HPLC常見故障排除及維護

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資源描述:

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1、HPLC常見故障排除與維護第一部分:色譜儀常見故障分析及排除LC-100液相系統(tǒng)示意圖確定故障現(xiàn)象用排除法尋找問題原因分析可能引起問題的因素用基準的方法驗證系統(tǒng)從簡單問題入手色譜故障排除步驟尋求幫助一次只變化一個因素,以使你能夠確認所變因素與問題之間的關(guān)聯(lián)。養(yǎng)成良好的記錄習慣。將來利用記錄可以幫助發(fā)現(xiàn)問題,強化預防保養(yǎng)工作。嘗試預測將來可能發(fā)生的問題。利用成功的故障排除經(jīng)驗?;謴驮瓲?。如果使用更換組件的方法來查找問題之所在,完畢后應將原有完好組件安裝回原處。否則,換下來的組件將來很難再利用,造成浪費。確認問題至少發(fā)生兩次以上。如果問題不重復出現(xiàn),很難證實其確實存

2、在。色譜故障排除經(jīng)驗規(guī)則引起HPLC發(fā)生問題的潛在因素HPLC常見故障因素環(huán)境電源接地線溫度濕度清潔程度化學品色譜柱保護柱溶劑樣品儀器泵進樣器檢測器數(shù)據(jù)處理單元HPLC常見故障因素(工作環(huán)境)電源容量、穩(wěn)定性地線系統(tǒng)統(tǒng)一電源,統(tǒng)一接地濕度對光學部件的影響尤為嚴重溫度空調(diào)機的影響清潔不要輕視灰塵的影響工作環(huán)境的影響HPLC常見故障因素(化學品)已損壞的保護柱、色譜柱所用溶劑、試劑的品質(zhì)化學品使用不當帶來的影響樣品前處理方法不當帶來的影響實驗前的準備和結(jié)束后的收尾工作化學品的影響友情提示:保持良好的色譜柱使用習慣使用新鮮的水溶液,并考慮使用生物穩(wěn)定劑(如疊氮化鈉)儲

3、存色譜柱時,應沖凈緩沖鹽,并用有機溶劑保護色譜柱(乙腈)避免外力損傷色譜柱:彎曲、跌落或?qū)⒔宇^擰的過緊完全潤濕在運輸中變干的色譜柱對含有保留性較強的雜質(zhì)組分的樣品要進行預處理定期用強極性的溶劑清洗色譜柱清除柱填料的局限性了解溶劑對樣品的溶解性及分離的影響pH溫度化學兼容性在使用前過濾溶劑友情警示:使用緩沖液的注意事項緩沖液可以提供離子平衡的反離子,并使流動相保持一定的離子強度和pH值,減少拖尾。但是使用緩沖液要注意幾點:1、避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用。2、緩沖液最好要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,隔天或放置長時間實驗時會有很多怪現(xiàn)象發(fā)生。3

4、、實驗后不可用有機溶劑直接過度,有機溶劑會處使鹽類析出,造成液路或色譜柱堵塞,可用95:5的水甲醇沖洗。4、使用緩沖液要及時掌握pH范圍,做到胸中有數(shù)。5、清洗液路和柱子時,有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗。6、長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,可考慮一定周期用10%硝酸沖洗一下液路(拆下柱子,走30ml,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞。7、選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。HPLC常見故障因素(泵)LC-P100高壓恒流泵HPLC常見故障因素(泵)正確使用您的色譜泵:使用高品質(zhì)的溶劑溶劑過濾(注意濾膜的選擇

5、)脫氣溶劑柱塞桿清洗注意調(diào)節(jié)流量時的變化速度HPLC常見故障因素(泵)注意流動相組分的互溶性!使用正確的密封圈清洗溶劑!泵頭泵腔體吸入閥導通活塞向后運動泵座寶石活塞桿密封圈排出閥關(guān)閉液流方向泵的工作原理:①吸液過程泵頭泵腔體吸入閥關(guān)閉活塞向前運動泵座寶石活塞桿密封圈排出閥導通液流方向泵的工作原理:②排液過程HPLC常見故障因素(泵頭)柱塞桿密封圈HPLC常見故障因素(泵頭)出口單向閥進口單向閥泵頭泵頭吸入閥寶石球與球坐粘連,吸入閥不能導通活塞向后運動泵座排出閥關(guān)閉液流方向泵吸液過程有故障情況:吸入閥寶石球粘連泵腔體內(nèi)沒有液體流入寶石活塞桿密封圈排出閥導通泵座寶石

6、活塞桿密封圈吸入閥寶石球與球座之間有雜質(zhì),液體反向泄漏液流方向泵排液過程有故障情況:寶石球與球座之間有雜質(zhì)反向泄漏液流方向反向漏液方向活塞向前運動HPLC常見故障因素(單向閥)出口閥進口閥寶石球不能向上運動液流方向(正向)無液流流出寶石球與球座粘連不能向上運動使正向流動的液流①寶石球與球坐粘連單向閥有故障情況:不能通過接觸面處有雜質(zhì)寶石球與球座之間寶石球與球座不能形成了液體的反向②寶石球與球座之間有雜質(zhì)單向閥有故障情況:液流方向(反向)緊密接觸有雜質(zhì)泄漏如何減少單向閥的故障流動相一定要用0.45μm的濾膜過濾。避免使泵長期不工作,使流動相干枯。避免使用高粘度的流

7、動相。使用帶緩沖鹽的流動相后,一定要充分清洗。定期對流動相過濾頭進行清洗。吸入單向閥故障的排除單向閥的故障現(xiàn)象,極大多數(shù)出現(xiàn)在吸入單向閥上??梢詫⑽雴蜗蜷y從泵頭上拆下,接上專用針頭,用蒸餾水沖洗即可(沖水時注意手指要按住吸入閥頭部白色墊圈,防止內(nèi)部零件沖出)。泵頭吸入閥關(guān)閉泵座寶石活塞桿密封圈排出閥導通液流方向(壓力下降)密封圈泄漏產(chǎn)生的故障現(xiàn)象:密封圈與寶石桿之間存在間隙,導致漏液和壓力下降泵腔體活塞向前運動如何減少密封圈的磨損要用優(yōu)質(zhì)的流動相。色譜柱的壓力不要太高。即不要使用受污染、老化的色譜柱。使用帶緩沖鹽的流動相后一定要用純水充分清洗。避免使用高粘度的

8、流動相。避免在沒有流動相

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