自噬在鎘誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞凋亡中的作用

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1、＇．－’：－－‘ｒ、＇？－＇＾之，＇Ｖ．泰接，六足著、．＂分類號(hào)２學(xué)號(hào)、—．．言—染＿妥種今，早與去兩＾；鹽＿廬＇過？；密級．－．哪興術(shù)＞皆－輯：．大華—喜癸轉(zhuǎn)秦叫滿麥＇．ＹＡＮＧ／ＨＯＩＮｌＶｈＲＳＩＴＹＩｌｌｌ．ｌ＇―．—？？＇＇於＇？、■？＇’＇、？分＇若式＾；．碩去學(xué)往冷文胃：蘆＾＾Ｖ爐璋（學(xué)術(shù)型）寒聲篆ｆ＇、自隘在痛誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞調(diào)ｔ中的作用．皆＾：，告擊代楠撫ｉ三＾＇—；－－．Ｖ＇■－：＊：；＇盧ｉ．子－２２５００９指導(dǎo)教師姓名：劉宗

2、平教授，揚(yáng)州大學(xué)，江蘇揚(yáng)州，――女：＇申請學(xué)位級別、；碩壬學(xué)科專業(yè)名稱：臨床獸匯學(xué)＿＿專Ｙ論文提交日期：２０１５年４月論文答辯巧期：２０１５年６月／ｖ－Ａ：學(xué)位授予單位：揚(yáng)州大學(xué)學(xué)位授予日期；劉吁車巧――．答辯委員會(huì)主席？ｙ：名巧娜讀焉．，－＂－—：心＇產(chǎn)占＾Ｖ－…Ｉ；契備＊＾、扛一、＾、？－、．ｒ：Ｖ２０１５年６月？，．＾、－’‘一．－．－．．巧方托每．．巧議＇＇．、．．＇，扛＾－－．＾．；：Ｋ潘六戚縣巧皆１方：品黃自趟在福誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞調(diào)ｔ：中的作用ｈａ－Ｔｈｅ

3、ｒｏｌｅｏｆａｕｔｏｉｎｃａｄｍｉｕｍｉｎｄｕｃｅｄａｏｔｏｓｉｓｐｇｙｐｐｏｆｒｉｍａｒｒａｔｏｓｔ：ｅｏｂｌａｓｔｓｐｙ研究生；代楠楠學(xué)科；臨床善醫(yī)學(xué)導(dǎo)師：劉宗平教授巧州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院２０１５年６月代楠楠自嚼在福誘導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞調(diào)ｔ中的作用Ｉ自隨在箱巧導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞漏亡中的作用中文摘要福是廣泛存在于環(huán)境中的重金屬污染物，由于其累積毒性可對機(jī)體造成極大的損害，。它可對機(jī)體的多個(gè)器官造成損害其中腎臟和骨骼是福主要的毒害器官。福骨毒性，相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道很多但婦暴露對成骨細(xì)胞自隨和調(diào)亡方面的報(bào)道較少

4、，。因此本研究通過建立體外大鼠原代成骨細(xì)胞婦中毒模型，探討了稿暴露對成骨細(xì)胞自喧和調(diào)ｔ的影１５ｍｏ響Ｗ及自幢對調(diào)亡的作用。不同濃度的醋酸福（０、、２、＾ｌ化）處理原代大鼠成骨細(xì)胞１２ｈ或２ｙｍｏｌ／Ｌ醋酸福處理成骨細(xì)胞０、１、２、３、６、１２ｈ，免疫印跡檢測ＢＢ－２－ａｘ、ｃｌ、ＣｌｅａｖｅｄＰＡＲＰ的蛋白表達(dá)，ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色觀察細(xì)胞核的變化來研究福能否誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡（０、１、２、５ｍｉｏｌ／Ｌ）；不同濃度的醋酸福ｉ處理原代大鼠成骨細(xì)、、、、１２－２ｎｏ，胞Ｉｈ或叫ｌ／Ｌ醋酸領(lǐng)處理成骨細(xì)胞０、１２３６ｈ免疫印跡檢測Ｌ

5、Ｃ３ＩＩ、ｅｃ－Ｂｌｉｎ１的表達(dá)量，ＭＤＣ染色法、ＡＯ染色法、免疫巧光觀察ＬＣ３的聚點(diǎn)現(xiàn)象來探究、，）福暴露細(xì)胞的自唆水平；福雷帕霉素（ＲＡＰ）單獨(dú)或共處理氯唾（ＣＱ、福單獨(dú)ＲＮＡ干擾－，免疫印跡測定ＬＣ３ＩＩ的表達(dá)量或共處理及、流式細(xì)胞術(shù)測定調(diào)亡率來研究自隨對調(diào)ｔ的作用。結(jié)果表明：①０、１、２、５＾ｉｍｏｌ／Ｌ醋酸福處理大鼠成骨細(xì)胞１２ｈ或２＾ｉｍｏｌ／Ｌ醋酸－１２ＢＢ２福處理細(xì)胞、、３、６、１２ｈ，與對照組相比，染福組ａｘ／ｃｌ比值顯著或極顯著升＜＜０－．０５．０１）高（尸０或ｆ，ＣｌｅａｖｅｄＰＡＲＰ蛋白表達(dá)量極顯著上

6、調(diào)（戶＜０．０１）染福能引；起成骨細(xì)胞核形態(tài)的改變，出現(xiàn)核皺縮、染色質(zhì)凝集等典型的調(diào)亡特征，且隨著染領(lǐng)濃度的增強(qiáng)，發(fā)生核形態(tài)改變的細(xì)胞數(shù)增多，２１１？〇１／１＾。②與對照組相比＾福處理成骨細(xì)胞Ｉｈ后，ＭＤＣ巧光強(qiáng)度增強(qiáng)，出現(xiàn)明亮的點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)；染福組細(xì)胞出現(xiàn)明顯的ＬＣ３聚點(diǎn)現(xiàn)象２、５ｎ〇ｙＬ醋酸福處理大鼠成骨細(xì)胞Ｉｈ后，與對照組相比，１、２ｉｒｎｏｌ／Ｌ；０、１、叫｜（染攝組ＡＯ染色紅色費(fèi)光強(qiáng)度顯著或極顯著增強(qiáng)尸＜０．０５或尸＜０．０１），而５＾１１１〇１／１＾染福組紅色巧光強(qiáng)度極顯著下降（Ｐ＜０．０１）；不同濃度的醋酸福處理成骨細(xì)胞Ｉｈ

7、后，隨－著染福濃度的增加，ＬＣ３ＩＩ的表達(dá)量先增加，１、、后降低，且與對照組相比２＾ｍｏｌ／Ｌ一３－－－染福組ＬＣＩＩ表達(dá)量顯著升高；Ｂｅｃｌｉｎ１蛋白表達(dá)的變化與ＬＣ３ＩＩ基本致。２腳ｏｌ／ＬＬＣ－醋酸福處理成骨細(xì)胞不同時(shí)間后，隨著染毒時(shí)間的延長，３ＩＩ表達(dá)量先増加，、后降低－＜０－且與對照組相比．０，染毒化后（包括化）ＬＣ３ＩＩ表達(dá)量顯著下調(diào)（；７１）ｅｄｉｎ１；ＢＣ３－１Ｉ蛋白表達(dá)的變化與Ｌ相似，ＲＡＰ。⑤與單獨(dú)染領(lǐng)組相比與錦聯(lián)合處理組及ＣＱ與ＬＣ３－ＩＩＲＡＰ福聯(lián)合處理組，蛋白表達(dá)量均顯著升高；與儒聯(lián)合處理組細(xì)胞調(diào)亡率極顯

8、著＜０．０１）理組細(xì)胞調(diào)亡率極顯著升高（降低（；