木霉菌T23菌株對(duì)瓜類枯萎病生防機(jī)制的研究

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1、，762312碩士學(xué)位論文木霉菌T23菌株對(duì)瓜類枯萎病生防機(jī)制的研究研究生：導(dǎo)師：專業(yè)；研究方向：劉海南陳捷教授莊敬華副研究員植物病理學(xué)植物病害生物防治沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本文對(duì)生防木霉菌T23菌株進(jìn)行了菌種鑒定，并研究了T23菌株對(duì)瓜類枯萎病的防治效果及生防機(jī)制。明確了T23菌株防治瓜類枯萎病的機(jī)制與促生作用和誘導(dǎo)抗性作用有關(guān)，為該生防菌株的進(jìn)一步研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。1．通過形態(tài)學(xué)觀察鑒定術(shù)霉菌T23為深綠木霉Trichodermaatroviride。通過rDNA．ITSl序列分

2、析，T23的rDNA—ITSl序列片段與genebank數(shù)據(jù)庫(kù)中所有序列片段比較，發(fā)現(xiàn)T23的rDNA．ITSl序列與T．a(chǎn)troviride的序列同源性最商(93．2％)，與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。2．室內(nèi)盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，T23對(duì)黃瓜枯萎病、甜瓜枯萎病都有良好的防治效果。防效分別達(dá)到了75．3％和69．4％。在上海郊區(qū)的田間試驗(yàn)結(jié)果表明，T23對(duì)西瓜枯萎病表現(xiàn)出長(zhǎng)期、穩(wěn)定的防治效果。在生長(zhǎng)季節(jié)末期的相對(duì)防效為62．3％，使西瓜產(chǎn)量提高了34．4％，并且對(duì)西瓜品質(zhì)也有影響，中心和邊緣糖度分別增加了16

3、．3％和9．5％。3．室內(nèi)盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，"1"23對(duì)黃瓜生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用。株高、鮮重和干重都有增加，壯苗指數(shù)提高了35．2％。T23對(duì)甜瓜的促生作用不明顯，但其與有機(jī)肥復(fù)合使用可明顯促進(jìn)甜瓜幼苗植株的生長(zhǎng)，葉面積增大39．8％，凈光合強(qiáng)度提高25．5％；二者混合處理對(duì)甜瓜枯萎病的防治效果達(dá)85．31％，防效較單用木霉菌的處理提高22．22％。4．通過雙向電泳技術(shù)，對(duì)木霉菌T23及鐮刀菌處理根際土壤后黃瓜葉片的蛋白質(zhì)組的變化進(jìn)行了研究。T23和鐮刀菌處理后，都使黃瓜葉片蛋白質(zhì)的表達(dá)發(fā)生了顯著變

4、化，T23處理使黃瓜葉片產(chǎn)生了17種上游調(diào)控蛋白和182種下游調(diào)控蛋白，鐮刀菌處理可以產(chǎn)生7種上游調(diào)控蛋白和167種下游調(diào)控蛋白，說明T23對(duì)宿主蛋白質(zhì)組的影響較強(qiáng)。但誘導(dǎo)產(chǎn)生的上游調(diào)控蛋白(新蛋白)中沒有相同的，表明病菌和生防木霉菌與黃瓜存在?；曰プ鳌Ｓ捎谀久咕龠M(jìn)植物生長(zhǎng)具有明顯的?；裕卜从吵瞿久咕c宿主植物在互作摘要中也具有特異性。所以，T23誘導(dǎo)后產(chǎn)生的著異蛋白中有些可能是T23?；哉T導(dǎo)的，并與促進(jìn)黃瓜植株生長(zhǎng)密切相關(guān)。5．用木霉菌T23處理根際土壤能夠誘導(dǎo)黃瓜產(chǎn)生抗病性。T23誘導(dǎo)

5、后再挑戰(zhàn)接種鐮刀菌，水楊酸首先在黃瓜根部迅速積累。隨后POD、PPO、SOD等防御酶系酶活性均迅速上升，并且形成的峰值顯著地高于其他處理及對(duì)照。同時(shí)細(xì)胞壁物質(zhì)木質(zhì)素的含量在根部也得到增加，提高了黃瓜對(duì)枯萎病菌的抗性。研究表明挑戰(zhàn)接種對(duì)于強(qiáng)化木霉菌誘抗效應(yīng)致關(guān)重要。關(guān)鍵詞：lTS序列；蛋白質(zhì)組；促生作用：誘導(dǎo)抗性；Trichodermaatroviride；Fusariumaxysporum2沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文日IJ吾長(zhǎng)期以來，化學(xué)防治為人類生存和發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)，然而化學(xué)農(nóng)藥的過量使用所引起

6、的環(huán)境污染和人畜安全問題己成為全球高度關(guān)注熱點(diǎn)，是人類可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的實(shí)施急待解決的問題。近年來符合環(huán)保、健康、持續(xù)發(fā)展理念的生物農(nóng)藥開發(fā)已成為解決上述難題的主要手段。木霉菌早在上個(gè)世紀(jì)30年代就明確了其具有生物防治病害的活性，該菌廣泛存在于所有農(nóng)業(yè)的土壤和腐爛的木材等環(huán)境中．是一類歷史悠久的生防真菌。目前在國(guó)際上已有50多種木霉菌的不同劑型作為生物農(nóng)藥或生物肥料進(jìn)行了登記。本霉菌以其分布廣泛、持效期長(zhǎng)、作用方式多樣、對(duì)非靶標(biāo)生物安全及不污染環(huán)境等特點(diǎn)而倍受重視。在國(guó)內(nèi)外研究中，利用Trichode

7、rmaspp．防治植物病害特別是土傳病害的報(bào)道很多。一些木霉菌能有效的控制植物真菌病害，如：Fusariumspp．(Sivan和Chet，1986)，Pythiumspp．(Naseby等，2000)和Rhizoctoniasolani(Lewis和Papavizas，1987)。過去的幾十年里人們對(duì)術(shù)霉菌分類、生物學(xué)、生物防治機(jī)理、抗逆菌株篩選、環(huán)境安全性檢測(cè)、劑型開發(fā)和田間施用技術(shù)以及在工業(yè)諸多領(lǐng)域的應(yīng)用研究取得顯著的成就。重寄生、競(jìng)爭(zhēng)和抗生作用作為木霉菌的三個(gè)重要的生防機(jī)制已經(jīng)被研究得十分深

8、入。但是人們逐漸發(fā)現(xiàn)對(duì)木霉菌生防機(jī)理的認(rèn)識(shí)是不全面的，木霉菌不但能夠直接拮抗病原菌，還能誘導(dǎo)宿主植物產(chǎn)生局部或系統(tǒng)抗性來防止病害發(fā)生。有些木霉菌菌株還能夠促進(jìn)植株生長(zhǎng)和提高產(chǎn)量，并且在悉生條件和自然土壤條件下都得到了證實(shí)。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)木霉菌與其它農(nóng)業(yè)措施可發(fā)揮協(xié)同防病效果。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的快速興起，對(duì)于全面揭示生物防治機(jī)理開辟了新的途經(jīng)，對(duì)于豐富人們對(duì)術(shù)霉菌的生防機(jī)制的認(rèn)識(shí)將產(chǎn)生重要的影響。本文將從術(shù)霉菌的促進(jìn)植物生長(zhǎng)和誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性兩方面進(jìn)行研究，全面揭示它的