MicroRNA494過表達與RNA干擾抑制survivin基因誘導PC3細胞凋亡的比較

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1、蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人粼重聲囅:所提交的學位論文是本大禚導師的指導下r獨立進露醭究薹終蹶取得的成暴a除文審已經(jīng)注明孳l用的贍容辯,零論文舉含其鑲個久或集體已綴發(fā)表藏撰寫過麓研究成果,也零含為獲褥蘇媸爽攀或其它教育楓梅的學縋誕豢露使用過的材料々對本文的研究俸邂重要貢獻的個人和集體,均醛在文中以明確方式標明。本人承擔零聲爨的法律責任。論文作者簽名:蔞禮乎黯期:砒”渺2S蘇州大學學位論文使用授權聲隳零入競全了解蘇建犬攀關于收集、保存釋健耀學健論變的援定,鼷:學經(jīng)論囊著作權媧屬蒸州炎學。本學位論文電子文檔的纛容釋紙矮論文熊內(nèi)容穗一致。蘇媸太學有權露闌豢匿書館、中鼷社科婉文獻

2、信息情攝審心、中糜辯攀技術倍感研究所(含露秀數(shù)據(jù)電予出版褳)、中國學本期翻(光盤版)毫予雜意社送交本學位論文的復印件和瞧子文樓,允許論文被查閱和借悶,可以采用影印、縮印或其健復制手段保存幫匯編學位論文,可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)簿進行稔索。涉密論文豳本學位論文屬在——年一舞鰓密蜃逑閣本耀定心非涉密論文口諗文作者簽名_,。..墨.窒塵至。.瑟尊孵簽名:匿期:玀f2一驊”25本文由江蘇省自然科學基因資助項目(BK2008167)與蘇州市社會發(fā)展項目(SS08043)資助。目錄弓I言?????????????????????????????????????????

3、??。1第一部分survivin相關microRNA.494在PC.3及R、vPE.1細胞株中的驗證??。6材料和方法?????????????????????????????.6討論?????????????????????????????????????????13參考文獻??????????????????????????????15第二部分Ad.pre.microRNA.494腺病毒載體的構建及其聯(lián)合Ad—survi、,inshRNA載體誘導Pc.3細胞凋亡??????????????????????????..16材料和方法????????????????????

4、?????????16重組腺病毒的構建??????????????????????????19附圖???????????????????????????????35討論?????????????????????????????????????????40參考文獻??????????????????????????????42結論???????????????????????????????????????????44綜述:睪酮與前列腺癌????????????????????????.45中英文對照縮略詞語??????????????????????????.53攻讀學位期

5、間公開發(fā)表的文章??????????????????????.54致謝???????????????????????????????????????????55MicmI斟A.494過表達與RNA干擾抑制survivin基因誘導Pc.3細胞凋亡的比較中文摘要研究背景及目的:前列腺癌(Pca)是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的腫瘤之一。我國前列腺癌的發(fā)病率在1993年為1.71人/10萬人口,1997年升至2.0人/10萬人口,至2000年為4.55人/10萬人口,呈逐年上升趨勢。前列腺癌的發(fā)病機制錯綜復雜,涉及大量癌基因及抑癌基因的表達變化和眾多相互交叉的細胞信號通路,這為尋找安全

6、理想的前列腺癌診療方法帶來了巨大挑戰(zhàn)。因此,尋找一種安全有效的前列腺癌治療方法一直是近年來前列腺癌研究的主要方向之一。近年多項研究表明,小分子RNA(microRNA/siRNA)與癌基因、抑癌基因的相互關系與前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關?;蛑委熓墙陙砟[瘤防治的重要研究領域,尋找有效的目的基因,旨在更有效誘導腫瘤細胞凋亡。本課題研究過表達microI必A.494腺病毒載體與負載suⅣivinsl瓜NA腺病毒載體對survivin的抑制作用和對前列腺癌PC.3細胞株的凋亡誘導效應,探索前列腺癌基因治療的新方法。方法:應用生物學軟件TargetScan5.2預測hsa.mi

7、croI塒A.494成熟體與survivinmRNA配對結果。實時熒光定量PCR法(real.timenuorescencequantitative.PCR)分析人前列腺上皮細胞株RWPE.1及前列腺癌細胞株PC.3中microRNA.494的上下調情況,根據(jù)分析結果與相關文獻報道構建過表達腺病毒載體Ad_pre.microIⅢA.494(簡稱Ad一494,陰性對照Ad一2),同時聯(lián)合本科室已構建的IⅢA干擾腺病毒Ad.suⅣivins11IⅢA(簡稱Ad.sur,陰性對照Ad.1)分別感染HEK.293A細胞,在

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