人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機(jī)制研究

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機(jī)制研究

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1、人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機(jī)制研究EffectsandMechanismsofHumanBoneMarrowMesenchymalStemCellTransplantationinType1DiabetesMiceModles作者姓名:院系:專業(yè)名稱:研究方向:指導(dǎo)老師:崔偉娟醫(yī)學(xué)院內(nèi)科學(xué)內(nèi)分泌與代謝朱大龍教授鄭重聲明本人鄭重聲明:所呈交學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師和指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含其他集體和個(gè)人已發(fā)表或撰寫過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方

2、式標(biāo)注,并以致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。研究生簽名:聲傳硝日期:矽,/’∑,珥南京大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明對(duì)本學(xué)位論文,作者完全了解學(xué)校有權(quán)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件或電子版,允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)南京大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,也可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編伽)《導(dǎo)師簽名:學(xué)位論文。日期:№//,r,≯Q目錄中文摘要??????????????????????????。1英文摘要??????????????????????????

3、??4縮略詞?????????????????????????????8第一章干細(xì)胞與1型糖尿病治療(綜述)???????????.10第二章人骨髓問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞移植治療1型糖尿病小鼠的療效及機(jī)制研究???????????????????????????????????18引言???????????????????????????????????18材料與方法???????????????????????。20結(jié)果???。..?????。?.????????????????。.?。。????.28討論......??........??...........

4、........?......???.?...........35參考文獻(xiàn)???????????????????????????38第三章江蘇省2型糖尿病病人視網(wǎng)膜病變調(diào)查及相關(guān)危險(xiǎn)因素分析......??.....?.......?.............??????.......??.......。40致謝??????????????????????????49已發(fā)表及擬發(fā)表論文???????????????????..50畢業(yè)論文題目:厶鱟墮聞壅廈土魚(yú)絲整撞漁痘曼型蕉墾疸的疽夔丞趣劍壁窺內(nèi)盤堂f內(nèi)金鯊魚(yú)垡遂2專業(yè)盟級(jí)碩士生姓名:蕉焦縋指導(dǎo)教師(姓名

5、、職稱):盎盤壟耋縫中文摘要目的:1、觀察人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBM-MSC)移植治療1型糖尿病(TID)小鼠的療效,觀察不同劑量對(duì)療效的影響。2、觀察T1D小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞(MNC)中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、輔助性T細(xì)胞(Th)、細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Tc)的比例變化;檢測(cè)血清中部分炎癥因子的變化;探討人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療1型糖尿病的可能機(jī)制。3、行小鼠胰腺蘇木精.伊紅染色(臟染色),行胰腺免疫組化(IHC),檢測(cè)胰島內(nèi)胰島素的表達(dá)量,觀察MSC有無(wú)促胰島13細(xì)胞再生。方法:1、建立1型糖尿病小鼠模型:購(gòu)買4.6周齡NODdx鼠,連續(xù)五天腹腔注射鏈脲

6、唑菌素(Streptozotocin,STZ)40—50mg/kg.連續(xù)兩天測(cè)隨機(jī)血糖>/13.9mmol/1的小鼠為建模成功鼠。2、分組:建模成功鼠共68只,分為非干預(yù)組(DC組)32只,低劑量移植組(LBMT)18只,高劑量移植組(HBMT)18只。3、觀察周期:移植組:LBMT和HBMT組小鼠于成模當(dāng)天,由尾靜脈分別輸入低劑量(2X106)或高劑量(6×106)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。兩組小鼠均于移植后不同周齡(2W:6只;4W:6只;6W:6只)處死。DC組分別在(0w即成模時(shí):6只;2W-6只;4W:6只;6W:6只)處死。4、觀察指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)方法:移

7、植后受體小鼠在清潔環(huán)境中飼養(yǎng)。每周觀察DC組、LBMT組、HBMT組小鼠血糖和體重的變化;不同期觀察小鼠,眶靜脈取血,ELISA法檢查小鼠血清IFN.Y、IL.10、TGF.岱水平;流式細(xì)胞儀測(cè)定不同觀察期小鼠脾臟淋巴細(xì)胞亞群比例;HE染色小鼠胰腺觀察小鼠胰島結(jié)構(gòu),IHC檢測(cè)胰島內(nèi)胰島素的含量。結(jié)果:1、STZ注射兩周后,成膜小鼠平均血糖(18.894-3.43mmol/1)顯著高于非糖尿病小鼠(6.93±0.69mmol/1)(尸

8、.73±4.09mmol/1,P<0.05;18.46+5.79m

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