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1、西綜筆記-生化生物化學(xué)結(jié)構(gòu)理化性質(zhì)功能Chapter1蛋白質(zhì)一、分子組成:1、特別元素N:每g氮=6.25g蛋白質(zhì)基本組成單位:aaNH2︱氨基酸:R-C-COOH︱H①帶-OH的aa:絲、蘇、酪、(化學(xué)修飾)②含疏基的aa:半胱氨酸(酶的活性中心、有保護(hù)作用)(谷胱期太)③酸性aa:天冬氨酸、谷氨酸(帶負(fù)電荷)④堿性aa:精、賴、組(解離帶正電荷)二、aa的理化性質(zhì):①兩性解離:aa的等電點(diǎn)(PI)PH<PI,解離為陽離子PH=PI,成為兼性離子,是電中性PH>PI,解離為陰離子舉例PI1=4.0PI2=7.8的兩種氨基的電
2、泳分離時(shí),分離液PH值介于兩個(gè)之間②茚三酮反應(yīng)570nm③紫外吸收280nm三、aa的生理功能:①多肽鏈、蛋白質(zhì)的主鍵是肽鍵,其余為次級鍵②多肽鏈有方向性,由N端→C端(α-氨基,α-羧基)例:小肽NH2-精一天冬-甘-谷-COOH室全不同的肽鏈NH2-谷-甘-天冬-精-COOH③肽鍵平面:四、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)1、一級結(jié)構(gòu)aa的組成及排列順序,最重要的結(jié)構(gòu),基因序例由遺傳信息決定一級結(jié)構(gòu)2、二級結(jié)構(gòu):一級結(jié)構(gòu)折疊盤旋、表現(xiàn)為α-螺旋,β-折疊β-轉(zhuǎn)角無規(guī)卷曲、除肽鍵以外的次級鍵:氫鍵。3、三級結(jié)構(gòu):特點(diǎn)為(1)形狀呈現(xiàn)橢圓形、
3、球形(2)空間維持的次級鍵主要為疏水鍵、離子鍵、氫鍵、范得華力也參與(3)使疏水集團(tuán)位于內(nèi)部,親力集團(tuán)位于外部,使穩(wěn)定存在于水中,折疊盤旋后形成數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)域4、四級結(jié)構(gòu):兩個(gè)(或以上)是有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成的結(jié)構(gòu),即不同的蛋白質(zhì)的亞基,不是在三級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上盤旋而形成的對大部分蛋白質(zhì)來源,具有三級或四級結(jié)構(gòu)才具有生物活性,但并不是所有的有生物活性的蛋白質(zhì)具有三級(或以上)的結(jié)構(gòu)。五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì):兩性觸離:兼性、同樣有PI紫外線吸收:入=280nm有最大吸收值,測蛋白質(zhì)含量大分子物質(zhì)沉淀和變性次級鍵斷裂,主鍵未斷裂:蛋白質(zhì)
4、從溶液中析出來稱為沉淀,Pr在水中的兩個(gè)穩(wěn)定因素:水合膜和表面電荷。強(qiáng)電解質(zhì)(如Nacl)可以抑制弱電觸質(zhì)觸離也可以吸收弱電觸質(zhì)的水、使之沉淀,即鹽析六、Pr的分離和純化利用分子量:分子篩、離心、透析變性后:①生物學(xué)活性喪失②對蛋白酶的敏感性增加,易被水解③對化學(xué)試劑反應(yīng)性↑利用電荷:電泳、層析、變性(denaturatcon)-不涉及-級潔構(gòu)變性的pr容易沉淀,沉淀的pr不一定是變性的。區(qū)別pr變性和沉淀的方法:是沉淀而不是變性①鹽析法②冰工醇(丙酮)-80℃七、pr的功能和結(jié)構(gòu)的關(guān)系分子病---一級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變影響其功能,
5、如鐮刀形RBCchepter2、核酸一、分類1、DNA:有基因組DNA,線粒體DNA兩種,是遺傳信息的攜帶者2、RNAMRNA:蛋白質(zhì)合成的模板,指導(dǎo)pr合成tRNA:將AA轉(zhuǎn)運(yùn)至核蛋白體rRNA:與pr結(jié)合在一起,成核蛋白體,為pr合成提供場所二、組成、1、DNA的核酸(dNTP)、A、T、G、C脫氧核糖磷的一樣2、RNA的——(NTP)A、U、G、C核糖特點(diǎn):①主鍵是一3`,5`磷的二酯鍵②方向性:由5`端→3`端游離羥基三、DNA(1)DNA一級結(jié)構(gòu):核苷酸的排列順序即堿基排列順序,蘊(yùn)藏遺傳密碼。遺傳信息就在此處(2)D
6、NA二級結(jié)構(gòu)-雙螺旋結(jié)構(gòu):①[A]=[T][G]=[C]②堿基無組織器官特異性③有種屬特異性④堿基不受年齡營養(yǎng)狀況外在環(huán)境影響而改變。例:從大腦取出一段DNA,在上列哪種組織中找出同源系列(可以雜交)①人肝②豬腦③狗肺④狼心⑤豬肝答案為1DNA是反平行的互補(bǔ)雙鏈結(jié)構(gòu),堿基位于內(nèi)側(cè),按A=T,C=G配對存在,直向相反,疏水性堆程力5`-AACGCT-3互補(bǔ)鏈?zhǔn)莧3’-TTGCGA-5’或5’-AGCGTT-3}’(3)DNA的三極結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上扭曲為超螺旋,并且在pr四、RNA:參與下組成核小體,然后進(jìn)一步折疊壓縮于染色體
7、內(nèi),故核小體是染色體基本單位1、mRNA:7甲基鳥甘帽子,5`端,尾巴、PolgA、3`端(多聚腺苷酸)(轉(zhuǎn)錄后又加上去的)2、tRNA:二級結(jié)構(gòu)是三葉草樣三級結(jié)構(gòu)是倒L型3、rRNA:與核糖體pr共同組成核糖體DNA和RNA的區(qū)別:①總體上RNA為單鏈,DNA為雙鏈②RNA中,mRNA最重要,量最少(1%-2%),半衰期最短,tRNA合量介于兩者之間,但含稀有堿基最多,rRNA合量最多五、核酸理化性質(zhì)在260nm有紫交戰(zhàn)吸收峰值高分子物質(zhì)核酸的變性:DNA:氫鍵被打斷解鏈溫度(Tm):核酸分子內(nèi)雙鏈解開50%,增色效應(yīng)/高色
8、效應(yīng)Tm值取決于G+C比例,成正此,同時(shí)②與DNA長度有關(guān)DNA變性的復(fù)性:解開的單鏈重新聚合,條件是溶液濃度慢慢降低但在冰浴中是不能復(fù)性的,稱為退火,減色效應(yīng)六、雜交的條件及其意義及應(yīng)用七、核酶:具有酶催化活性的核酸核酸酶能夠水解核酸的酶Chapter3酶一、酶的化學(xué)本質(zhì):