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《植物組織中蛋白含量和POD酶活力的測定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、三葉草和草坪草中蛋白含量和POD酶活力的測定摘要：本實(shí)驗(yàn)以三葉草和草坪草為材料，測定了其蛋白含量和POD酶活力的測定。結(jié)果表明，三葉草中的POD酶活力比草坪草的酶活力？關(guān)鍵詞：三葉草、草坪草、蛋白含量、POD酶活力、對比引言：過氧化物酶是存在于各種動(dòng)物,植物和微生物體內(nèi)的一類氧化酶.催化由過氧化氫參與的各種還原劑的氧化反應(yīng).過氧化物酶是由單一肽鏈與一個(gè)鐵卟啉輔基結(jié)合構(gòu)成的血紅蛋白.多數(shù)植物過氧化物酶與碳水化合物結(jié)合成為糖基化蛋白.糖蛋白有避免蛋白酶降解和穩(wěn)定蛋白構(gòu)象的作用.過氧化物酶的作用機(jī)理過氧化物酶催化過氧化氫氧化酚類的反應(yīng)，產(chǎn)物為醌類化合物，此化合物進(jìn)一步縮合或與其他分子縮合，產(chǎn)生顏色較
2、深的化合物。本實(shí)驗(yàn)以鄰甲氧基苯酚（即愈創(chuàng)木酚）為過氧化物酶的底物，在此酶存在下，H2O2可將鄰甲氧基苯酚氧化成紅棕色的4-鄰甲氧基苯酚。紅棕色的物質(zhì)可用分光光度計(jì)在470nm處測定其吸光度，即可求出該酶的活性。1材料、試劑及實(shí)驗(yàn)器材1.1材料：三葉草和草坪草，于2009.10.20日采自河西學(xué)院北區(qū)草坪中，于生化實(shí)驗(yàn)室冰箱中冷藏一周。1.2試劑：0.1mol/l磷酸緩沖液、愈創(chuàng)木酚、酶液1.3實(shí)驗(yàn)器材：研缽、5ml離心試管、冰袋、試管、量筒、分光光度計(jì)2、方法2.1、POD的提取準(zhǔn)確稱取三葉草，草坪草。加適量石英砂充分研磨（冰浴），分別加入1ml緩沖液（0.05ml/lNa2HPO4，pH7.
3、0），12000r/min，40C離心20min，取上清液，并量出上清液的體積，用于蛋白質(zhì)和酶活力的測定。2.2、過氧化物酶活性的測定取4支試管，分別進(jìn)行編號并按表1加入相應(yīng)的試劑。表1試劑對照管0樣品液1樣品液20.01mol/l磷酸緩沖液/ml2.42.32.30.02mol/l愈創(chuàng)木酚/ml0.50.50.5酶液/ml00.10.1加好反應(yīng)物后，搖勻，在470nm處讀出A470值，為t=0時(shí)的讀數(shù)。立即加入0.01ml0.04mol/l新配制的H2O2后，即刻搖勻并計(jì)時(shí)，每隔30s讀數(shù)1次，共計(jì)6個(gè)數(shù)值。3、結(jié)果與分析表2表2表3三葉草和草坪草中POD酶活力的比較三葉草草坪草POD酶活性
4、0.0030.047POD酶比活力還有個(gè)圖形、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、？由圖可知、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、？4、討論本實(shí)驗(yàn)以三葉草和草坪草為材料，測定了其POD酶活性，研究了兩種植物蛋白質(zhì)含量與POD酶活性的狀況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明三葉草中蛋白質(zhì)含量比草坪草中的多，而其POD酶活性要小，不同來源的POD具有不同的耐熱性..過氧化物酶在最適作用溫度上存在著很大的差別.例如,馬鈴薯和花菜(均漿)中過氧化物酶的最適溫度分別為55℃和35～40℃.一般來說,植物的過氧化物酶活力越高,它的耐熱性也越高.比如馬鈴薯和花菜勻漿中
5、的過氧化物酶在95℃加熱10min就完全而不可逆地失活.而甘藍(lán)中的過氧化物酶在120℃加熱10min仍然有0.3%活力保存下來..低水分含量,POD耐熱性增加:例如:水分含量低于40%時(shí),谷類中過氧化物酶的熱穩(wěn)定性與水分含量成反比.從研究結(jié)果中我們可以得到草坪草的耐熱性較高?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】：1.何亞麗,沈劍,王惠林.冷地型草坪草耐熱機(jī)理初探——Ⅰ.草地早熟禾(PoapratensisL.)在熱境脅迫下葉片葉綠素含量和POD酶活性的變化[J].上海農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),1997,(02).2.徐國明,張桂銀,褚卓棟,薛培英,張?zhí)壹t,畢淑琴.銅污染土壤上施用氮磷肥對小麥POD酶活性及銅吸收的影響[J].土壤,
6、2008,(03).3.朱建華,劉武定,曹享云,耿明建.缺硼對棉花不同品種苗期葉片POD、SOD同工酶的影響[J].植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào),2001,(03).4郭海軍，董志強(qiáng)，林永增，李振山，李俊蘭，黃國存，崔四平，潘學(xué)標(biāo).黃萎病對棉花葉片SOD、POD酶活性和光合特性的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),1995,(06).
