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《通心絡(luò)改善缺氧引起內(nèi)皮細胞損傷的作用機制》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、授予單位代碼10089學號或申請?zhí)?0122606HebeiMedicalUniversity碩士學位論文科學學位通心絡(luò)改善缺氧引起內(nèi)皮細胞損傷的作用機制研究生：宋莉莉?qū)煟亨嵄蠼淌趯I(yè)：生物化學與分子生物學二級學院：基礎(chǔ)醫(yī)學院2015年3月河北醫(yī)科大學學位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學位論文在導師（或指導小組）的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研宄所獲得的研宄成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權(quán)對本學位論文進行交流、公幵和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為
2、單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應(yīng)法律責任。研宄生簽名：求詵和導師簽二級學院領(lǐng)導蓋章對年}月4日河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研宄工作及取得的研宄成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名：導師簽章:Wi"年》月3丨曰目錄中文摘要………………………………………………………………1英文摘要…………………
3、……………………………………………5英文縮寫………………………………………………………………9研究論文通心絡(luò)改善缺氧引起內(nèi)皮細胞損傷的作用機制前言………………………………………………………………10材料與方法………………………………………………………11結(jié)果………………………………………………………………19附圖………………………………………………………………23討論………………………………………………………………33結(jié)論………………………………………………………………35參考文獻……………………
4、……………………………………35綜述KLF4和KLF5的翻譯后修飾的研究進展………………………38致謝……………………………………………………………………49個人簡歷………………………………………………………………50中文摘要通心絡(luò)改善缺氧引起內(nèi)皮細胞損傷的作用機制摘要目的：缺氧是常見的導致血管內(nèi)皮受損的因素之一。大多數(shù)心血管疾病發(fā)生都是由于血管內(nèi)皮損傷后引起的，因此積極控制對血管內(nèi)皮細胞有損傷作用的因素對預防心血管疾病的發(fā)生有著重要的意義。MicroRNA-155（miR-155）是一個典型的多
5、功能的microRNA，在心血管疾病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。最近有研究提示，miR-155對心血管疾病相關(guān)細胞---內(nèi)皮細胞、單核巨噬細胞以及血管平滑肌細胞的功能均有不同程度的影響。KLF4和KLF5是KLF家族中重要的成員，它們都是含有鋅指樣結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子，在調(diào)控細胞增殖、分化以及組織形成等方面都發(fā)揮著重要的作用。SUMO化(sumoylation)是一種類泛素化的翻譯后修飾方式。SUMO化可引起蛋白質(zhì)表面特征的改變并調(diào)控蛋白質(zhì)間的相互作用，從而影響靶蛋白定位、活性以及穩(wěn)定性等多方面的性
6、質(zhì)。通心絡(luò)（Tongxinluo,TXL）是一種中藥復方提取物，在臨床上主要用于治療心腦血管疾病。本研究旨在為闡明通心絡(luò)對血管內(nèi)皮細胞緊密連接蛋白的保護作用及其分子機制以及為其擴大臨床應(yīng)用范圍提供實驗依據(jù)。方法：將C57BL/6J小鼠隨機分為對照組,缺氧組和缺氧+通心絡(luò)預孵-/-育組。miR-155敲除（miR-155）小鼠隨機分為缺氧組和缺氧+通心絡(luò)預孵育組。缺氧組和缺氧+通心絡(luò)預孵育組置于自制低壓氧艙內(nèi)，每天6小時，共28天。通心絡(luò)預孵育組按7.5mg/10g體重每天給予通心絡(luò)超微粉混懸液灌胃
7、。28天后取小鼠主動脈進行免疫熒光染色。培養(yǎng)人心臟微血管內(nèi)皮細胞，分組給予通心絡(luò)和缺氧刺激，Westernbolt方法分別檢測緊密連接蛋白，HIF-1a，UBC9，KLF4以及KLF5的表達。用GFP和miR-155腺病毒刺激人心臟微血管內(nèi)皮細胞并用靶向miR-155的siRNA敲低miR-155轉(zhuǎn)染人心臟微血管內(nèi)皮細胞，用Westernbolt方法檢測在過表達miR-155或敲低miR-155時緊密連接蛋白的表達；用qRT-PCR方法檢測對照組、缺氧組及缺氧+通心絡(luò)預孵育組小鼠主動脈內(nèi)miR-1
8、55的表達；免疫共沉淀（COIP）的方法檢測缺氧、通心絡(luò)刺激條件下KLF4和KLF51中文摘要與UBC9的相互作用以及KLF4和KLF5的蘇素化水平。通過雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)分析KLF4及KLF5的蘇素化對miR-155啟動子活性的影響。結(jié)果：1通心絡(luò)可以上調(diào)缺氧抑制的緊密連接蛋白的表達免疫熒光結(jié)果顯示，慢性缺氧組主動脈內(nèi)緊密連接蛋白陽性細胞數(shù)少于正常對照組，與缺氧組相比，缺氧+通心絡(luò)預孵育組小鼠主動脈內(nèi)緊密連接蛋白陽性細胞數(shù)明顯增加。Westernbolt結(jié)果與其相一致。提
