利用植物和土壤脂類生物標記物對高寒草甸退化演替的判別分析研究

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1、分類號:S812密級:公開UDC:編號:2015120909001012012級攻讀碩士學位研究生畢業(yè)論文利用植物和土壤脂類生物標記物對高寒草甸退化演替的判別分析研究DiscriminationAnalysisofRetrogressiveSuccessionwithLipidBiomarkersfromPlantsandSoilonAlpineMeadow指導教師:喬有明教授學生姓名:梁海東學科專業(yè)名稱:草業(yè)科學研究方向:草地生態(tài)與環(huán)境保護學院(系、部):農(nóng)牧學院論文起止時間:2012.10—2015.4QinghaiUniversityMasterDissert

2、ationDiscriminationAnalysisofRetrogressiveSuccessionwithLipidBiomarkersfromPlantsandSoilonAlpineMeadowSupervisor:Prof.QiaoYou-mingCandidate:LiangHai-dongAcademicMajorApplidedfor:GrasslandScienceSpecificMajor:GrasslandEcologyandEnvironmentalProtectionCollege(Department):QinghaiUniversit

3、yApril,2015青海大學碩士學位論文摘要摘要利用脂類生物標記物分析環(huán)境變化或溯源有機物是一種新的研究手段,在高寒草甸退化研究方面還沒有相關的報道。本研究針對高寒草甸退化與否存在不同觀點的事實,通過提取和分析植物和土壤脂類物質,試圖找出反映植被變化的生物標記物,為研究高寒草甸退化、合理保護和可持續(xù)利用提供科學依據(jù)。通過對植物和土壤脂肪酸提取方法的篩選、反應條件的優(yōu)化,確定了最佳的脂肪酸提取方法。對提取的植物和土壤脂肪酸總的分布特征、退化以及未退化高寒草甸植物脂肪酸分布、人工草地植物脂肪酸分布、土壤總的脂肪酸分布、不同深度土壤脂肪酸的變化、退化以及未退化高寒草甸土

4、壤脂肪酸變化以及植物與土壤脂肪酸比較研究等方面進行了比較,主要結果和結論如下:1.采用HCl-甲醇甲酯化、BF3-甲醇甲酯化以及硅烷化三種預處理提取植物中的脂肪酸,并使用GC-MS方法進行分離和鑒定,結果表明硅烷化方法效果最差,且會引起色譜柱流失,HCl-甲醇甲酯化、BF3-甲醇甲酯化方法效果較優(yōu),綜合比較可鑒定脂肪酸種類、操作以及安全、回收率后確定較優(yōu)提取方法為HCl-甲醇甲酯化方法。2.對HCl-甲醇甲酯化方法反應條件進行優(yōu)化,確定植物較優(yōu)反應條件為KOH-甲醇溶液加入量為3mL,皂化溫度75℃,皂化時間5min,HCl-甲醇溶液加入量7mL,甲酯化溫度65℃,

5、甲酯化時間10min;土壤為KOH-甲醇溶液加入量為1mL,皂化溫度75℃,皂化時間20min,HCl-甲醇溶液加入量7mL,甲酯化溫度65℃,甲酯化時間10min。3.對植物脂肪酸進行分析,最終確定52種植物共68種脂肪酸,并根據(jù)脂肪酸分布分為微、低、中以及高頻次分布4種類型脂肪酸;對高寒草甸退化以及未退化進行了比較,種類上退化高寒草甸高于未退化高寒草甸,含量上未退化高寒草甸要高于退化高寒草甸,進一步確定得出退化高寒草甸7種獨有的脂肪酸,15-二十四烯酸(C24H46O2)、8,8-二甲氧基辛酸(C10H18O4)、壬酸(C9H18O2)、7,10,13-十六碳三

6、烯酸(C16H26O2)、12-甲基十三酸(C14H28O2)、2-羥基十二烷酸(C12H24O3)、3-苯丙酸(C9H10O2)對高寒草甸退化演替具有較強的指示判別功能;對不同草地類型植物花生酸(C20H40O2)含量進行了測定,得出退Ⅰ青海大學碩士學位論文摘要化、未退化高寒草甸以及人工草地之間差異均顯著(P<0.05),含量依次為0.4930、0.9470、0.1585mg/g,也可作為高寒草甸退化的重要依據(jù)之一。4.對土壤脂肪酸進行了鑒定,共發(fā)現(xiàn)41種,碳數(shù)分布為C3-C28,飽和脂肪酸33種,單不飽和脂肪酸5種,多不飽和脂肪酸3種。土壤脂肪酸種類遵循0-10

7、cm≥10-20cm≥20-30cm規(guī)律;0-10cm土層土壤山崳酸含量(C22H44O2),退化與未退化草甸差異顯著(P<0.05),含量依次為4.7、9.6mg/kg。5.植物與土壤脂肪酸比較得出,輕度退化以及未退化高寒草甸脂肪酸種類變化呈現(xiàn)植物≥0-10cm土層≥10-20cm土層≥20-30cm土層;輕度退化草甸中植物與土壤脂肪酸在含量與種類上比較后發(fā)現(xiàn)輕度退化不能得到良好的反應。關鍵詞:高寒草甸脂肪酸脂類生物標記物退化GC-MSⅡAbstractAbstractUsinglipidbiomarkersasindicatorsofenvironmentc

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