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《東鄉(xiāng)野生稻抗旱漸滲系篩選及抗旱基因差異表達(dá)研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:__________密級:.學(xué)校代碼:10414,學(xué)號:2012010713《2琢師忽犬學(xué)*?'^■'V//,9fri'h'>■*■-'.,,碩士研究生學(xué)位論文東鄉(xiāng)野生稻抗旱漸滲系篩選及抗旱基因差異表達(dá)研究Screeningofdrought-resistanceintrogressionlinesanddifferentialexpressionanalysisofdrought-resistancerelatedgenesfromDongxiangwiIdrice{0?rufipogonGriff.)院所:生命科學(xué)學(xué)院導(dǎo)
2、師姓名:謝建坤教授學(xué)科專業(yè):生態(tài)學(xué)研究方向:分子生態(tài)學(xué)二〇一五年五月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:簽字日期:年月日本研究受國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360327)省落地計(jì)劃(KJLD12059)省重大科技專項(xiàng)計(jì)劃(20114ABF03101)
3、國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201103007)共同資助摘要隨著全世界自然環(huán)境的惡化,干旱已對人類社會經(jīng)濟(jì)生活和工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了巨大的影響及損失,對水稻生產(chǎn)影響尤其深重。全世界自然氣候的惡性轉(zhuǎn)變致使干旱發(fā)生的周期愈來愈短,程度愈來愈嚴(yán)重,對糧食產(chǎn)量構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅,由其導(dǎo)致的糧食減產(chǎn),可超過其它環(huán)境脅迫所造成的減產(chǎn)總和。干旱已成為影響水稻生產(chǎn)最主要的非生物影響因子,發(fā)掘抗旱資源、研究其抗旱機(jī)理、進(jìn)而培育抗旱水稻新品種是緩解這一不利影響的有效途徑。東鄉(xiāng)野生稻(O.rufipogon)是普通栽培稻的祖先,蘊(yùn)藏大量優(yōu)質(zhì)基因。課題組前期研
4、究表明,東鄉(xiāng)野生稻(以下簡稱“東野”)具有強(qiáng)抗旱特性,并利用“東野”為供體親本,干旱脅迫敏感的栽培稻“協(xié)青早B”為受體親本,通過雜交、回交構(gòu)建了“東野”//“協(xié)青早B”回交重組自交系群體(BC1F9,“東野”漸滲系)。本研究在上述研究基礎(chǔ)上,利用苗期反復(fù)干旱處理法,以死苗率為評價(jià)指標(biāo),篩選到2個(gè)抗旱性極強(qiáng)的株系,分別命名為M0749和M0769,其干旱脅迫條件下存活率分別為91.6%和90.5%。對M0749及其親本在正常及干旱脅迫條件下進(jìn)行可溶性糖,脯氨酸和可溶性蛋白含量進(jìn)行分析,結(jié)果表明“東野”和漸滲系后代M0749干旱脅迫處理后
5、可溶性糖、脯氨酸和可溶性蛋白含量明顯增加,且相對增幅都明顯大于協(xié)青早B。為鑒定“東野”干旱脅迫響應(yīng)基因,利用cDNA-AFLP技術(shù),以”東野”、“協(xié)青早B”和漸滲系后代M0749為研究對象,對干旱脅迫處理下植株的基因表達(dá)譜進(jìn)行分析。使用6對引物組合對模板進(jìn)行選擇性擴(kuò)增,共分離得到27條差異表達(dá)的轉(zhuǎn)錄衍生片段(TDFs),對這些TDFs進(jìn)行測序并分析后發(fā)現(xiàn),其功能涉及脅迫蛋白表達(dá)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄因子、逆轉(zhuǎn)座子、氧化還原和未知功能蛋白等。隨機(jī)挑選5條顯著差異表達(dá)的TDFs,利用qRT-PCR技術(shù)進(jìn)行表達(dá)量檢驗(yàn),所得結(jié)果與cDNA-AFLP
6、結(jié)果一致。因此,cDNA-AFLP技術(shù)可運(yùn)用到“東野”抗旱基因的篩選,實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可為“東野”抗旱分子機(jī)理提供借鑒和參考。關(guān)鍵字:東鄉(xiāng)野生稻;漸滲系;抗旱性;生理參數(shù);cDNA-AFLPIAbstractWiththedeteriorationofglobalecologicalenvironment,droughthasalreadycausedgreatimpactsandlossesonhumansocietyandeconomiclifeaswellasindustrialandagriculturalareas,especi
7、allyinriceproduction.Malignanttransformationoftheglobalnaturalclimatemakesthedroughtcycleshorterandshorter,andmoreandmoreserious,whichcausesseriousthreatstograinproduction.Grainreductioncausedbydroughtexceedsthesumofreductioncausedbyotherenvironmentalthreats.Droughthasb
8、eenconsideredasoneofthemostimportantabioticinfluencefactorsaffectingriceproduction.Therefore,exploringtheresou