山藥細菌性葉斑病病原的鑒定

山藥細菌性葉斑病病原的鑒定

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1、河南農業(yè)大學碩士學位論文題目出藥細菌些吐堡痘瘟愿的鑒定學位申請人姓名王速至研究方向擅塑痘塞生塑隨漁中國鄭州2006年6月河南農業(yè)大學學位論文獨創(chuàng)性聲明、使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾書學位論出藥鰓菌箍時凝瘸瘸琢的鑒定學位文題謦級剮碩士學生學科導瓣姓名王振軍埴物病驥學李淇連,剃紅彥專業(yè)姓名學位論文奩鱺需保密,群密封閹每弼囂怒否保密;獨創(chuàng)性聲瞬本人星交論文是在導師指導下進行的研究工作及取得研究成果,除了文中l(wèi)將翻熱以標注霸魏瓣懿懿方羚,文孛不鏹含箕麓夫已經(jīng)發(fā)表或撰寫_建靜輯突藏l果,也不包括為獲得河南農業(yè)

2、大學或其他教育機構的學位或證書陌使用過的材

3、瓣,撂霉教齲對j避連牙了竄定。與我?越工{擘懿瓣恚黠本輯究蕊散鷺任何燹獻l均已在論文中做了明確的說明,并表示了謝意。{!磅究生簽名:互瓣名;。導螻簽名;多移屯lE1期:口6年6月邸臼日期:。6年6月f玉日學使論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本A寵全了解河鬻農業(yè)大學關于鼴存,使掰學位論文駱翹定,鹺學生搽須按照學校器求提交學位論文的印刷本和電子版本;學校有權保存提交論文的印副本和電予版本,并提供囂錄梭索幫闋爨服務,可以采用影印、縮印或辛曩描等熨鍘手段保存、匯編

4、學位論文。本人同意瀛南農業(yè)大學可以饜不鯔方式在不越媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。本人寵全了解《河鷹農業(yè)大學知識產(chǎn)權保護辦法》的有關規(guī)定,在畢業(yè)離開河南農業(yè)大學西,就在棱期間從事的科研工作發(fā)表的所有論文,第一署名單蹙為河嘉農、韭大學,試驗謄

5、料、艨始鼗擐、孛綴漿專利等知識產(chǎn)投駑歸溺蔑農業(yè)大學所有,否則,承擔栩應的法律責任。研究生簽名:鬣懶導師簽名:函苗通,學院領導簽名::矽孫巡L閂期:6‘年∥月廳R同期:抽年‘月f≥同

6、=;{i期:。6年6月I>F:il致謝本論文是在導師劉紅彥研究員琴曩

7、李洪連教授的悉心指導一F完成的。劉紅彥老師在論文的選題、實驗設計和安排上都給予了精心的指導,劉老師嚴謹?shù)墓ぷ?、淵博的知識、贏遺麓晶德,一卷影g建和餐健著我不斷盼學習、前避,在生活當中的細心關懷更是我倍感溫暖。李洪連老師多來嚴}薰求實鷯治學態(tài)度、一絲不萄的工作作風、孜孜不倦的教學育人君囂對人事鮑大度淫解始終都是我努力學習向上的源泉。在畢業(yè)來臨之際,謹向劉紅彥老師和李洪連老師表達我襄?;棂o感謝釋敲意!在實驗進行過程中河南農業(yè)科學院棱保所鮑劉玉霞老師、王飛、倪云霞和劉新濤都給予了大量的支持和幫助;蘭翔大

8、學斡伊艷杰博士、秀j藝農大麓王俊美禱±、溺南農業(yè)大學植物保護學院的2003級硬究生劉謄存、柴舂月,2004綴研究生王瑞等同學都糖供了大量的建議和幫助;2003王素平、范永虎等弼學氌參與了部分工作;論文在審稿、修改以及定藕當中得到了褒紅羧老螂、孫炳劍老孵、宋玉立老薅、文才藝老幫、張猛老師和邢小平老師的熱心指導。在既一并表示深深墟感謝l最后感謝我的家人、鼷友窩跨葵我多年熬河南農業(yè)大學和河南省農科院向關心、支持我的所有老師和同學表示最誠摯游謝意!摘要山藥細菌性葉斑病是山藥上發(fā)現(xiàn)的一種新病害,關于此病害的

9、研究尚未見任何報道。本研究根據(jù)山藥病株的發(fā)病情況和鏡鑒試驗,初步確定為細菌性病害。從感病山藥葉片中分離出四株培養(yǎng)性狀不同的細菌菌株:YLS一1、YLS-2、TLS-3、YLS-4。在適宜條件下回接山藥,只有菌株YLS-2能引起山藥發(fā)病,發(fā)病癥狀與原病葉癥狀一致,并且可以從接菌發(fā)病的山藥葉中再分離出該細菌,表面性狀與原來分離的純培養(yǎng)細菌一致,符合柯赫氏法則,證明細菌分離物YLS一2為山藥葉斑病的病原菌。以三種標準菌株2584(Curtobacteriumflaccumfacienspv.f]accu

10、mfaciens)、T30(Cur.Zpv,beticila)和ICMP3023(Pseudomonassyringaepv.sjwingae)做形態(tài)學觀察和生理生化實驗,結果表明細菌分離物YLS一2和T30及2584親緣關系較接,推測它們是近緣種。利用168rDNA通用引物。以YLS-2的全序列基因組為模板進行PCR擴增,得到長度約為1.5kbp的特異性條帶,將該條帶切膠、回收、克隆并送交測序,得到長度為1485bp基因序列,將該序列遞交GenBank進行Blast同源序列檢索,在親緣關系相近的

11、前39個序列中,前35個均為短小桿菌屬的菌株。用DNAStar軟件進行系統(tǒng)進化分析。系統(tǒng)發(fā)育樹圖顯示山藥葉斑病菌與甜菜銀葉病菌(Curtobacteriumf]accumfacien$pv.basellae(登錄號:AY273210))單獨構成一個分支,其同源性高達98.7%,這就說明山藥細菌性葉斑病菌是萎蔫短小桿菌的一個變種.本研究利用ITS(InternalTranscribedSpacers)的通用引物以YLS-2的全序列基因組為模板進行PCR擴增,將所得特異性條帶切膠、回收

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