GBT 5009.22-1996 食品中黃曲霉毒素B1的測定方法

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1、中華人民共和國國家標準GB/T5009.22--1996食品中黃曲霉毒素Bi的測定方法代替GTi5009.2285MethodfordeterminationofaflatoxinB1infoods1主題內(nèi)容與適用范圍本標準規(guī)定了糧食、花生及其制品、薯類、豆類、發(fā)酵食品及酒類等各種食品中黃曲霉毒素B,的測定方法本標準適用于糧食、花生及其制品、薯類、豆類、發(fā)酵食品及酒類等各種食品中黃曲霉毒素B,的測定本標準分為兩法。在第一法中,薄層板上黃曲霉毒素B,的最低檢出量為。.0004Kg,最低檢出濃度為5Flg/kg。第二法對黃曲霉毒素B,的最低檢出濃度

2、為。oftAg/kg,第一篇第一法2原理樣品中黃曲霉毒素B,經(jīng)提取、濃縮、薄層分離后,在波長365nm紫外光下產(chǎn)生藍紫色熒光,根據(jù)其在薄層上顯示熒光的最低檢出量來測定含量。3試劑3i不氯甲烷。3.2正己烷或石油醚(沸程30-60`C或60-90'C).3.3甲醇3.4苯3.5乙月青。3.6無水乙醚或乙醚經(jīng)無水硫酸鈉脫水。3.7丙酮以上試劑在試驗時先進行一次試劑空白試驗,如不干擾測定即可使用,否則需逐一進行重蒸。硅膠G:薄層色譜用。;娜:二三氟乙酸。31無水硫酸鈉。3.12氯化鈉。3.1苯一乙睛混合液:量取98mL苯,加2mL乙睛,混勻。3.14

3、甲醇水溶液:55,45,314黃曲霉毒素B,標準溶液。1儀器校正:測定重鉻酸鉀溶液的摩爾消光系數(shù),以求出使用儀器的校正因素。準確稱取25mg經(jīng)干燥的重鉻酸鉀(纂準級),用硫酸(。5+1000溶解后并準確稀釋至200mL,相當(dāng)于:(K形r刀7)=中華人民共和國衛(wèi)生部,996一06一19批準1996一09一的實施GB/T5009.22-1996。0004mat/L。再吸取25mL此稀釋液于50mL容量瓶中,加硫酸(0.5+1000)稀釋至刻度,相當(dāng)于0.0002mol/L溶液。再吸取25mL此稀釋液于50mL容量瓶中,加硫酸(0.5+1000)稀釋

4、至刻度.相當(dāng)于。0001mol兒溶液。用1cm石英杯,在最大吸收峰的波長(接近350n二處)用硫酸(0.51-1000)作空白,測得以上三種不同濃度的摩爾溶液的吸光度,并按式(1)計算出以上三種濃度的摩爾消光系數(shù)的平均值。乃︸?!?,?”?“‘“·“.‘..?(1)式中:E,—重鉻酸鉀溶液的摩爾消光系數(shù),—測得重鉻酸鉀溶液的吸光度;—重鉻酸鉀溶液的摩爾濃度。再以此平均值與重鉻酸鉀的摩爾消光系數(shù)值3160比較,即求出使用儀器的校正因素。3160f=.?“....??哈”??臼“““.?”(2)E式中:了—使用儀器的校正因素,E—測得的重鉻酸鉀摩爾消

5、光系數(shù)平均值。若f大于。.95或小于1.05,則使用儀器的校正因素可略而不計。3.14.2黃曲霉毒素B,標準溶液的制備:準確稱取1-1.2mg黃曲橄毒素B、標準品,先加人2mL乙睛溶解后,再用苯稀釋至100mL,避光,置于4℃冰箱保存.該標準溶液約為10tag/mL。用紫外分光光度計測此標準溶液的最大吸收峰的波長及該波長的吸光度值。3.14.2.1計算vAXMx1000xfX,=立二‘£-二二‘幾乙止‘二二:二二二-么..................................(3)E,式中:X,—黃曲霉毒素B,標準溶液的濃度,lig/

6、mL;A—測得的吸光度值;了—使用儀器的校正因素;M—黃曲霉毒素B,的分子量312;E2—黃曲霉毒素B,在苯一乙臘混合液中的摩爾消光系數(shù),19800,根據(jù)計算,用笨一乙睛混合液調(diào)到標準溶液濃度恰為10.0leg/mL,并用分光光度計核對其濃度.3.14.3純度的測定:取5WL10leg/mL黃曲霉毒素B,標準溶液,滴加于涂層厚度。25mm的硅膠G薄層板上,用甲醇一三氯甲烷(4十96)與丙酮一三氯甲烷($-1-92)展開劑展開,在紫外光燈下觀察熒光的產(chǎn)生,必須符合以下條件:3.14.3.1在展開后,只有單一的熒光點,無其他雜質(zhì)熒光點。3.14-3

7、.2原點上沒有任何殘留的熒光物質(zhì)。3.巧黃曲霉毒素B,標準使用液:準確吸取1mL標準溶液(10jig/mL)于10mL容量瓶中,加苯一乙膀混合液至刻度,混勻。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0leg黃曲霉毒素B,.吸取1.0mL此稀釋液,置于5mL容量瓶中,加苯一乙睛混合液稀釋至刻度,此溶液每毫升相當(dāng)于0.2leg黃曲霉毒素B,。再吸取黃曲霉毒素B,標準溶液(0.2pg/mL)1.0mL置于5mL容量瓶中,加苯一乙腑混合液稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于。.04pg黃曲霉毒素B=3.16次氯酸鈉溶液(消毒用):取100g漂白粉,加入500mL水,攪拌均勻。

8、另將$0g工業(yè)用碳酸鈉(Na,CO,-IOHZO)溶于500mL溫水中,再將兩液混合、攪拌,澄清后過濾。此濾液含次氯酸濃度約為25g/1。若用漂粉精制

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