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《幾株IBV弱毒對(duì)流行毒株CKCHLDL97I的免疫保護(hù)作用評(píng)價(jià)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、摘要摘要雞傳染性支氣管炎活疫苗在雞傳染性支氣管炎病毒(AvianInfectiousBronchitisVirus，IBV)的防制過(guò)程中起著重要的作用。在我國(guó)，除引入的馬薩諸塞(Massachusetts)血清型疫苗H120，H52外，還有許多由地方分離株通過(guò)雞胚致弱制備的商品化活疫苗被用于IBV的防制，而且大多數(shù)疫苗的分子背景不清楚。雞傳染性支氣管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus，IBV)血清型眾多，不同血清型之間交叉反應(yīng)小或不具有交叉反應(yīng)性，因此世界各國(guó)均選擇與本地區(qū)流行血清型相匹配的毒株進(jìn)行雞傳染性支氣管炎
2、(InfectiousBronchitis，IB)弱毒疫苗的研制。為了調(diào)查我國(guó)IBV疫苗株的來(lái)源和進(jìn)化及其與IBV分離株之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，我們選擇了5株具有代表性的雞傳染性支氣管炎活疫苗(JAAS，H120，IBN，Jilin，J9)和3株雞傳染性支氣管炎致弱毒株cK／CH／LHu／04VF110、tl／CH／LDT3／03F120和CK／CH／LDL／97IF115和當(dāng)?shù)亓餍卸局闏K／C：H／LDL／97I作為研究對(duì)象，對(duì)其Sl基因進(jìn)行序列比對(duì)分析，通過(guò)序列比較，分析疫苗株與參考株相應(yīng)基因之間的序列同源性；根據(jù)結(jié)構(gòu)蛋白基因和非結(jié)構(gòu)蛋白
3、基因的核苷酸序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，分析疫苗株與參考株之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，同時(shí)闡明我國(guó)IBV的基因型，探討我國(guó)IB流行的背景和原因。IBVSI蛋白能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生病毒中和抗體、血凝抑制抗體，在病毒致病性和組織嗜性等方面均具有重要作用，因此目前對(duì)于IBV致病力的研究主要集中于s1基因。首先對(duì)不同毒株及參考毒株的s1基因進(jìn)行比較和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析，研究了CK／CH／LDL／97I與其他病毒的基因型關(guān)系。證明CK／CH／LDL／97I屬于有別于其它IBV毒株的一個(gè)獨(dú)立的基因群。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)血清抗體檢測(cè)、攻毒后發(fā)病率、死亡率、臨診癥狀、病理變化觀察以
4、及氣管和腎臟中病毒分離等方面研究了同種致弱毒株和異種致弱毒株對(duì)CK／CH／LDL／97I的免疫效力。對(duì)其Sl基因進(jìn)行序列比對(duì)分析，結(jié)果表明疫苗株與流行毒株的核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列同源性分別不超過(guò)76．4％和78．7％。其氨基酸系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)分析發(fā)現(xiàn)，CK／CH／LDL／97I與Ql、J2、T3屬一個(gè)群。以上結(jié)果表明：CK／CH／LDL／97I與Q1、J2、T3屬于我國(guó)近年出現(xiàn)的一種新的基因型IBV。根據(jù)IBV疫苗株s1基因的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，選擇5株最具有代表性的疫苗(JAAS，IBN，Jilin，H120，J9)和3株雞傳染性支氣管炎
5、致弱毒株(cl‘¨CH廠LHLJ加4VF110、tl／CH／LDT3／03F120、CK／CH／LDL／97IFl15)進(jìn)行免疫保護(hù)試驗(yàn)。180只SPF白萊航雞隨機(jī)分成9組(20只／組)，飼養(yǎng)在負(fù)壓隔離器中。在15日齡時(shí)分別用此8株弱毒苗經(jīng)滴鼻途徑對(duì)1—8組雞進(jìn)行免疫接種，第9組雞用作陰性對(duì)照。從免疫后20天，用間接ELISA能從所有免疫雞的血清樣品中檢測(cè)到抗體，證明此5株商品疫苗和3株人工致弱毒均可刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答。在35日齡時(shí)，用異種分離株CK／C：H／LDL／97I對(duì)所有試驗(yàn)雞進(jìn)行攻毒。攻毒后3天，部分免疫雞群開(kāi)始出現(xiàn)IB的
6、臨床癥狀，發(fā)病率為0～100％、死亡率為0；非免疫雞群的發(fā)病率為l00％，死亡率為10％。死亡的免疫雞和非免疫雞的病理變化主要表現(xiàn)為：腎臟腫大、蒼白，腎小管和輸尿管有白色的尿酸鹽沉積，外觀呈現(xiàn)典型的“花斑腎”。攻毒5d后每組隨機(jī)撲殺10只雞，采集器官，應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)病毒，氣管樣品病毒檢出率為50％"-'90％，腎臟樣品病毒檢出率為lO％～30％。然而，同種致弱毒株CI∞H／LDL／97IF115對(duì)CK／CH／LDL／97I強(qiáng)毒的攻擊可提供100％的臨診和病毒分泌的保護(hù)性。由此可見(jiàn)：我國(guó)目前使用的主要活疫苗對(duì)異VI摘要種IBV分離株
7、的感染不能提供完全的保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：雞傳染性支氣管炎病毒；弱毒疫苗；S1基因；疫苗；交叉保護(hù)AbstractAvianinfectiousbronchitisattenuatedvaccinesplayanimportantroleinthecontrolofIBVallovertheworld．ManycommercialattenuatedvaccinesderivedfromlocalIBVfieldisolateshavebeenusedtocontrolIBVinChinabesidesMassachusettsserotyp
8、evaccinesH120andH52thatwereimported．ThemolecularbackgroundsofmostofthedomesticvaccinesinChinahav
