辣椒中辣椒紅素的分離及其含量測定

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1、中國食物與營養(yǎng)2010年第08期FoodandNutritioninChinaNo．08，2010辣椒中辣椒紅素的分離及其含量測定韓曉嵐，胡云峰’，趙學(xué)志。，何洪巨(天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院，天津~00457；。國家蔬菜工程技術(shù)研究中心，北京100097)摘要：目的：研究辣椒中辣椒紅素的分離和含量測定方法。方法：采用高效液相色譜進(jìn)行分離，并鑒定其成分及含量。色譜條件：Inerl；silOD-5色譜柱(4．6X250mm，5m)，流動相：甲醇一二氯甲烷，流速：1ml／min，檢測波長：4

2、74nm，柱溫：5O℃，進(jìn)樣量：10l。結(jié)果：對辣椒紅素提取液進(jìn)行分離工藝探索，根據(jù)它的物理、化學(xué)特性對K0H用量、乙醚用量和靜置時間進(jìn)行了研究，經(jīng)過二次旋轉(zhuǎn)回歸試驗優(yōu)化結(jié)合響應(yīng)面分析，得出最高純度和最優(yōu)條件組合：K0H用量為5．59ml，乙醚用量為15．574ml，靜置時間為2．54h，分離后的樣品純度由2．8％提高到17．2％，提高了6．14倍。結(jié)論：本研究在HPLC快速測定辣椒中辣椒紅素中具有使用價值。關(guān)鍵詞：辣椒紅素；分離；高效液相色譜；響應(yīng)面分析有機(jī)溶劑浸提出來的辣椒紅色素粗品中，含有

3、辣型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；BS210S型賽多利斯椒素、蛋白質(zhì)、脂肪、單寧酸、惡臭物質(zhì)等，因此，電子分析天平，德國Sartorius公司；DIKE型電子恒溫必須對粗品進(jìn)行精制，特別是要去除辣味和臭味。辣水浴鍋，北京市光明醫(yī)療儀器廠。椒素類物質(zhì)由14種以上的辣椒素同系物組成，其中，1．2實驗方法辣椒素和二氫辣椒素約占90％以上。辣椒素的化學(xué)名1．2．1色譜條件色譜柱：InertsilOD-3，4．6X250I1邶，稱為8。甲基．6一癸稀香草基胺，分子中既有酰胺鍵，5／~m，不銹鋼柱；流動相：A

4、一甲醇，B一二氯甲烷；流又有酚羥基。酰胺在堿作用下水解成無辣味物質(zhì)，酚速為lml／min；進(jìn)樣量：11；室溫：(28士2)℃；色羥基在微弱電離下與NaOH發(fā)生成鹽作用，分成兩相譜柱溫度：30~C；檢測波長：474mm，以峰面積外標(biāo)促進(jìn)了辣素和色素的分離。法定量。1．2．2辣椒紅素分離工藝準(zhǔn)確稱取0．2g樣品粉末1材料與方法一加入丙酮4ml一35℃下超聲波提取25min~收集提1．1材料與儀器設(shè)備取液3500r／min的條件下離心l0min一將上清液倒入干紅辣椒，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供；辣椒紅素標(biāo)分液

5、漏斗一加入KOH和甲醇的混合液，其中KOH含樣，CHROMADEXINC．公司，純度93．3％；甲醇量為5％一靜置皂化一加入乙醚一加入10％NaC1一靜(色譜級)，Dikmatechnologies；丙酮(分析級)，北置，待下部分溶液呈無色，分液明顯一去除下部分京化學(xué)試劑公司；二氯甲烷(分析級)，北京化學(xué)試無色溶液一用NaC1溶液沖洗幾次一將溶液倒人放有劑公司；乙醚(分析級)，北京化學(xué)試劑公司；KOH無水NaSO的漏斗中一乙醚沖洗幾次，待被染紅的(分析級)，北京化學(xué)試劑公司；NaC1(分析級)，

6、無水NaSO重新變回白色一將濾液倒入梨形瓶一減北京化學(xué)試劑公司。壓真空干燥一用丙酮溶解干燥物一將干燥物溶液定容DGU．20A型高效液相色譜儀[包括LC-20AD10ml一12000r／min條件下離L,30mln--,進(jìn)行HPLC檢測泵，SIL一20A自動進(jìn)樣器，CTO一20A注溫箱，SPD一20A并進(jìn)行純度計算。二極管陣列檢測器，CBM一20A控制器，色譜柱C。(2502結(jié)果與討論mm×4．6mm，5m)】，日本島津公司；SineSonic150型超聲波洗凈機(jī)，神明臺工業(yè)株式會社；TDL一40

7、B2．1分離方法的單因素試驗基金項目：云南科技合作項目(2~6FY110708—2)。作者簡介：韓曉嵐(1984～)，女，碩士研究生，研究方向為農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏。通訊作者：何洪巨韓曉嵐等：辣椒中辣椒紅素的分離及其含量測定51單因素試驗得出因素最佳條件為：KOH為5ml，因素，分別以x、x和x代表，每一個自變量的低、乙醚用量達(dá)~lJ20ml，靜置時間為3h。中、高試驗水平分別以一1、0、1進(jìn)行編碼，根據(jù)相應(yīng)2．2二次正交旋轉(zhuǎn)回歸試驗結(jié)果及方差分析的試驗表進(jìn)行試驗后，對數(shù)據(jù)進(jìn)行二次回歸擬合，得2．2

8、．1響應(yīng)面分析方案本實驗采用Box—Behnken設(shè)到包括一次項、二次項、交互項的二次方程，分析各計作進(jìn)一步優(yōu)化。綜合單因素試驗結(jié)果，選取KOH用因素的主效應(yīng)和交互效應(yīng)，最后在一定水平范圍內(nèi)求量、乙醚用量和分離時間對辣椒紅素純度影響的三個取最佳值，試驗方案及結(jié)果見表1隅～10]o表1三因子二次正交旋轉(zhuǎn)回歸設(shè)計方案及結(jié)果2．2．2模型方程的建立根據(jù)試驗結(jié)果建立的數(shù)學(xué)模式中：Y為辣椒紅素純度，％；x。為KOH用量，型為：m1；x為乙醚用量，ml；x，為靜置時間，h。Y=25．09+2．37Xl+0．