熒光示蹤法研究逆行島狀皮瓣靜脈回流

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1、中國修復(fù)重建外科雜志2008年8月第22卷第8期·959·熒光示蹤法研究逆行島狀皮瓣靜脈回流荊志振俞光榮王棟游木榮張世民【摘?要】目的探討采用熒光示蹤法研究逆行島狀皮瓣靜脈回流的可行性，并初步觀察靜脈回流規(guī)律。?方法?20只新西蘭大白兔，每只取耳靜脈血0.1mL，分離RBC并用FITC標(biāo)記。流式細(xì)胞儀檢測已標(biāo)記的RBC陽性率及熒光強(qiáng)度，倒置熒光顯微鏡觀察其形態(tài)。取20只新西蘭大白兔，在動物雙側(cè)后肢內(nèi)側(cè)分別建立4cm×3cm隱動、靜脈逆行島狀皮瓣模型（n=10）和順行島狀皮瓣模型（n=10），血管蒂長3cm。將

2、一側(cè)后肢隨機(jī)設(shè)定為實(shí)驗(yàn)組，皮瓣制備后注射已標(biāo)記的RBC懸液5?μL；對側(cè)為對照組，不注射示蹤劑。實(shí)驗(yàn)組按順行和逆行皮瓣分成兩組，即順行皮瓣組和逆行皮瓣組，每組10個；再根據(jù)注入示蹤劑途徑不同，分為動脈和靜脈2個亞組，每亞組5個皮瓣。注射示蹤劑5s后取下皮瓣立即冷凍，取連續(xù)的3張冰凍切片（5～7μm），其中2張行HE染色和GENMED染色，另1張不染色直接壓片，熒光顯微鏡觀察熒光分布。?結(jié)果流式細(xì)胞儀分析FITC標(biāo)記的RBC陽性率在99%以上，熒光強(qiáng)度均≥103；倒置熒光顯微鏡下標(biāo)記的RBC呈均勻分布的綠色熒光

3、，熒光強(qiáng)度均勻、穩(wěn)定。冰凍切片顯示實(shí)驗(yàn)組皮瓣蒂部均出現(xiàn)熒光，對照組未見熒光。順行島狀皮瓣組熒光主要分布在靜脈腔、靜脈壁、動脈內(nèi)膜和外膜；逆行島狀皮瓣組熒光分布在動脈內(nèi)膜、外膜和靜脈壁。?結(jié)論熒光示蹤劑可用于靜脈回流研究，順行島狀皮瓣靜脈主要通過靜脈腔、靜脈壁、動脈內(nèi)膜和外膜回流；逆行島狀皮瓣靜脈主要通過動脈內(nèi)膜、外膜和靜脈壁的“迷宮式途徑”回流?！娟P(guān)鍵詞】逆行島狀皮瓣靜脈回流熒光示蹤??兔中圖分類號：R616.2?R331.3??文獻(xiàn)標(biāo)志碼：ASTUDYOFVENOUSDRAINAGEINRETROGRADE

4、ISLANDFLAPSBYFLUORESCENCETRACINGTECHNIQUEINARABBITMODEL/JINGZhizhen,YUGuangrong,WANGDong,YOUMurong,ZHANGShimin.DepartmentofOrthopaedics,TongjiHospital,TongjiUniversity,Shanghai,200065,P.R.China.Correspondingauthor:YUGuangrong,E-mail:yuguangrong2002@yahoo.co

5、m.cn【Abstract】ObjectiveToinvestigatethevenousdrainageinretrogradeislandflapsbyfluorescencetracingtechniqueandtoobservethepathwayofvenousdrainage.MethodsThe0.1mLvenousbloodwascollectedfromthemarginalearveinofeveryrabbit(n=20),respectively,anderythrocyteswere

6、separatedbycentrifugationandthenwerelabeledwithFITC.PositiverateandfluorescenceintensityofFITC-labeledRBCweredetectedbyflowcytometry.RBCmorphouswasobservedundertheinvertedfluorescencemicroscope.Saphenousretrogradeislandfasciocutaneousflapandantegradeislandf

7、asciocutaneousflap(4.0cm×3.0cminsizewithvascularpediclelengthof3.0cm)weresuccessfullyestablishedinhindlimbsof20NewZealandwhiterabbits．Onehindlimbofeachrabbitwasrandomlyassignedastheexperimentalgroupandthecontralateralsidewasassignedasthecontrol.Thesameflapw

8、asestablishedinthecontrolgroupwithoutanyfluorescencetracer.Accordingtoretrogradeorantegradeflaps,theexperimentalgroupwasdividedinto2groupswith10rabbitsineachgroup.Andthen,accordingtodifferentpathwaysof