微囊藻毒素的厭氧降解及厭氧降解菌的分離

微囊藻毒素的厭氧降解及厭氧降解菌的分離

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1、摘要近年來,隨著水體富營養(yǎng)化程度加劇,水華爆發(fā)R益頻繁。我國有60%的淡水水體存在不同程度的富營養(yǎng)化現(xiàn)象。微囊藻毒素(Microeystin,MC)污染已經(jīng)成為我國最嚴(yán)重的環(huán)境問題之一,對其進(jìn)行控制和消除勢在必行。微生物降解是MC在環(huán)境中去除的主要途徑之一。目前,關(guān)于MC微生物降解的研究主要集中在好氧降解方面,而厭氧降解研究較少,對MC厭氧降解菌的分離工作還未見報(bào)道。本文通過室內(nèi)模擬實(shí)驗(yàn),研究了MC在不同還原條件下的降解情況,通過固體平板涂布分離法,從滇池沉積物中分離出一株MC厭氧降解菌,對其降解MC的過程進(jìn)行了初步研究,并根據(jù)菌落

2、形態(tài)、生理生化特征和16SrDNA序列對該降解菌進(jìn)行了鑒定。具體的研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.MC.LR在不同還原條件下的降解考察了沉積物中MC.LR在不同還原條件下的降解情況和電子受體的消耗情況。結(jié)果表明,在產(chǎn)甲烷條件下,MC.LR發(fā)生迅速降解,說明發(fā)酵菌可能參與了MC.LR的降解過程。盡管在硫酸鹽還原條件下MC.LR也能夠快速降解,但是降解過程中沒有檢測到硫酸鹽的消耗,向樣品中加入10mmol·L.1的鉬酸鈉對MC—LR的降解沒有影響,說明硫酸鹽還原菌沒有參與MC.LR的降解過程;在硝酸鹽還原條件下,MC.LR不發(fā)生降解,但是硝酸鹽

3、的濃度不斷降低,并有亞硝酸鹽生成,說明雖然樣品中硝酸鹽還原菌很活躍,但是硝酸鹽還原菌未參與MC.LR的降解。2.MC厭氧降解菌的分離及降解特性研究通過固體平板稀釋涂布法,從滇池沉積物中分離得到一株MC.LR厭氧降解純菌株CJ5,該菌株能在4d內(nèi)將5mg·L。1的MC.LR降解到檢測限以下;在YP有機(jī)培養(yǎng)基中,CJ5茵經(jīng)過約12h進(jìn)入對數(shù)生長期,36h進(jìn)入到穩(wěn)定期。3.菌株CJ5的鑒定及保存方法研究菌株CJ5在厭氧有機(jī)培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)為圓形水滴狀,透明光滑,邊緣整齊,表面濕潤,直徑l~2mm。該MC降解菌為革蘭氏陰性桿菌,具有運(yùn)動性

4、,無英膜,無芽孢。根據(jù)菌落形態(tài)、生理生化特征和16SrDNA測定結(jié)果,該菌被鑒定為厚壁菌f-J(Paenibacillus)下的氨基酸桿菌屬(Acidaminobacter)。考察了無機(jī)鹽液體保存法、YP有機(jī)固體培養(yǎng)基保存法、甘油菌液保存法、甘油生理鹽水保存法、濾紙片低溫冷凍保存法對菌株CJ5的保存效果。結(jié)果表明,YP有機(jī)固體培養(yǎng)基保存法能保證菌株在3個月內(nèi)具有很強(qiáng)的降解活性,所以選擇該方法保存MC厭氧降解菌CJ5。關(guān)鍵詞:微囊藻毒素,厭氧生物降解,厭氧菌,鑒定AbstractInrecentyears,withtheaggrava

5、tionofwatereutrophication,cyanobacterialbloomsbecomemorefrequent.SixtypercentoffreshwaterbodieswasunderconditinsofwatereutrophicationinOUrcountry.Thepollutionofmicrocystinsisoneofthemostseriousenvironmentalproblemsinourcountry.Itisimperativetocontrolandeliminatethemicr

6、ocystinpollution.Microbialdegradationisthemainapproachtoeliminatemicrocystinintheenvironment.Previousstudiesofmicrobialdegradationofmicrocystinmostlyfocusedonaerobicenvironment,butthereWasfewstudyonbiodegradationofmicrocystinunderanaerobiccondition.Inthisthesis,anaerob

7、icdegradationofmicrocystinunderdifferentredoxconditionsWasstudiedinlaboratoryexperiments,andanaerobicMC-degradingbacteriumWasisolatedfromDianchilake.Moreover,biodegradationprocessofmicrocystinbytheanaerobicMC—degradingbacteriumwasinvestgated.TheanaerobicMC-degradingbac

8、teriumWasidentifiedaccordingtoitsmorphologicalobservation,physiologicalandbiochemicalcharacteristics,sequencesof16SrD

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