基因工程2目標(biāo)基因分離

《基因工程2目標(biāo)基因分離》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。

1、第二章目的基因的克隆策略一、基因克隆的目的與意義Isolationofgeneofageneenablesthedeterminationofitsnucleotidesequence.Fromthisinformationtheinternallandmarksofthegenecanbedetermined–forexample,intronnumberandposition;promoterelements.AcomparisonofDNAsequencesbetweengenescanle

2、adtoinsightsingeneevolution.ConvertingtheDNAsequenceofageneintoaminoacidsequencebyusingthegeneticcodeleadstoadeterminationofthestructureoftheproteinproductofthegene,andfromthisknowledge,thefunctionofthegenecanbeinferred.Agenecanbemovedfromoneorganismt

3、oanother.Anorganismcontaininga"foreign"geneviageneticengineeringprocessiscalledtransgenic.Transgenicorganismscanbeusedeitherforlaboratoryresearchtoadvanceourunderstandingofbiologicalprocessesorforspecializedindustrialapplications–forexamples:·Developm

4、entofinsectresistantcropsProductionofhumaninsulinintransgenicbacteriacarryingappropriatehumangeneForwardGeneticsisanapproachthatencompassesseveralmeansofidentifyingthegeneorsetofgenesthatareresponsibleforaparticularphenotypewithinanorganism.Initially,

5、thisentailedthegenerationofrandommutationsinanorganism,oftenthroughradiation,andthenthroughaseriesofbreedingofsubsequentgenerations,isolatingindividualswithanaberrantphenotype.Todaytherearemanydifferentmeansoffollowingthegeneralpathofalteringthegenoty

6、petoobservethephenotype,severalofwhichwithinthegenomiceracanbeusefulinthestudyoffunctionalgenomics.ReversegeneticsisanapproachtodiscoveringthefunctionofagenebyanalyzingthephenotypiceffectsofspecificgenesequencesobtainedbyDNAsequenceing.反向遺傳學(xué)是相對于經(jīng)典遺傳學(xué)而

7、言的。經(jīng)典遺傳學(xué)是從生物的性狀、表型到遺傳物質(zhì)來研究生命的發(fā)生與發(fā)展規(guī)律。反向遺傳學(xué)則是在獲得生物體基因組全部序列的基礎(chǔ)上，通過對靶基因進(jìn)行必要的加工和修飾，如定點(diǎn)突變、基因插入缺失、基因置換等，再按組成順序構(gòu)建含生物體必需元件的修飾基因組，讓其裝配出具有生命活性的個(gè)體，研究生物體基因組的結(jié)構(gòu)與功能，以及這些修飾可能對生物體的表型、性狀有何種影響等方面的內(nèi)容。與之相關(guān)的研究技術(shù)稱為反向遺傳學(xué)技術(shù)。圖位克隆方法，這種方法又稱定位克?。╬ositoinalcloning），1986年首先由劍橋大學(xué)的

8、AlanCoulson提出。用該方法分離基因是根據(jù)功能基因在基因組中都有相對較穩(wěn)定的基因座，在利用分離群體的遺傳連鎖分析或染色體異常將基因佇到染色體的1個(gè)具體位置的基礎(chǔ)上，通過構(gòu)建高密度的分子連鎖圖，找到與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，不斷縮小候選區(qū)域進(jìn)而克隆該基因，并闡明其功能和疾病的生化機(jī)制。圖位克隆方法分離基因的優(yōu)點(diǎn)是無需預(yù)先知道基因的DNA順序，也無需預(yù)先知道其表達(dá)產(chǎn)物的有關(guān)信息。二、圖位克?。∕ap-basedcloning）法（未知序列的基因克隆）?90年代初發(fā)展起來的基