SMART 技術(shù)構(gòu)建的辣椒疫霉菌與辣椒互作AD-cDNA 文庫(kù)

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1、2015（11）：51-54中國(guó)蔬菜CHINAVEGETABLES研究論文SMART技術(shù)構(gòu)建的辣椒疫霉菌與辣椒互作AD-cDNA文庫(kù)周志國(guó)　明月梅（廊坊師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，河北廊坊065000）摘　要：為了分離和克隆辣椒中疫霉菌誘導(dǎo)基因，以接種辣椒疫霉菌的葉片為材料，利用SMART技術(shù)構(gòu)建辣椒疫霉菌與辣6椒互作的雙雜交cDNA文庫(kù)。結(jié)果表明：該文庫(kù)容量為3.6×10cfu，重組率88％左右，插入片段集中在300～2000bp之間，平均長(zhǎng)度約為800bp，表明獲得的文庫(kù)質(zhì)量較高，該文庫(kù)將為分子育種提供重要的基因

2、資源。關(guān)鍵詞：辣椒疫霉菌；SMART技術(shù)；雙雜交cDNA文庫(kù)辣椒是我國(guó)重要的蔬菜和加工原料作物，產(chǎn)值與致病機(jī)理、辣椒的疫病病理、栽培方式、化學(xué)防治、居蔬菜之首（謝思惠等，2011）。在辣椒生產(chǎn)過(guò)程生物防治等方面進(jìn)行了相關(guān)研究（田林等，1989；中，病害種類多，發(fā)生頻繁，其中疫?。≒hytophthora朱英波和李超，2002；李智軍等，2007；劉學(xué)敏，blight）是重要的真菌性土傳病害，發(fā)病快，蔓延迅2007；江厚春等，2011），但抗病育種作為防治辣速，病程期短，防治困難（杜曉華等，2005），常椒疫病的重

3、要方法，其抗病資源相對(duì)缺乏（程芳，造成辣椒大面積減產(chǎn)甚至絕收，在我國(guó)吉林、遼寧、2007；史云國(guó)，2007；徐劉平和郭堅(jiān)華，2007）。青海、河北、北京、云南、甘肅、陜西、上海、浙cDNA文庫(kù)是現(xiàn)代研究功能基因組學(xué)的最有江、湖南、江蘇、江西等地均有發(fā)生（周啟明等，效手段之一，可直接從cDNA文庫(kù)中篩選所需目1984；關(guān)天舒等，1995；鄒學(xué)校等，2004）。研究的基因，并用于基因的表達(dá)分析（Colinetal.，人員已對(duì)辣椒疫霉菌（Phytophthoracapsici）的生理1999；蔡寧波等，2007；朱利軍

4、等，2009）。利用SMART技術(shù)（SwitchingMechanismAt5′endofRNA周志國(guó)，男，講師，主要從事蔬菜作物遺傳育種工作，E-mail：Transcript）構(gòu)建全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)，可從中發(fā)現(xiàn)候選zhiguo_zhou@163.com基因，從而在生產(chǎn)上實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的廣泛應(yīng)用（張收稿日期：2015-06-19；接受日期：2015-07-30沖等，2013）。為充分開發(fā)和利用辣椒抗病基因，基金項(xiàng)目：河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目（12226306），河北省高校食藥用菌應(yīng)用技術(shù)研發(fā)中心項(xiàng)目（YF201

5、411）本試驗(yàn)以辣椒為材料，利用SMART技術(shù)構(gòu)建辣椒Abstract：Takingtomatovariety‘YingfenNo.8’astestmaterial，thispaperusedpeatandvermiculiteasmixedmatrixtostudyintidalirrigationandunderintelligentgreenhouseconditiontheeffectsofnutrientsupplyingmaintainingtimea

6、ndintervaltimeonqualityoftomatoseedlingsraisedontrayswithcentralcompositerotatabledesignsof2factors．Theresultsshowedwhentomatogrew5leavesand1heart，withtheincreaseofnutrientsupplyingtime，theseedlingdrymatterandstrongseedlingi

7、ndexshowedfirstincreasingthendecliningtrend．Whilealongwiththeintervaltimeextensionofnutrientsupplying，theseedlingdrymatterandstrongseedlingindexshowedadecliningtendency．Theoptimalnutrientsupplyingschemeisin8-18minofmaintainingti

8、meand198-348minofintervaltime．Thustheseedlingqualitycouldachieveanidealsituation．Webelieveundertheexperimentcondition，thissol