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《膠體金免疫層析法快速檢測赭曲霉毒素A研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、20糧食與油脂2011年第10期膠體金免疫層析法快速檢測赭曲霉毒素A研究舒文祥，徐煒，李艷，吳文燁，王黎麗，周堅(無錫安迪生物工程有限公司，江蘇無錫214174)摘要：該研究應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)建立一種快速檢測食品和飼料中赭曲霉毒素A方法。采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金溶液，標(biāo)記抗赭曲霉毒素A單克隆抗體，標(biāo)記膠體金抗體噴涂于玻璃纖維上，赭曲霉毒素A偶聯(lián)抗原OTA-OVA和二抗兔抗鼠IgG分別嘖涂于硝酸纖維膜上作為檢測限和質(zhì)控線，依次將樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維膜和吸水紙組裝成試紙條并裝卡。測試結(jié)果表明，赭曲霉毒素A快速檢測試紙條靈敏度為5ng／mL，檢測時間為10min，批內(nèi)和批
2、間重復(fù)性為100％，假陽性率和假陰性率均為0。該法簡單方便，非常適于現(xiàn)場快速檢測赭曲霉毒素A。關(guān)鍵詞：赭曲霉毒素A；膠體金免疫層析；快速檢測?NtudyOng01ld1i‘mmunoclnromat·o~raplIIVassaYI--orrapi‘d■detectionofochratoxinA、SHUWen—xiang，XUWei，LIYan，WUWen—ye，WANGLi-!i，ZHOUJian(WuxiAntixBiotech．Co．，Ltd．，JiangsuWuxi214174，China)Abstract：TOestablisharapidassayfordetectio
3、nofOchratoxinAinfoodandfeed，goldimmunochromatographyassaywasstudied．Colloidalgoldmarkedcoupledwithmonoclonalantibodyagainst0chratoxinAwasjetsprayedontotheglassfiber．OTA—OVAandrabbitanti-mouseimmunoglobulinswasjetpositionedontoanitrocellulosemembrane．Samplepad，goldjetpad，nitrocellulosemembranea
4、ndabsorbentPaDerwereassembledandcutintodetectingcard，respectively．TheresultshowedthatthesensitivestandardofrapidassayforOchratoxinAvisualdetection1imitiS5ng／mL．a(chǎn)nddetectiontimewithinl0min．Repeatabilityofstripis100％．Theassaygivesnofalsepositiveandfalsenegativeresults．SoitiSverysimpleandconvenie
5、nttorapidlydetect0chratoxinAonthespot．Keywords：ochratoxinA；goldimmunochromatographyassay；rapiddetection中圖分類號：TS207．4文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1008—9578(2011)1O一0020一O3赭曲霉毒素(Ochratoxin)是曲霉菌屬和青霉菌1材料與方法屬產(chǎn)生二級代謝產(chǎn)物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D1．1材料與儀器和a等七種結(jié)構(gòu)類似化合物?；其中赭曲霉毒素A赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)品：北京標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；(OchratoxinA，OTA)在自然界分布最廣泛、毒性最抗赭曲霉
6、毒素A單抗、0TA一0VA：無錫安迪生物工強(qiáng)。赭曲霉毒素A是一種對肝臟和腎臟強(qiáng)毒物質(zhì)，程有限公司；氯金酸(HAuC14·3H20)：美國Sigma公可導(dǎo)致受試動物免疫抑制、腎萎縮、胎兒畸形、流產(chǎn)及司；檸檬酸三鈉、碳酸鉀：上?；瘜W(xué)試劑公司；硝酸纖死亡，并具有高度致癌、致畸、致突變作用叫；為維素膜(NC膜)、玻璃纖維、樣品墊、吸水紙：上海金標(biāo)此，國際癌癥研究機(jī)構(gòu)IARC將其定位lib類致癌生物科技有限公司；試紙條切刀、噴膜儀：上海韓感物。加強(qiáng)對OTA檢測是防止被OTA污染食品電子科技有限公司；紫外分光光度計：上海精密儀器和飼料直接或間接進(jìn)入人類食物鏈重要方法。有限公司；高速冷凍離心機(jī)：
7、湖南湘儀離心機(jī)有限公膠體金免疫層析技術(shù)系出現(xiàn)于20世紀(jì)80年代初司；磁力加熱攪拌器等。期一種免疫分析方法。是在單克隆抗體技術(shù)、膠體金1．2實驗方法免疫技術(shù)和新材料技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來一項以膜為1．2．1膠體金制備固相載體的快速檢測技術(shù)"、镥。膠體金快速層析法用容量瓶量取200ml超純水加入到500ml錐形因具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便，特別適于大批瓶中，將錐形瓶置于磁力加熱攪拌器加熱板上，放入量樣品檢測，且結(jié)果判斷直觀可靠等優(yōu)點而越來越被磁力攪拌子，打開攪拌旋鈕至適
