍｉＲｈｉｚｏｍａＣｉｎｎａｍｏｍｉＣｏｒｔｅｘａｎｄｔｈｅＳｔｕｄｏｎｐ，ｙＣｈｌｏｒｏｐｌａｓｔＧｅｎｏｍｅｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ所院；藥用植物研究所

2、姓名：楊培指導(dǎo)教師；匆腑副硏究員學(xué)科專業(yè)；中藥學(xué)研究方向：中藥鑒定完成日期：２０１５年５月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字曰期：２〇＊歹年ｉ月／主曰叔巧學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解化京協(xié)和醫(yī)學(xué)院有關(guān)

3、保存、使用學(xué)位論文的管理辦法。有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)巧件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院可將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)、。數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可Ｗ采用影印縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：＞（簽字日期１Ｔ日簽字日期：方｜／日：說Ｓ年６月Ｊ＾年《月Ｉ學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：電話：通訊地址：：郵編目錄中；＾摘要ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ第一章文獻(xiàn)綜述１１１．１中藥

4、鑒定方法的起源１．２基于理化性質(zhì)分析的蓬勃發(fā)展期２１．３基于核酸信息的分子鑒定期４１．４展望７第二章石解及其混偽品ＤＮＡ條形碼鑒定及鐵皮石解葉綠體基因組研究９２．１石解及其海偽品ＩＴＳ２序列鑒定研究９２丄１材料與方法１０２丄２結(jié)果及分析１４２丄３討論１７２．２鐵皮石解葉綠體基因組測(cè)序、分析及ＤＮＡ條形碼篩選１９２．２．１材料與方法２０２．２．２結(jié)果與討論２２２．２．３小結(jié)３５－２％．３基于ｐｓｂＫｐｓｂＪ候選序列的石解屬部分物種及其混偽品鑒定研究２．３．１材料與方法％

5、２３．２結(jié)果３７２．３．３討論３８２．４結(jié)論３９第Ｈ章北豆根及其混偽品ＤＮＡ條形碼鑒定研究４１３．１材料與方法４２３．１．１材料４２３．１．２方法４４３．２結(jié)果與分析４６３．２．１ＰＣＲ擴(kuò)増、測(cè)序效率及序列特征４６３．２．２種內(nèi)種間遺傳距離分析及物種鑒定４７３．３討論４８－３．３．１ｓ＆４化《好序列ｐｏｌ結(jié)構(gòu)對(duì)測(cè)序效率的影響４８ｐｙ３．３．２ＩＴＳ２多拷貝現(xiàn)象與鑒定效率４８３．３．３ＤＮＡ條形碼鑒定對(duì)北豆根及其混偽品鑒定的穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性４９３．３

6、．４ＤＮＡ條形碼技術(shù)在藥材流通市場(chǎng)監(jiān)管中的應(yīng)用４９３．４結(jié)論５０第四章肉桂及其混偽品ＤＮＡ條形碼鑒定研究５１４．１材料與方法５２４丄１材料５２４丄２方法５２４．２結(jié)果與分析５４４．２．１ＰＣＲ擴(kuò)增與測(cè)序效率５４４５４．２．２肉桂及其混偽品種內(nèi)種間變異分析４巧．２．３肉桂及其混偽品的ＮＪ樹鑒定４．３討論５６４．３．１皮類藥材ＤＮＡ提?。担叮崳姡阅悖矗墸担常玻墸穑螅托蛄锌蓪?shí)現(xiàn)肉桂藥材及其混偽品的準(zhǔn)確鑒定７４３．３ＤＮＡ條形碼分子鑒定在監(jiān)管藥食同源物種中的應(yīng)用前景５７

7、４．４觀５８參考：＾：獻(xiàn)５９致謝６９７１個(gè)人簡(jiǎn)搪要ＤＮＡ條形碼自提出Ｗ來，經(jīng)過十余年的發(fā)展，技術(shù)體系日漸成熟，在中藥鑒定方面的應(yīng)用也越來越廣泛。本研究對(duì)石解、北豆根、肉桂及其混偽品進(jìn)行ＤＮＡ條形碼鑒定研究，并結(jié)合鐵皮石解葉綠體基因組進(jìn)行了珍稀漸危石解屬ＤＮＡ條形碼序列篩選研究。主要研究結(jié)果如下：（１）考察打Ｓ２序列對(duì)石斜屬４０種、１７３份樣品的鑒定能力，結(jié)果表明本研究設(shè)計(jì)的ＤＯＦ／Ｒ引物可Ｗ實(shí)現(xiàn)鐵皮石解藥材ＩＴＳ２序列的擴(kuò)增和測(cè)序，石觸屬ＩＴＳ２序列種內(nèi)變異小于種間變異，鑒定效率為７５．７

8、２％和別．２７％（ＢＬＡＳＴ和ＮｅａｒｅｓｔＤｉｓｔａｎｃｅ方法），能實(shí)現(xiàn)對(duì)石解屬大部分物種的準(zhǔn)確鑒定