嗜堿木質(zhì)素降解菌株篩選鑒定與生長條件優(yōu)化

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1、專業(yè)學(xué)位碩士學(xué)位論文嗜堿木質(zhì)素降解菌株篩選鑒定與生長條件優(yōu)化~‘‘一‘1’1‘‘‘‘‘?!畂’Screenin2.identilicationandgrowthconditionoptimizationoIanalkalophilicstrainforlignindegradation學(xué)號:墨!!!墾Q呈呈大連理工大學(xué)DalianUniversityofTechnology大連理工大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知,除文中已經(jīng)注明引用內(nèi)容和致謝的地方外,本論文不包含其他個(gè)人或集體已

2、經(jīng)發(fā)表的研究成果,也不包含其他已申請學(xué)位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。若有不實(shí)之處,本人愿意承擔(dān)相關(guān)法律責(zé)任。學(xué)位論文題目:盜蠢左趣墊睦鮮魚挫聾墮墮墾壘竺絲塹絲作者簽名:——』翠』虹童乙一日期:—過年—L月孚一日大連理工大學(xué)專業(yè)學(xué)位碩士學(xué)位論文摘要木質(zhì)素在自然界中含量豐富,是植物主要的組成成分。在造紙工業(yè)的污水處理,資源再回收利用方面,木質(zhì)素的降解、轉(zhuǎn)化和利用有著重要的作用。木質(zhì)素主要由碳、氫、氧三種元素組成復(fù)雜網(wǎng)狀的芳香族高分子化合物。木質(zhì)素有能夠在堿性條件下實(shí)現(xiàn)溶液性增強(qiáng)的生物學(xué)特

3、性,而在堿性生存環(huán)境下真菌無法較好生長,而細(xì)菌能夠進(jìn)行生長繁殖。因此,在堿性條件下利用嗜堿細(xì)菌講解木質(zhì)素,不僅木質(zhì)素溶解性好、降解效果佳且菌株不易被雜菌污染。本課題旨在篩選出能夠降解木質(zhì)素的嗜堿細(xì)菌,對其進(jìn)行鑒定以及生長條件的優(yōu)化,并采用薄層層析技術(shù)對木質(zhì)素的降解效果進(jìn)行表征。從而在堿性環(huán)境下,嗜堿細(xì)菌降解后的木質(zhì)素具有一定的應(yīng)用價(jià)值。l、通過對營口造紙廠污水、大連理工大學(xué)校園樹木底層腐敗枝葉以及大連金利達(dá)食品有限公司(魔芋加工廠)污水的樣品富集培養(yǎng),篩選出了一株能夠以木質(zhì)素為唯一碳源進(jìn)行生長的嗜堿菌株,標(biāo)記為IIIS3號菌株。2、通過革蘭氏染色分析以及

4、菌株的16SrDNA全序列分析,初步確定了IIIS3號菌株為革蘭氏陽性菌,其序列與芽孢桿菌(Bacullus)序列一致性達(dá)99%,屬芽孢桿菌種屬。構(gòu)建菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹,分析該菌株與科氏芽孢桿菌(Bacilluscohnii)相似度較高,將該菌株命名為BacilluscohniiIIIS3。3、通過單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)以及復(fù)合碳源共代謝試驗(yàn)三方面對該嗜堿菌株生長條件進(jìn)行優(yōu)化。單因素試驗(yàn)改變菌株生長的過程中培養(yǎng)基木質(zhì)素濃度、pH值、溫度、轉(zhuǎn)速培養(yǎng)條件。結(jié)果顯示該菌株的最適生長條件為培養(yǎng)基中木質(zhì)素濃度為O.10%,pH=10.0,溫度37℃,轉(zhuǎn)速140r/mi

5、n。采用正交試驗(yàn)顯示該菌株的最優(yōu)生長條件組合為培養(yǎng)基中木質(zhì)素濃度為0.10%,pH=10.0,溫度為37℃,轉(zhuǎn)速為120r/min。BacilluscohniiIIIS3菌株生長過程中的最主要的影響因素是pH值。復(fù)合碳源試驗(yàn)結(jié)果顯示,在木質(zhì)素含量為O.10%(第二碳源)的液體培養(yǎng)基中,分別加入不同濃度的葡萄糖作為第一碳源時(shí),BacilluscohniiIIIS3菌株在0.10h過程中長勢迅速,但隨著菌株將所利用的葡萄糖代謝產(chǎn)酸后,降低了培養(yǎng)基中的pH值,影響了該嗜堿菌株的生長繁殖。采用發(fā)酵罐批式培養(yǎng),替代搖瓶培養(yǎng),實(shí)現(xiàn)對pH值的恒定控制,從而實(shí)現(xiàn)了復(fù)合碳

6、源發(fā)酵培養(yǎng)的優(yōu)勢,菌株的生長狀態(tài)更佳。采用薄層層析方法對堿性木質(zhì)素降解菌株的篩選與鑒定木質(zhì)素降解效果進(jìn)行分析,得到在發(fā)酵罐培養(yǎng)的復(fù)合碳源試驗(yàn)中,BacilluscohniiIIIS3菌株對木質(zhì)素有一定的降解效果。本課題經(jīng)篩選獲得了一株名為BacilluscohniiIIIS3的嗜堿菌株,優(yōu)化了該菌株的生長條件。采用發(fā)酵罐批示培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),對發(fā)酵液進(jìn)行薄層層析分析,證實(shí)該菌株對木質(zhì)素有一定降解效果。關(guān)鍵詞:木質(zhì)素;嗜堿菌株;生長條件優(yōu)化;復(fù)合碳源共代謝作用;薄層層析大連理工大學(xué)專業(yè)學(xué)位碩士學(xué)位論文一●●一●●●●^screenIng.IdentiflcatIo

7、nandRro、磯hcondltlOnOOtlmlzationotanalkalophilicstrainforlignindeAbstractLigninisabundantinnatureanditisthemainingredientoftheplant.111edegradation.conversionanduseofngninplayimportantrolesinthewastewatertreatmentandresourcerecycling.Ligninismainlycomposedofcarbon,hydrogen,oxygene

8、lements,formingcomplexmesharomaticpolyme

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