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《布氏錐蟲、馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的進(jìn)化關(guān)系研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要布氏錐蟲、馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的進(jìn)化關(guān)系研究動(dòng)物學(xué)賴德華倫照榮教授布氏錐蟲(研矽口肘儺D冊(cè)口6塒卯f)是非洲人昏睡病和家畜那加那病的病原體,對(duì)人類健康造成嚴(yán)重的威脅和對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。該蟲在分類上隸屬動(dòng)基體目、錐蟲科中的錐蟲屬。這類鞭毛蟲因其獨(dú)特的核外基因組——?jiǎng)踊wDNA(1‘DNA)而有別于其它生物。l‘DNA由兩類互鎖的環(huán)形DNA分子:20巧O個(gè)大小~23kb的大環(huán)和約5000個(gè)大小約1.0kb的小環(huán)組成。大環(huán)編碼常見的線粒體基因,但這些基因的表達(dá)大多需要經(jīng)過RNA編輯。小環(huán)編碼向?qū)NA(g
2、I礬As),指導(dǎo)大環(huán)的轉(zhuǎn)錄解碼。布氏錐蟲的生活史經(jīng)歷脊椎動(dòng)物宿主中的血流期階段和采采蠅宿主中的前循環(huán)期、上鞭毛體和后循環(huán)期階段。l‘DNA的部分或全部缺失會(huì)導(dǎo)致錐蟲停留在血流期階段,并失去感染媒介的能力。通過長(zhǎng)期在脊椎動(dòng)物宿主之間的機(jī)械傳播,布氏錐蟲可以不依賴采采蠅宿主,進(jìn)而擴(kuò)散到?jīng)]有采采蠅分布的其他大陸。馬媾疫錐蟲(Z叼Ⅳ咖鰣婦冊(cè))和伊氏錐蟲(z伽甩酊)是媾疫病和馬、駱駝、水牛等家畜蘇拉病的病原體,它們被認(rèn)為是由感染了駱駝的布氏錐蟲在宿主遷徙到無采采蠅地區(qū)后進(jìn)化而來。本論文利用已有的分子生物學(xué)的研究鑒定手段,研究
3、布氏錐蟲以及與其親緣關(guān)系相近的馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲,并通過比較分析這三種錐蟲之間的差異,確定它們之間的進(jìn)化關(guān)系。首先,從錐蟲亞屬各種間中最明顯的差異動(dòng)基體DNA著手,分析馬媾疫錐蟲大環(huán)l【DNA相關(guān)基因的缺失,小環(huán)l①NA的同源性,大環(huán)及小環(huán)l‘DNA的缺失對(duì)動(dòng)基體超微結(jié)構(gòu)的影響。其次,利用已知的布氏錐蟲特有的生物學(xué)特性確證IIl馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的分類關(guān)系。這包括觀察各錐蟲蟲株的生長(zhǎng)曲線,對(duì)藥物誘導(dǎo)引起的l①NA缺失的耐受性,從血流期轉(zhuǎn)化為前循環(huán)期的能力,以及不同蟲株生長(zhǎng)競(jìng)爭(zhēng)現(xiàn)象。我們通過分析比較各蟲株大環(huán)及小
4、環(huán)l【DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物以及RNA編輯特性,確定其是否仍具備l礬A編輯的功能,測(cè)定錐蟲的呼吸鏈通路比例,線粒體膜電勢(shì),并使用免疫印跡手段研究各種動(dòng)基體的重要蛋白,ATP合成酶的亞基測(cè)序等,以確認(rèn)馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲在缺少部分或全部l【DNA后,如何維持正常生命活動(dòng)。最后,我們利用sLl礬A基因的測(cè)序結(jié)果,和GenBank公布的同源序列比對(duì),分析馬媾疫錐蟲,伊氏錐蟲和布氏錐蟲之間的進(jìn)化關(guān)系。研究結(jié)果證實(shí)馬媾疫錐蟲蟲株具有不同大小類型的大環(huán)l①NA,它們的差異對(duì)動(dòng)基體的超微結(jié)構(gòu)沒有可見的影響,相反這些特性是研究真核生物線
5、粒體DNA功能的理想模型。進(jìn)一步的結(jié)果表明,馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲在蛋白水平和基因功能上均表現(xiàn)出和血流期的布氏錐蟲完全一致。根據(jù)SLl礬A基因的所構(gòu)建的進(jìn)化樹,我們提出從布氏錐蟲進(jìn)化成馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的新途徑。最后,我們將錐蟲亞屬各種的特性和模式生物酵母進(jìn)行比較,提出馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的各種分子生物學(xué)特性都未能超出布氏錐蟲的物種特性之外,它們應(yīng)該是布氏錐蟲的亞種。本文采用多因素分析至今已知的兩種在自然條件下存在線粒體DNA部分或完全缺失的真核生物:馬媾疫錐蟲和伊氏錐蟲的進(jìn)化關(guān)系。研究結(jié)果揭示,這些錐蟲盡管完全或
6、部分缺失l‘DNA,并造成線粒體功能不同程度上的缺陷,但其分子生物學(xué)特性都未能超出布氏錐蟲的物種特性之外,并且它們都沒能在進(jìn)化樹上呈現(xiàn)出單一的分支,因而不能滿足物種的定義。此外,我們的研究結(jié)果還展示了布氏錐蟲線粒體功能及其廣泛的適應(yīng)能力。這些研究結(jié)果對(duì)揭示非洲錐蟲的進(jìn)化,線粒體/動(dòng)基體DNA在非洲錐蟲中的功能等提供了新的重要線索。關(guān)鍵詞:布氏錐蟲,馬媾疫錐蟲,伊氏錐蟲,遺傳進(jìn)化,線粒體功能,動(dòng)基體DNA,RNA編輯,氧化磷酸化呼吸鏈,ATP合成酶,小菌落突變株ⅣEVolutionRelationshipamong聊
7、口以DsD,卯口6,.跖cP厶AbstractZ叼Ⅳ咖甜dh聊andZPm刀酊ZoolOgyDe.HuaLaiPro£Zhao—R-ongLun:f切口刀口sD刀l口6rⅣc_西istheagentofhumansleepingsiclmess,afataldiseasethreatenillgpubHchealth,andalsoistheagentofruIIlinantNaganainAmcaofeconoIIlicimponance.BeiIlgal【inetoplastidnageUate,Z6,口‘?西
8、containsaneponyml【iIletoplastDNA(1【DNA),consistingoftwotypesofinterlockedcircularDNAmolecules:scoresofmaxicircles(~23kbforeachcircle)andthousandsofminicircles(~1.Ok”.MaxicircleshaV