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1、信陽師范學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版JournalofXinyangNormalUniversity第22卷第2期2009年4月NaturalScienceEditionVo1．22No．2Apr．2009DOI：10．3969／j．issn．1003-0972．2009．02．019鐵皮石斛內(nèi)生真菌的分離與鑒定陳玉棟，李文錦，雷玲，劉改艷，盧東升(信陽師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，河南信陽4640O0)摘要：從鐵皮石斛(Dendrobiumcandidum)的根、莖、葉中分離獲得內(nèi)生真茼共30株，經(jīng)顯微形態(tài)觀察將其中20株鑒定為3個(gè)目、4個(gè)科
2、、9個(gè)屬．結(jié)果表明，鐵皮石斛不同部位內(nèi)生真菌的數(shù)量、分布和種群存有差異．關(guān)鍵詞：鐵皮石斛；內(nèi)生真茵；分離；鑒定中圖分類號(hào)：Q936文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1003-0972(2009)02-0236-03IsolationandIdentificationofEndophyticFungifromDendrobiumcandidumCHENYu·dong’，LIWen-jin，LEILing,LIUGai-yan，LUDong-sheng(Co~egeofLifeSciences，XinyangNormalUniversity，
3、Xinyang464000，China)Abstract：Thirtystrainsofendophyticfungiwereisolatedfromtheroot，stemandleafofDendrobiumcandidum，andtwentystrainsofthemweremorphologicallyidentifiedbelongtoninegenera，fourfamiliesandthreeorders．Ithasshownthatquantity，species，anddistributingoftheendo
4、ph~icfunsivariedindiferentpartsofDendrobiumcandi·dur,rKeywords：Dendrobiumcand~um；endophyticfungi；isolation；identification0引言生資源已遭嚴(yán)重破壞，被列為瀕危保護(hù)的中藥品種]．近年來，對石斛內(nèi)生真菌的分離主要集中于內(nèi)生真菌(endophyticfunsi)是指那些在其生用石斛的根來分離與其共生的菌根真菌，一般是作活史中的某一段時(shí)期生活在植物組織內(nèi)，對植物組為蘭科植物之一來進(jìn)行的?，專門系統(tǒng)地進(jìn)行石織沒有引起明顯
5、病害的菌，它包括那些在其生活史斛內(nèi)生真菌分離鑒定的很少¨．本實(shí)驗(yàn)從鐵皮石中的某一階段營表面生的腐生菌，對宿主暫時(shí)沒有斛的根、莖、葉中分離出內(nèi)生真菌并對其種類和分傷害的潛伏性病原菌和菌根菌?．內(nèi)生真菌因其布進(jìn)行了初步研究，旨在為提高鐵皮石斛的人工栽獨(dú)特的生活環(huán)境，與宿主關(guān)系密切．它可增強(qiáng)宿主培技術(shù)、試管苗成活率和藥物開發(fā)提供理論依據(jù)．的生長，并能提高宿主的抗逆性及病毒的抵抗能力J．此外，植物內(nèi)生真菌還能夠產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎，1材料和方法功能特殊的次生代謝產(chǎn)物，是新化合物、新藥物的1．1實(shí)驗(yàn)材料潛在資源．因而，研究植物內(nèi)生真菌與其宿主3年
6、以上生鐵皮石斛，系組培苗栽培而成，長的相互關(guān)系具有重要意義．勢一直良好，無其他病蟲害，其培養(yǎng)土壤為珍珠巖石斛(Dendrobium)是蘭科石斛屬多年生附生與腐殖土按1：1的比例混合成．草本植物，主要分布于西南和江南各省，是經(jīng)濟(jì)價(jià)1．2分離培養(yǎng)基值和醫(yī)用價(jià)值頗高的名貴中藥．鐵皮石斛(Den-分離培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)，drobiumcandidum)是石斛類的極品，具有抗腫瘤，每升含氯霉素60mg，用于抑制細(xì)菌的生長．抗衰老，增強(qiáng)免疫力等多種功能]．由于石斛自然分布較少，生長緩慢，繁殖率低以及過度采伐，其野日稿日期：
7、2008439-28；修訂日期：2008·11．06：·．通訊聯(lián)系人。E-mail：ydchen999@yahoo．corn．ca基金項(xiàng)目：河南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(082102130029)；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(教高[2007]335)作者簡介：陳玉棟(1971·)，男，河南淮濱人，副教授，博士，主要從事內(nèi)生真菌的分離與鑒定．236陳玉棟，等：鐵皮石斛內(nèi)生真菌的分離與鑒定1．3內(nèi)生真菌的分離sp．)為優(yōu)勢種群，占總數(shù)的23．3％，其次是曲霉屬1．3．1樣品消毒處理(Aspergillussp．)占10％，輪枝霉屬
8、(Verticillium取鐵皮石斛植株用自來水沖洗干凈、去腐葉、sp．)占10％．晾干水分后，轉(zhuǎn)到無菌操作臺(tái)上進(jìn)行下面處理：根2．2鐵皮石斛內(nèi)生真菌在植物器官中的分布和莖剪成約3cm的小段，葉片剪成約3cm×3cm2O株內(nèi)生真菌的分布各有特點(diǎn)．根部和莖部小片，
