肌瓣復(fù)合BMP微球修復(fù)兔橈骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究

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1、——一塹燮蘭壁墮竺望竺笙塞英文縮寫詞表英文縮寫B(tài)斟ScBMPCsAMsBMPMsVMFFBSCBBG一250DMEMDexrhBMPALPBSASEM&fiTP隅DMSO0DED下^(ABBREⅥATl0NS)英文全稱中文全稱bonemarrowSterncell骨髓基質(zhì)千細(xì)胞bonemorphogeneticprotein骨形態(tài)發(fā)生蛋白cbitosafl—sodi“酊、alginate殼聚糖一海藻酸鈉微球mjcrospheresbonemorphogeneticprotein骨形態(tài)發(fā)生蛋白微球microspheresvascularmu

2、scleflap帶血供肌瓣fatalbovineserurs胎牛皿清coomassiebrilliantblueG250考馬斯亮藍(lán)dulbecco’Smodifiedeagle’SDMEM培養(yǎng)基mediumdexmaethasone地塞米松recombinanthumanbone重組入骨形態(tài)發(fā)生蛋白morphogeneticproteinalkalinepbospbatase堿性磷酸酶bovineserumalbumin牛血清白蛋白scanningelectronmicroscope掃描電子顯微鏡3一(4,5~dimethylthiazo

3、卜zyl)-2,四甲基偶氨唑鹽5一diphenylterazoljumbromidephosphate~buffersaline磷酸鹽緩沖液dimethySHlforte二甲亞砜opticaldensity光密度ethylenediaminetetra-aceticacid己二胺四乙酸二鈉.2·第一軍醫(yī)大學(xué)焉士研究生學(xué)位論文肌瓣復(fù)合B肝微球修復(fù)兔橈骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究(中文摘要)骨缺損是臨床灘癥之一,尤其是伴有局部軟組織損傷嚴(yán)重的骨缺損治療效果很差,因此必須尋找更為有效的治療方法。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)的異位誘導(dǎo)成骨活性已被多次實(shí)驗(yàn)所證實(shí).

4、但到目前為止,Blip的臨床應(yīng)用效果仍不理想,缺少理想的載體系統(tǒng)是影響B(tài)MP誘導(dǎo)成骨效果的主要原因。因此,我們設(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn),希望在一定程度上解決這兩個(gè)問題,達(dá)到以下兩個(gè)目的:1.制備殼聚糖一海藻酸鈉微球包裹BMP并檢測其性質(zhì)。2.制作帶血供肌瓣復(fù)合BMP微球修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并觀察缺損部位的修復(fù)效果。實(shí)驗(yàn)分兩個(gè)部分進(jìn)行,首先需要制各BMP微球并檢測其性質(zhì)。采用乳化凝聚法制備殼聚糖一海藻酸鈉微球并包裹B肝,體外檢測其性質(zhì):由新西蘭兔骨髓分離出骨髓基質(zhì)細(xì)胞.與BMP微球及空白微球復(fù)合后體外培養(yǎng),分別于3、6、9天做相差顯微鏡、MTT、

5、考馬斯亮藍(lán)、ALP檢測,了解BMP微球與空白微球?qū)撬杌|(zhì)細(xì)胞的影響。其次進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。取健康新西蘭兔24只,共48只前肢隨機(jī)分為四組:帶血供肌瓣/刪P微球/1日】

6、/ISc組、帶血供肌瓣/B咿微球組、帶血供肌瓣/單純B妒組、帶血供礬瓣/空自微球組。制作兔橈骨下段15鰳骨一骨膜完全性缺損,將去神經(jīng)化的帶血供指深屈肌肌瓣轉(zhuǎn)位至缺損區(qū),鈍性分開肌瓣,注意保護(hù)肌瓣的血供。分別將需包裹的BMP徽球、空白微球、單純BMP均勻散布在肌瓣內(nèi),細(xì)胞組另需復(fù)合骨髓基質(zhì)細(xì)胞。術(shù)后2、4、8周采用大體觀察、x線、組織學(xué)檢查、光密度分析及生物力學(xué)檢測等方法觀察成

7、骨過程,評價(jià)骨缺損的修復(fù)情況。經(jīng)過檢測,得到如下結(jié)果:1.1IMP徽球形態(tài)較好,大小均一.平均粒徑10.2pIll;B艫平均包埋率為69.14%;2.陰P微球與空白微球與兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞復(fù)合后細(xì)胞形態(tài)無明顯異常,細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長而增加,空白微球?qū)?xì)胞的分化及分泌功能均無明顯影響,而BMP微球?qū)?xì)胞合成蛋白功能及ALP的表達(dá)均有明顯的促進(jìn)作.3一第一軍醫(yī)太學(xué)碩士研究生學(xué)位論文用;3.以帶血供肌瓣復(fù)合BMP微球修復(fù)了兔撓骨1.5mm的骨缺損;4.術(shù)后2、4、8周。帶血供肌瓣/13MP微球tBMSc組與帶血供肌瓣fBMP微球組修復(fù)兔橈骨缺

8、損的效果無明顯差別,但均優(yōu)于帶皿供肌瓣/單純BMP組與帶血供肌瓣/空白微球組。通過本實(shí)驗(yàn).我們可以得到如下的結(jié)論:1.BI','fP1微球具有良好的生物相容性,可以提高骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外成骨能力。2,帶血供肌瓣復(fù)合BlIP微球加或不加骨髓基質(zhì)細(xì)胞時(shí)修復(fù)骨缺損的能力無明顯差異,但都明顯優(yōu)于帶血供肌瓣復(fù)合單純BMP組、帶血供肌瓣復(fù)合空白微球組?!娟P(guān)鍵詞】帶m供肌瓣;骨形態(tài)發(fā)生蛋白;骨缺損;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞t成骨;殼聚糖一海藻酸鈉微球;骨形態(tài)發(fā)生蛋白微球第一軍醫(yī)大學(xué)碗士研究生學(xué)位論文—————————————————————————————^——

9、————?!籈xperimentalstudyontherepairofradiusdefectofrabbitw

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