MalibatolA的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制研究

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1、TheinvestigationoftheprotectiveeffectsandmechanismsofMalibatolAincentralnerVOUSsystemADissertationSubmittedtoNanjingUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofScienceBYHuangSi-yuanSupervisedbyProf．XUYunNanjingDrumTowerHospitalAffiliatedHospitalofNanjingUnive

2、rsityMedicalSchoolMay2011南京大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南京大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所作的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：铞元日期：j。JJ．玉．二D南京大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明南京大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所、國家圖書館有權(quán)保

3、留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。除在保密期內(nèi)的保密論文外，允許論文被查閱和借閱，可公布論文的全部或部分內(nèi)容。論文的公布(包括刊登)授權(quán)南京大學(xué)研究生院辦理。研究生簽名：瑁剛?cè)诳簩?dǎo)師簽名：勺；乏三日期：·x“‘上勘南京大學(xué)碩士學(xué)位論文畢業(yè)論文題目：!魚鏖醫(yī)堂專業(yè)2009指導(dǎo)教師(姓名、職稱)：中文摘要目的：MalibatolA(MA)是本實(shí)驗(yàn)室自我國特有海南植物坡壘樹葉中提純并鑒定的化合物，具有抗氧化活性；本實(shí)驗(yàn)擬通過體

4、內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)MA是否具有神經(jīng)保護(hù)作用；進(jìn)一步研究其機(jī)制是否通過活化PPARY促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞處于替代型活化狀態(tài)，抑制炎癥反應(yīng)，起到腦保護(hù)作用。方法：第一部分實(shí)驗(yàn)：1．原代神經(jīng)元培養(yǎng)、鑒定及分組處理；2．MTT法檢測不同MA劑量處理(12．5、25、50、100、200um)神經(jīng)元存活率，選取最佳有效劑量；3．PI染色流式細(xì)胞技術(shù)檢測神經(jīng)元死亡率；4-，J、鼠大腦中動脈栓塞(MCAO)模型建立及處理；5．丌c染色法檢測不同MA劑量處理(5、10、20、40mg／kg，8mg／m1)24h后小鼠腦梗死體積，選取

5、最佳有效劑量；6．／J、鼠行為學(xué)評分檢測小鼠神經(jīng)功能改善情況。第二部分實(shí)驗(yàn)：1．體外實(shí)驗(yàn)檢測MA處理后活性氧自由基(ROS)變化；2．體內(nèi)實(shí)驗(yàn)檢測線粒體膜電位變化；3．定量PCR檢測小鼠皮層炎癥介質(zhì)表達(dá)情況；4．體外流式細(xì)胞技術(shù)體內(nèi)定量PCR技術(shù)檢測替代型小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)記CD206表達(dá)水平；5．westernblot及免疫共沉淀方法檢測PPARy及其SUMO化水平。結(jié)果：MA具有神經(jīng)保護(hù)作用，可以改善神經(jīng)功能，減少神經(jīng)元死亡，體外實(shí)驗(yàn)最佳有效劑量為25um，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)最佳有效劑量為20mg／kg，8mg／

6、ml；體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)MA可以顯著降低H202損傷后ROS水平(p

7、ARY活性，促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞處于替代型活化狀態(tài)，減輕炎癥反應(yīng)。關(guān)鍵詞：MalibatolA；缺血性卒中；氧化應(yīng)激：炎癥反應(yīng)；小膠質(zhì)細(xì)胞；PPARY南京大學(xué)碩士學(xué)位論文THESIS"．Theinvestigationofthepro—te—ct—i—v———e—————e————ff———e————c———t．．s．．．．．a(chǎn)．．．n．—．．d．．．．．m．．．．．e．．．c．．．．h．．．a(chǎn)．．．．n．．．i．s．．．．m．．．．．s．．．．．o．．．f．．．．M．．．．．a(chǎn)．．．1．i．．b．．．a(chǎn)．．．

8、t．．o．．．1．．．A．—●——●_1r_______________________。_________________●_●_。_。__________________________________________________________________________________________________________________________●___________________-。__