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1、天津大學博士學位論文鹿茸活性成分的提取及一種新型微膠囊的制備姓名：王金宇申請學位級別：博士專業(yè)：化學工藝指導(dǎo)教師：李淑芬20060101摘要鹿茸是傳統(tǒng)名貴中藥，具有溫。腎壯陽、益精補血、強筋健骨等功效。鹿茸的化學成分比較復(fù)雜，含有多種重要的活性物質(zhì)：如不飽和脂肪酸和溶血卵磷脂等具有降低血壓、治療心血管疾病的作用；對羥基苯甲醛(PHBD)、次黃嘌呤和磷脂等具有抑制單胺氧化酶(MAO)的作用；雌激素、孕酮等激素對女性更年期綜合癥有預(yù)防和治療作用；胰島素樣生長因子．I(IGF．1)和生長激素(GH)可促進生長發(fā)育、用來治療糖尿病、骨質(zhì)疏松等疾病?，F(xiàn)有的鹿茸加工方
2、式比較粗放，產(chǎn)品結(jié)構(gòu)單一，為進一步拓寬鹿茸的市場應(yīng)用空間，提高其附加值，本課題采用超臨界流體萃取技術(shù)、超聲波強化提取技術(shù)和其它蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)，從鹿茸中提取三類功效明確、在臨床上具有重要應(yīng)用價值的活性成分；包括單胺氧化酶抑制劑、天然雌激素和IGF．1等活性多肽。采用動態(tài)法實驗測定了PHBD在超臨界C02中的溶解度；另外還對利用干酵母假cerevisiae)細胞作為囊壁材料制備微膠囊進行了初步研究。首先采用超臨界C02萃取水炸干鹿茸中具有抗衰老作用的單胺氧化酶抑制劑。通過對萃取溫度、萃取壓力、夾帶劑種類和原料粒度的考察，確立最佳萃取工藝條件，提取率可以達到
3、3．58％，萃取物對MAO-B的總抑制活性可以達到3319．13U／g。萃取物對MAO．B的抑制作用呈明顯的量效關(guān)系：當萃取物溶液的濃度為278．15mg／L時，對MAO．B的抑制作用達到93．77％，但對MAO-A的抑制率只有24．18％。利用HPLC、11℃、GC、GC．MS和放射免疫分析等方法對萃取物的化學組成進行分析，萃取物中除含有對MAO有抑制作用的活性成分次黃嘌呤、對羥基苯甲醛和磷脂外，還含有不飽和脂肪酸、谷甾醇、維生素E、甾體化合物、膽固醇、雌二醇、睪酮和孕酮等物質(zhì)。另外，采用超I艋界流體萃取和濃縮干鹿茸中的雌激素，雌二醇提取率可以達到O．3
4、342ng／g鹿茸。萃取物中雌二醇和孕酮含量分別為48．42ng／g和197．04ng／g，有望作為開發(fā)成預(yù)防和治療女性更年期綜合癥產(chǎn)品的原料。采用超聲波強化提取鮮鹿茸中的IGF．1?？疾炝巳芤悍N類和pH、浸提溫度、浸提時間、浸提液用量、浸提次數(shù)及超聲功率等因素的影響。以pHl0．0的I號緩沖液作浸提液，IGF．1的提取率可以達到5279．29ng／g鮮茸。采用超聲波強化提取具有提取率高、提取速度快的優(yōu)點。選用10kDa的超濾膜，將IGF．1粗提液濃縮6～10倍，IGF．1損失率僅為2．49％，且超濾濃縮速度快。利用無水乙醇去除雜蛋白質(zhì)的效果最佳，雜蛋白質(zhì)
5、去除率為91．59％，IGF．1含量提高8．97倍，IGF．1損失率為24．52％。通過陽離子交換層析，總蛋白中IGF．1的含量提高了12．Ol倍，IGF．1和蛋白質(zhì)的回收率分別為91．73％和66．85％。進一步通過SDS．P：AGE和高效毛細管電泳鑒定，表明鮮鹿茸提取液中含有IGF．1。另外，通過放射免疫分析法檢測，鹿茸的IGF．1粗提液中還含有生長激素。以鹿茸凍干粉為原料，首先采用超臨界純C02萃取鹿茸中的單胺氧化酶抑制劑等脂類活性物質(zhì)，然后采用溶劑浸提萃余物中IGF．1等活性多肽。結(jié)果表明，綜合提取鹿茸中的脂類活性物質(zhì)和IGF．1等多肽是可行性的。
6、利用動態(tài)法實驗測定了對羥基苯甲醛(PHBD)在超臨界c02中的溶解度，考察改變溫度或壓力對其溶解度的影響。當溫度恒定時，PHBD在超臨界c02中的溶解度隨壓力增加而增大；PHBD溶解度隨溫度變化趨勢比較復(fù)雜。利用溶解度與壓力和對比密度兩個經(jīng)驗方程進行關(guān)聯(lián)，關(guān)聯(lián)誤差在3．67～11％之間，表明這兩個方程可用于PHBD在C02中溶解度的關(guān)聯(lián)。利用PR—EOS計算值較實驗結(jié)果有較大誤差。分別以丁香油和水楊酸甲酯為囊芯，以干酵母細胞作為囊壁材料制備一種新型的微膠囊。通過對包埋溫度、芯材比及包埋時間等因素的考察，確定了最佳制備工藝條件，微膠囊中丁香油包埋率可以達到4
7、1．26％，而水楊酸甲酯包埋率為48．58％。通過顯微鏡和電鏡觀察，微膠囊呈規(guī)則的球形，大小均一，直徑在2．O～4．0岫之間。這種新型的微膠囊制備方式，具有操作簡單、包埋率高、不引入有機溶劑的特點，適合制備藥物、食品添加劑等囊芯的微膠囊。關(guān)鍵詞：鹿茸，單胺氧化酶抑制劑，雌激素，胰島素樣生長因子．1，超臨界流體萃取，超聲波強化提取，微膠囊，干酵母細胞ABSTRACTAntlervelvethasbeenusedintraditionalChinesemedicinesforovertwothousandyears．Ithaslongbeenrecognize
8、dasoneofthemosteffectiveandpowerf
