櫻桃S基因型及自交不親和機制研究

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1、山東農(nóng)業(yè)大學博士學位論文櫻桃S基因型及自交(不)親和機制研究姓名:陳曉流申請學位級別:博士專業(yè):果樹學指導教師:束懷瑞;陳學森2003.5.1關于學位論文原創(chuàng)性和使用授權的聲明本人所呈交的學位論文,是在導師指導下,獨立進行科學研究所取得的成果。對在論文研究期間給予指導、幫助和做出重要貢獻的個人或集體,均在文中明確說明。本聲明的法律責任由本人承擔。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留和按要求向國家有關部門或機構送交論文紙質本和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權山東農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可

2、以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。論文作者簽名:藹些導師簽名鈺日期:趁后z夕英文縮略表縮寫英文名稱中文名稱LBMLV-RTbpBSAddH,ODEPCEBE.COliEDl’AlPTGMOPSNaoAcPCRRT-PCRSTESDSTtisX-galcDNASIGSISSISCCTABdNTPRAPDmRNARNAaseB.D.匍聚糖S.RNaselEFPICBBLuria-bertanimediumMoloneymurineleukemiavirusreversetranscritationasebasep

3、airBovineserumalbuminDistilledanddeionizedwaterdiethylpyrocarbonateethidiumbromideEscherichiacoilDisodiumethylendiaminetetr-acetate(EDl’ANa‘2H20isopropylthio·13·D-galactoside3-rN-morpholino)propanesulfonieSodiumacetatepolymerasechainreactionreversetranscriptionpolymerasechainreactio

4、nsodiumchloride,Tris.CI,EDTAsodiumdodecylsulfatetrishydryxymethylaminomethane5-Bromo-4--chloro·3·indolyl-13-D-galactosidecomplementaryDNASelf-incompatibilityGameto曲yticSISporophyticSISelf-compatibilityCetyltriethylammonniumBromideDeoxyribonucleosidetriphosphateRandomlyAmplifiedPolym

5、orphismDNAMessengerRNARibonucleaseRibonucleicacidCalloseSgene’SRNaseIsoelectricfocusinggelelectrophorestslsoelectricpointComassblueB.250LB培養(yǎng)基小鼠反轉錄病毒由來的逆轉錄酶堿基對牛血清蛋白重蒸水焦碳酸二乙酯溴化乙錠大腸桿菌二水乙二胺四乙酸二鈉異丙基.13-D一硫代半乳糖苷3一(N.嗎啉代)丙磺酸醋酸鈉聚合酶鏈式反應反轉錄聚合酶鏈式反應STE緩沖液十二烷基硫酸鈉三羥甲基氨基甲烷5-溴·4一氯-3·吲哚-B-D.半乳糖苷互補DN

6、A自交不親和,配子體自交不親和孢子體自交不親和自交親和十六烷基三乙基溴化銨脫氧核糖核苷三磷酸隨機擴增多態(tài)性DNA信使RNA核糖核酸酶胼胝質s基因表達的核糖核酸酶等電聚焦凝膠電泳等電點考馬斯亮蔣B.2sn山東農(nóng)業(yè)大學博士學位論文摘要歐洲甜櫻桃僻aviumL).是重點發(fā)展的早熟果樹,其自交不親和性是影響生產(chǎn)的重要因素?,F(xiàn)有主栽品種多數(shù)不知道S基因型。確定S基因型,對配置授粉樹、選配雜交親本、探討自交不親和的分子機制及選育自交親和品種都非常重要:中國櫻桃僻pseudocerasusL.)具有自交親和、果實發(fā)育期短、部分類型樹體矮化等特殊的重要資源性狀,對培育自交親和

7、、早熟、矮化的優(yōu)良品種有重要價值。本研究主要利用s基因特異PCR、田間雜交座果率調(diào)查、花粉管生長觀察和等電聚焦凝膠電泳等手段,克隆了甜櫻桃品種的s基因,確定了山東省主栽品種的s基因型,探討了甜櫻桃自交不親和及中國櫻桃自交親和的機制,建立了確定S基因型的技術體系,可直接用葉片DNA,根據(jù)s基因特異PCR片段大小來確定s基因型。壓要結論如下:1.根據(jù)薔薇科S基因核酸序列的高度保守區(qū)娩和RC4區(qū)的序列設計引物PruC2和PruC4R,對葉片基因組DNA做s基因特異PCR擴增,克隆測序各s基因的擴增片段并在genebank上搜索。結果證明,在電泳中顯示的相同大小的PC

8、R片段,是同一種S基因。各S基因擴增片

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