燈盞花根腐病

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1、英特爾大書房開啟一站式檢索時(shí)代大數(shù)據(jù)(BigData)云計(jì)算(Cloud)移動(dòng)性(Mobility)其他(Others)8期杜賓等:云南燈盞花根腐病病原初步鑒定1831南和廣西等高山和亞高山開闊山坡草地和林緣地區(qū)。始載于《滇南本草》[1],民間的使用已有600年的歷史。性味辛、微苦、溫,具有散寒解表,祛風(fēng)除濕,活絡(luò)止痛的作用。可以抑制蛋白激酶C的激活,防治神經(jīng)元缺血性損失。通過降低缺血腦組織內(nèi)中性粒細(xì)胞的粘附浸潤對腦缺血有保護(hù)作用。燈盞花制劑自20世紀(jì)70年代開始應(yīng)用于臨床上,主要用于治療高血壓、腦栓塞、多發(fā)性神經(jīng)炎、慢性視網(wǎng)膜炎及意外所致的癱瘓癥,被臨床稱為“腦血管疾病

2、的特效藥”,1977年被列入《中華人民共和國藥典》中,是云南省“十五”期間重點(diǎn)培育的五大“云藥”系列特色產(chǎn)品之一。燈盞花原為野生,隨著市場對燈盞花及其制劑需求量的劇增和可觀的經(jīng)濟(jì)效益,近年來開始了人工大面積栽培[2~6]。但是隨著燈盞花人工栽培規(guī)模的不斷擴(kuò)大,根腐病的危害也逐年加重,已經(jīng)成為制約其大規(guī)模生產(chǎn)的主要因素之一?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】該病害目前在國內(nèi)外尚未見報(bào)道?!颈狙芯康那腥朦c(diǎn)】確定引起燈盞花根腐病的病原物,為制定高效、安全的防治措施提供依據(jù)?!緮M解決的關(guān)鍵問題】通過對燈盞花根腐病的癥狀進(jìn)行觀察、描述,對其病原物進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定。1材料與方法1.1供試燈盞花種源

3、云南生物谷燈盞花藥業(yè)有限公司昆明栽培基地種植的燈盞花,是從云南省文山州邱北縣采集,經(jīng)過3年馴化栽培的種源。1.2病原菌的分離采集發(fā)病燈盞花植株的根,從病健交界處切取長約2~3mm的一段,用75%的酒精浸泡5~6s,再在0.1%的酸性升汞溶液中處理3~5s,然后在滅菌水中漂洗3次,將其移置在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基(PDA)上培養(yǎng),挑取所出現(xiàn)的菌落移置在斜面PDA培養(yǎng)基上,然后在顯微鏡下進(jìn)行單孢分離,保存?zhèn)溆肹7]。1.3病原菌的鑒定將單孢分離物在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到其純培養(yǎng)物。觀察其在PDA培養(yǎng)基上的培養(yǎng)性狀、質(zhì)地、色澤等。在顯微鏡下觀察檢測,測量大、小兩型分生孢子的形態(tài)、大小

4、、分隔數(shù)和產(chǎn)孢結(jié)構(gòu),以及厚垣孢子的有無、形態(tài)和著生方式。1.4田間接種在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)場種植燈盞花,分布在3個(gè)不同試驗(yàn)點(diǎn),每點(diǎn)1500株苗。用無菌水沖洗培養(yǎng)7d的菌落,制成孢子懸浮液(5×106個(gè)孢子/ml)。灌根前用剪刀刺破健康植株的根部,每株澆灌10ml孢子懸浮液。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)隨機(jī)接種5株,3個(gè)點(diǎn)共接種15株。每個(gè)點(diǎn)隨機(jī)取5株采用同樣的方法灌入清水,作為對照。接種的燈盞花均為生長健康旺盛的植株。1.5接種后病情調(diào)查接種14d后,將接種植株及對照全部挖出,用自來水將根部的泥土沖干凈后,按以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記載發(fā)病情況:0級(jí):根系健康,完全無??;1級(jí):僅有少許根系受傷,枯死面

5、積小于10%;3級(jí):根系受傷明顯,枯死面積小于25%;5級(jí):根系枯死面積25%~50%;7級(jí):根系枯死面積50%~75%;9級(jí):根系枯死面積大于75%。1.6致病菌的再分離取接種發(fā)病的燈盞花植株的根部,按照1.2的方法分離病原物,在PDA培養(yǎng)平板上獲得純培養(yǎng),并與原接種菌株相比較。2結(jié)果與分析2.1燈盞花根腐病癥狀描述該病原菌主要侵染燈盞花的根部和莖基部,發(fā)病初期植株地上部分不表現(xiàn)任何癥狀,但隨著病情的發(fā)展,維管束被破壞,失去輸水功能,開始時(shí)葉片在中午陽光強(qiáng)烈時(shí)萎蔫,晚上即可恢復(fù),以后便漸漸萎蔫死亡,最終導(dǎo)致整株干枯。觀察發(fā)病植株的根部,已部分或完全變成深黑褐色(圖1),

6、用刀片切開,可以明顯看到其維管束組織變?yōu)楹诤稚?.2接種結(jié)果接種的15株燈盞花植株中,根部全部出現(xiàn)腐爛癥狀,其中嚴(yán)重度為1級(jí)的有4株,3級(jí)的有3株,5級(jí)的有4株,7級(jí)的有2株,9級(jí)的有2株,發(fā)病率達(dá)100%。對照植株的根部生長健康,發(fā)病率為0(表1,圖2)。2.3病原菌的鑒定分離得到的單個(gè)分生孢子在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基上生長四天后,菌落直徑是3.54cm(pH6.5,27℃),初生為白色,后為紅色和紅褐色,氣生菌絲發(fā)達(dá),棉絮狀。無性繁殖產(chǎn)生大、小兩型分生孢子,大型分生孢子較少,5~8d產(chǎn)生,鐮刀狀,1~3個(gè)分隔,39~51×4~5.2μm;小型分生孢子1~2d就可以產(chǎn)生,并且產(chǎn)生

7、1832中國農(nóng)業(yè)科學(xué)40卷a:健康植株地上部分;b:發(fā)病初期地上部分;c:發(fā)病后期地上部分;d:左發(fā)病后期根部;右健康植株根部a:Leafofhealthyplant;b:Leafofsickplantinearlyperiod;c:Leafofsickplantinlaterperiod;d:Left:Rootofsickplant;Right:Rootofhealthplant圖1燈盞花根腐病田間自然發(fā)病癥狀Fig.1SymptomofE.brevlscapusrootrotinfield表1接種后14d燈盞花根腐病的發(fā)病

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