色譜技術(shù)在藥物分析的應(yīng)用反相HPLC在藥物分析中的應(yīng)用

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1、反相HPLC在藥物分析中的應(yīng)用（成都●2010/09）曾偉杰leo@gzflm.comtechnic@gzflm.com廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法開發(fā)前要確定的基本問題●色譜柱的選擇●流動(dòng)相的選擇●樣品前處理的新方法●色譜柱使用維護(hù)的建議廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法開發(fā)前要確定的基本問題1、分析物的物理、化學(xué)性質(zhì)樣品基質(zhì)----決定前處理方法溶解性----決定正、反相方法酸堿性----確定色譜柱類型、流動(dòng)相組成pK

2、a----確定流動(dòng)相的pH值化學(xué)結(jié)構(gòu)、特征官能團(tuán)、Etc.廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法開發(fā)前要確定的基本問題2、混合分析物的主要差異疏水性差異----用疏水性選擇性強(qiáng)的色譜柱極性差異----用具有極性選擇性的色譜柱芳香性差異----用芳香選擇性色譜柱混合差異----用多種選擇型色譜柱分子量差異----GPC、GFC廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●方法開發(fā)前要確定的基本問題3、選用何種分析方法HPLC-UVHPLC-IRHPL

3、C-MSHPLC-ELSDEtc.廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd●色譜柱的選擇1、色譜柱的基本技術(shù)參數(shù)固定相----決定選擇性硅膠純度（金屬含量）----影響峰形粒徑----影響柱效、柱壓碳載量----影響保留時(shí)間孔徑----孔徑大，比表面積小比表面積----影響載樣量pH范圍-----決定靈活性封尾基團(tuán)----影響峰形、保留廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd硅膠純度（金屬含量）Columns:A型硅膠(=舊型號(hào))B型硅膠(Gemini

4、?5μmC18)Mobilephase:10mM甲酸銨pH3.5:乙腈:甲醇（35:15:50）Flowrate:1.0mL/minComponents:1.Rhodamine1232.Rhodamine6G3.RhodamineBBase玫瑰精,若丹明(一種紅色熒光染料)廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd色譜圖廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.

5、,LtdA型硅膠C18化合物被吸收B型硅膠（GeminiC18)峰形、峰高、分離正常金屬的影響（1）廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd金屬的影響（2）廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,LtdPhenomenex典型B型硅膠色譜柱廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd2、疏水選擇性色譜柱---廣泛應(yīng)用于各類藥物分析經(jīng)典C18----LunaC18GeminiC18(pH1~12)其他

6、：C12、C8、C6、C5、C4廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,LtdLunaC18（2）----亞甲基選擇性廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd世界#1色譜柱（1）、反相方法開發(fā)的理想色譜柱*高純硅膠基質(zhì)，金屬含量＜55.0ppm*反相鍵合固定相pH穩(wěn)定范圍1.5-10,1~12*反相鍵合固定相TMS封尾，自由硅醇基極低*多種固定相可以選擇廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd廣

7、州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd（2）、GMP認(rèn)證企業(yè)QC首選色譜柱*世界上首次具有MVD(MaterialValidationDocument)證明文件的色譜柱*每支色譜柱都有唯一的檢測(cè)證書，每支色譜柱都可以溯源*出色的柱-柱、批-批重現(xiàn)性廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd應(yīng)用實(shí)例：注射用頭孢唑林鈉色譜柱：GeminiC185u250x4.6mm方法：