艾滋病、梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

艾滋病、梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

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1、艾滋病、梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法及生物安全高金亮博士分子生物學(xué)主任技師鄂爾多斯市疾病預(yù)防控制中心2013年1月15日艾滋病,即獲得性免疫缺陷綜合癥(acquiredimmunedeficencysyndrome,AIDS)。是人類因?yàn)楦腥救祟惷庖呷毕莶《荆℉umanImmunodeficiencyVirus,HIV)后導(dǎo)致免疫缺陷,并發(fā)一系列機(jī)會(huì)性感染及腫瘤,嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡的綜合征。目前,艾滋病已成為嚴(yán)重威脅世界人民健康的公共衛(wèi)生問題。艾滋病艾滋病的發(fā)現(xiàn)美國(guó)1981年首先發(fā)現(xiàn)5名同性戀中患卡氏肺孢子蟲肺炎,數(shù)月后又在另外數(shù)例同性戀中

2、發(fā)現(xiàn)卡波濟(jì)氏肉瘤,相同的情況也出現(xiàn)在靜脈吸毒人群中。均有免疫功能減退,主要是CD4+T細(xì)胞的數(shù)減少。稱為獲得性免疫缺陷綜合癥。同年6月5日美國(guó)CDC最先向全世界報(bào)道AIDS。1983年,美國(guó)馬里蘭大學(xué)RobertGallo等從艾滋病病人體內(nèi)分離到一種與人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒(HTLV)非常相似的病毒,遂將該新發(fā)現(xiàn)的病毒命名為人類T淋巴細(xì)胞白血病III型病毒(HTLV-III)(Science220(4599):865–867)。與此同時(shí),法國(guó)巴斯德研究所的LucMontagnier等從一頸部淋巴結(jié)腫大、體質(zhì)虛弱的艾滋病患者體內(nèi)

3、分離到一種病毒,該病毒的核心蛋白與HTLV-I的免疫學(xué)特性不同,遂將該病毒命名為淋巴腺病相關(guān)病毒(LAV)(Science220(4599):868–871)。后經(jīng)證實(shí)這兩種病毒為同一種病毒,于1986年將該病毒更名為HIV。同年在非洲發(fā)現(xiàn)異性間傳播并發(fā)現(xiàn)HIV-2。WHO報(bào)告2010年全球約有3400萬人感染HIV,新感染270萬,全年死亡180萬人。每天有超過7000人新發(fā)感染。世界各地區(qū)均有流行,但97%以上在中、低收入國(guó)家,尤以非洲為重。在2011年年底各國(guó)青壯年(15-49歲)艾滋病的流行程度估計(jì)艾滋病流行狀況2008

4、年底各國(guó)艾滋病患者及HIV攜帶者人數(shù)估計(jì)1、發(fā)現(xiàn):1985年,一位美籍阿根廷青年以旅游者的身份進(jìn)入中國(guó),不久便因發(fā)燒、肺部感染住進(jìn)北京協(xié)和醫(yī)院,因該患者對(duì)各種抗感染類藥物均沒有作用,隨后進(jìn)行的血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其HIV呈陽(yáng)性。2、流行現(xiàn)狀:中國(guó)CDC估計(jì),截止至2011年底,我國(guó)存活HIV攜帶者及艾滋病患者約78萬人,全年新發(fā)感染者4.8萬人,死亡2.8萬人。疫情已覆蓋全國(guó)所有省、自治區(qū)、直轄市,目前我國(guó)面臨艾滋病發(fā)病和死亡的高峰期,且已由吸毒、暗娼等高危人群開始向一般人群擴(kuò)散。2009年疫情估計(jì)結(jié)果顯示,云南、廣西、河南、四川、新疆

5、、廣東等6省HIV感染者超過5萬人,占全國(guó)估計(jì)總數(shù)的61.8%;1~5萬人的省份有9個(gè);5千人以下的省份有8個(gè),占全國(guó)估計(jì)總數(shù)的2.3%。累計(jì)報(bào)告艾滋病病毒感染者和病人數(shù)排在后7位的省份是西藏、青海、寧夏、內(nèi)蒙、天津、甘肅、海南,報(bào)告人數(shù)不到全國(guó)報(bào)告總數(shù)的1%。中國(guó)AIDS流行情況病原學(xué)1、病原體AIDS的病原體是人類免疫缺陷病毒(HIV)。HIV屬于反(逆)轉(zhuǎn)錄病毒科,慢病毒屬人類免疫缺陷病毒組。2、病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)HIV呈球形或橢球形,直徑100-120nm電鏡下成熟的HIV-1呈現(xiàn)一致密的圓柱狀核心和一個(gè)病毒包膜。外層為類脂質(zhì)

6、包膜,膜上為突起插入,突起由糖蛋白(gp120)和跨膜蛋白(gp41)以共價(jià)鍵連接而成。病毒核心由病毒RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶,有核心蛋白p24、P6、P9包裹HIV的RNA為兩條相同拷貝(完全同源)的正股RNA鏈。HIV的形態(tài)HIV的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏3’—5’核酸外切酶活性,無法修復(fù)逆轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程中發(fā)生的錯(cuò)誤。HIV顆粒3、HIV的基因結(jié)構(gòu)及分型HIV可分為HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ兩型。HIV-1全長(zhǎng)9181bp,HIV-2全長(zhǎng)10359bp.(1)基因組成:HIV含3個(gè)結(jié)構(gòu)基因和6個(gè)調(diào)節(jié)基因Ⅰ:LTR-gag-pol-v

7、if-vpr-tat-rev-vpu-env-nef-LTR.Ⅱ:LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env-nef-LTR.(2)兩者的主要區(qū)別:①Ⅰ型含有vpu,而Ⅱ型含vpx。②vpr和nef與其他基因的關(guān)系也不同:AHIV-Ⅰ的vpr與vif相互重疊,而nef與env不重疊;BHIV-Ⅱ的vpr與vif不重疊,而nef與env相互重疊。(3)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物HIV-ⅠHIV-Ⅱ包膜蛋白基因env:gp160gp120gp41gp140gp105gp36群抗原基因gag:p55p24p18p56

8、p26p16多聚酶基因pol:p65p51p31p68p53p34HIV感染機(jī)理HIV病毒侵入人體后,其表面糖蛋白gp120與細(xì)胞表面受體蛋白CD4以高親和力結(jié)合,吸附到宿主細(xì)胞上;gp120再與宿主細(xì)胞表面輔助受體相互作用,使病毒與宿主細(xì)胞膜更接近;gp41產(chǎn)

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