馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁

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1、第十二章馬鈴薯的脫毒與快繁水培法與霧培法馬鈴薯是一種全球性的重要經(jīng)濟(jì)作物。適應(yīng)性廣，營養(yǎng)價(jià)值高，耐貯藏適運(yùn)輸，既是一種重要的糧食作物，也是一種調(diào)節(jié)市場供應(yīng)的重要蔬菜。馬鈴薯退化問題嚴(yán)重，葉片卷縮，降低產(chǎn)量，影響品質(zhì)。病毒侵染是馬鈴薯退化的根源，高溫是誘發(fā)病毒病的環(huán)境條件。危害馬鈴薯的病毒有17種之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花葉病毒、紡錘形塊莖病毒等。由于馬鈴薯是無性繁殖作物，病毒逐代積累，日益嚴(yán)重，引起嚴(yán)重退化。馬鈴薯病毒可使塊莖產(chǎn)量減少50%~80%。馬鈴薯莖尖組織培養(yǎng)—生產(chǎn)無病毒苗—提供優(yōu)良種薯

2、。一、馬鈴薯的脫毒與快繁（一）莖尖培養(yǎng)與脫毒1.莖尖培養(yǎng)脫毒程序（1）取材：芽長到15cm時(shí)，將頂端切下6-8cm，去掉下面2片葉，在切口處涂上生根生長調(diào)節(jié)劑后，把切條植入一口徑為10cm、內(nèi)裝消毒營養(yǎng)土的花盆中，后用玻璃燒杯罩上，保持10d。馬鈴薯的脫毒試管苗再將其轉(zhuǎn)入生長箱中，每天光照16h，光照強(qiáng)度3000-4000lx。2周后去掉頂芽，以促進(jìn)腋芽的生長。當(dāng)腋芽長到1-2cm時(shí)，折下腋生枝，用于消毒、接種。（2）消毒：水洗干凈，無菌條件下先用70%的酒精浸組織15-20s，再用2%次氯酸鈉溶液浸泡4-5min，然

3、后用無菌水沖洗3次。（3）接種：把芽置于解剖鏡下，左手用一把鑷子將芽按住，右手用解剖針將葉片和葉原基剝掉，當(dāng)形似一個(gè)閃亮半圓球的頂端分生組織充分暴露出來后，用鋒利的長頸刀片將分生組織切下來，上面可帶/也可不帶葉原基，再用刀片將其接種到培養(yǎng)基上。（4）培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基（提高NH4+、K+濃度，利于莖尖成活）。加入調(diào)節(jié)物質(zhì)6-BA0.5mg/L，NAA0.1-1.0mg/L。培養(yǎng)條件：溫度25±2℃，光照16h/d當(dāng)新梢長至2-3cm時(shí)，轉(zhuǎn)至生根培養(yǎng)基（MS培養(yǎng)基中加入0.3mg/L的NAA）（5）病毒鑒定（指示植物法）

4、：馬鈴薯的病毒指示植物：莧科的千日紅、藜科的杖藜、茄科的洋酸漿、毛曼佗羅等。從被檢植株上取下葉片，置于等容積的緩沖液（0.1mol/L的磷酸鈉）中，研成勻漿。在指示植物的葉片上撒少許600號的金剛砂。然后將被檢植物的葉汁液涂于其上，并稍加摩擦，以使指示植物葉表面細(xì)胞受到侵染，但又不要損傷葉片。約5min后，用水輕輕洗去接種葉片上的殘余汁液。一周后如果表現(xiàn)病毒病癥狀，則說明被檢再生植物脫毒失敗。2、影響脫毒效果的因素（1）外植體大?。?.2-0.3mm，帶1-2個(gè)原基為好（2）莖尖所處部位：塊莖臍部休眠芽的生長點(diǎn)、塊莖頂

5、部的粗壯芽、植株主莖的生長點(diǎn)（3）病毒種類及復(fù)合感染（脫毒更困難）PSTV（條紋病毒）、PVS（S病毒）、PVX（X病毒）、PVM（M病毒）、PAMV（叢矮病毒）、PVY（Y病毒）、PVA（A病毒）、PVRV（卷葉病毒）3、無毒材料的保存將無毒原種種在溫室或防蟲罩內(nèi)滅過菌的土壤里，以防蚜蟲傳毒或機(jī)械傳毒大規(guī)模繁殖時(shí)，種植在田間隔離區(qū)內(nèi)春播早留種和夏播留種經(jīng)過莖尖脫毒處理的無病毒植株，再通過離體培養(yǎng)進(jìn)行繁殖與保存（二）微型薯生產(chǎn)技術(shù)1、試管生產(chǎn)（1）單莖節(jié)擴(kuò)大繁殖：由無性繁殖的試管苗中獲得莖切段（每個(gè)莖段帶1-2個(gè)葉片或

6、腋芽），每個(gè)三角瓶里接4-5個(gè)莖段，進(jìn)行培養(yǎng)。（1）單莖節(jié)擴(kuò)大繁殖：培養(yǎng)條件：22℃，16h補(bǔ)充光照1000lx常用培養(yǎng)基：MS+3%蔗糖+瓊脂；MS+2%蔗糖；MS+CCC50mg/L+6-BA6.0mol/L+0.8%瓊脂，或MS+50-100mol/L香豆素；MS+3%蔗糖+4%甘露醇+0.8%瓊脂。當(dāng)小植株4-5cm時(shí)，進(jìn)行第二步培養(yǎng)。（2）微型薯誘導(dǎo)：要求：有一定量的植物生長物質(zhì)，暗培養(yǎng)培養(yǎng)基：MS+50-100mg/L香豆素的液體或固體培養(yǎng)基2、微型薯溫室多層架盤工廠化生產(chǎn)4-6層架進(jìn)行培養(yǎng)，育苗盤規(guī)格60

7、cm×25cm×4-6cm，育苗基質(zhì)為蛭石或馬糞。三角瓶繁殖的脫毒苗以單莖節(jié)或雙莖節(jié)扦插，在人工調(diào)控的溫度、光照下，經(jīng)過60-90d即可收獲。微型薯直接定植試管苗和剪尖扦插法3、底畦栽植脫毒苗生產(chǎn)小薯或微型薯備畦：長方形，深33cm、寬1.2m，挖出的土堆放在距畦33cm處的東西兩邊和北端，鋪施30-50kg廄肥/m2，深翻20cm，翻勻耙平、澆足底水，以備來年春季栽苗。土壤消毒及栽苗：播種前半月，畦內(nèi)噴800倍樂果滅蚜，封蓋塑料膜，播種時(shí)可揭膜移栽，南北向，行距40cm，株距10-15cm雙株，密度40-60株/m2

8、。將地膜重新覆蓋或?qū)⒖淄练鈬?yán)，在畦上搭架，封蓋另一層塑料拱棚薄膜，栽后20d除去地膜培土，將架上的地膜換成45-50目的防蟲紗網(wǎng)，上面再蓋薄膜，氣溫升到10度左右，除去膜，留紗網(wǎng)到收獲。需水時(shí)從上面噴或自一端開口進(jìn)行溝灌。4、微型種薯的擴(kuò)大繁殖采用試管、溫室、底畦生產(chǎn)的微型薯原原種，可進(jìn)一步通過塑料大棚或大田在春秋兩季擴(kuò)大繁殖，以