山楂總黃酮的測定

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1、第30卷第5期南昌大學學報(理科版)Vol.30No.52006年10月JournalofNanchangUniversity(NaturalScience)Oct.2006文章編號:1006-0464(2006)05-0473-05山楂總黃酮的測定3黃優(yōu)生,謝明勇,張中偉,董彩軍,李昌(南昌大學食品科學教育部重點實驗室,江西南昌330031)摘要:利用聚酰胺吸附與NaNO2-Al(NO3)3顯色相結(jié)合測定山楂總黃酮,通過對比色條件的優(yōu)化,獲得快速測定山楂總黃酮含量的方法。結(jié)果表明,該測定方法基本上消除了雜質(zhì)的干擾,精密度高,在30min內(nèi)顯色穩(wěn)定,重現(xiàn)性

2、較好,平均加樣回收率為99.9%,RSD=1.06%。關(guān)鍵詞:比色法;山楂;總黃酮;聚酰胺中圖分類號:O657.32文獻標識碼:A空泵(上海亞榮生化儀器廠),砂芯層析柱(φ=1山楂為薔薇科植物(Rosaceae)山楂(Crataeguscm)。pinnatifidaBunge)、山里紅(Crataeguspinnatifida山楂樣品(上海全漢實業(yè)有限公司提供,產(chǎn)地Bungevar.MajorN.E.Br.)及野山楂(Crataegus山東萊蕪,品種大金星);蘆丁標準品(購于中國藥[1]cuneataSiebetZucc.)的干燥成熟果實,是我國為品生物制

3、品檢驗所);聚酰胺:80～100目;無水乙數(shù)不多的既是食品又是藥品的天然產(chǎn)物。近年來的醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉,以上試劑均為分臨床和實驗研究認為,山楂有降壓、降血脂、舒張血析純。[2-4]管、抗心率失常、抗氧化等作用,其中,黃酮類化112實驗方法合物是其最主要的有效成分。1.2.1山楂總黃酮的提取山楂總黃酮的測定對其提取工藝優(yōu)化和原料選新鮮山楂去核、切片,曬干,制成干山楂備用。擇都具有重要意義。目前,植物提取物總黃酮含量準確稱取5g干山楂置于圓底燒瓶中,加入100的測定一般采用比色法、紫外法和高效液相色譜mL80%乙醇水溶液(v/v),于70℃回流提

4、取1h,[5-6][7](HPLC)法等。據(jù)文獻報道,色素對比色法重復1次,合并提取液,真空濃縮至無醇味(約20的測定結(jié)果影響較大,致使結(jié)果偏高。山楂含有大mL),加無水乙醇定容至50mL,搖勻,備用。量色素,用聚酰胺吸附和NaNO2-Al(NO3)3法相結(jié)1.2.2山楂總黃酮的純化[8]合的方法能較好去除色素的干擾。本文采用改1.2.2.1洗脫劑的選擇進后的聚酰胺吸附與NaNO2-Al(NO3)3比色法相準確吸取提取液1mL,加入裝有1g聚酰胺粉結(jié)合測定了山楂總黃酮的含量,并且優(yōu)化了顯色劑的小層析柱中,吸附5min,先用40mL水把色素等加入后放置的時間

5、,獲得了一種快速、準確的測定山雜質(zhì)洗去,再用50mL一定濃度的乙醇洗脫,真空濃楂總黃酮含量的方法?？s后用60%乙醇水溶液定容至50mL,搖勻,得樣品溶液。1材料與方法1.2.2.2洗脫劑用量的選擇111實驗儀器與材料準確吸取提取液1mL,加入裝有1g聚酰胺粉TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普的小層析柱中,吸附5min,先用40mL水把色素等析通用儀器有限公司),FA1104電子天平(上海精雜質(zhì)洗去,再用一定量80%乙醇水溶液洗脫,真空天電子儀器廠),電子恒溫不銹鋼水浴鍋(上海宏興濃縮后用60%乙醇水溶液定容至50mL,搖勻,得樣機械儀器實業(yè)制造

6、公司),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申生科品溶液。技有限公司),DGG-9140B電熱恒溫鼓風干燥箱1.2.3最大吸收波長的確定(上海森信實驗儀器有限公司),SHE-Ⅲ循環(huán)水真吸取一定量的標準溶液和樣品溶液,分別置于收稿日期:2006-05-10作者簡介:黃優(yōu)生(1982-),男,碩士生;3通訊作者:謝明勇(1957-),男,博士,教授,博士生導師1E-mail:myxie@ncu.edu.cn·474·南昌大學學報(理科版)2006年兩支10mL比色管中,加60%乙醇至5mL,按1.2.4.2方法顯色,以等量的60%乙醇作空白,顯色后,標準溶液和樣品溶液分別于400

7、～600nm掃描,確定其最大吸收波長。1.2.4標準曲線的繪制1.2.4.1標準溶液的配制精密稱取105℃干燥至恒重蘆丁標準品5mg,C/%加適量60%乙醇,置水浴中微熱溶解,冷卻后用圖1不同濃度乙醇洗脫對吸光度的影響2.1.2洗脫劑用量的確定60%乙醇定容至50mL,搖勻,備用。分別用30、40、50、60和70mL80%乙醇洗脫,1.2.4.2標準曲線的繪制精確移取上述蘆丁的標準溶液液0、1.0、2.0、結(jié)果顯示,在洗脫劑用量大于40mL后,測得吸光度值不再隨洗脫劑用量的增加而增大,結(jié)果見圖2。3.0、4.0、5.0mL分別置于6只10mL比色管中,用

8、最終確定50mL80%的乙醇洗脫。60%乙醇補足5mL。加5%Na