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1、分析方法概述(第一部分)定性分析與定量分析定性分析目的確定檢材是不是某種藥毒物,或確定檢材中是否含有某種或某幾種藥毒物。過程探查方向初步判斷確證方法要求?靈敏?具有一定的選擇性定量分析目的確定某種藥毒物在檢材中的含量和濃度,或確定某幾種藥毒物分別在檢材中的含量和濃度。需定量的情況?醫(yī)療中正常用藥?飲食或人體中常有的成分?需根據(jù)量界定犯罪性質(zhì)或法律責(zé)任的方法要求靈敏度不一定很高(能測出即可),但需具有良好的計量關(guān)系。R/S=f(x)定性與定量的關(guān)系定性是定量的基礎(chǔ)界限有些定性方法在定性的同時就有定量關(guān)系。有些定量方法在一定條件下,本身也具有不同程度的定性意義。隨著分析科學(xué)和技術(shù)的迅速發(fā)展,
2、能應(yīng)用于法醫(yī)毒物分析并完成毒物的定性鑒別和定量檢測任務(wù)的分析方法很多,將主要對以下分析方法,尤其是儀器分析方法進(jìn)行重點介紹。分析方法類別方法類別常用毒物分析方法方法類別方法原理方法特點形態(tài)學(xué)方法利用檢材外觀形態(tài)或顯微形態(tài)特征進(jìn)行辨認(rèn)、比對簡便、快速,能在一定程度上起到篩選和鑒別的作用,為偵查或檢驗提供線索動物試驗法利用毒物的毒性及毒理作用機制,通過觀察染毒試驗動物是否死亡或其中毒表現(xiàn),初步判斷檢材中是否含有劇毒物質(zhì)或可能含有哪種毒物簡便易行,結(jié)果直觀,可初步篩查、判斷毒物類別免疫分析法利用標(biāo)記毒物與非標(biāo)記毒物競爭結(jié)合抗體的原理檢測毒物操作簡便,檢測省時,靈敏度高,選擇性強,耗材少,但需專
3、用試劑盒,且試劑都有一定的時效理化分析法利用毒(藥)物的各種理化性質(zhì)進(jìn)行鑒別檢測,如理化常數(shù)的測定,顯色反應(yīng),沉淀反應(yīng)等操作簡單,對設(shè)備要求不高,結(jié)果直觀,但選擇性差,準(zhǔn)確度低,往往用作篩查試驗或預(yù)試驗形態(tài)學(xué)方法——外觀性狀鑒別通過感觀對天然藥毒物的外觀性狀進(jìn)行鑒別形狀:根、莖、葉、花、果實、種子等大?。捍笮?、長短、粗細(xì)等顏色:表面和內(nèi)部的色澤表面特征:光滑還是粗糙,皺褶、槽溝、皮孔、毛茸等質(zhì)地:軟硬、脆韌、輕重、粘性、粉性等折斷面:平整-粗糙、致密-疏松、斷面紋路及顏色。形態(tài)學(xué)方法——顯微形態(tài)鑒別利用顯微鏡觀察藥毒物的組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞種類和形態(tài)以及細(xì)胞后含物的種類及形態(tài)等,通過與已知物核
4、對進(jìn)行。細(xì)胞種類:纖維細(xì)胞、石細(xì)胞、柵欄細(xì)胞、薄壁細(xì)胞等。后含物:如淀粉粒、菊糖、草酸鈣結(jié)晶、鐘乳體、油珠等。動物試驗(animaltest)大多毒性大,且具有較強的生理活性和特殊的中毒癥狀。體外檢材充裕、新鮮時,可用動物作急性毒性試驗或毒效試驗,以預(yù)試是否有劇毒或有某類毒物存在。青蛙毒性試驗動物試驗(animaltest)免疫分析法機理:抗原-抗體特異性結(jié)合方法酶免疫法(enzymeimmunoassay,EIA)放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)熒光免疫法(luoroimmunoassay,FIA)薄層免疫法(thinlayerimmunoassay,TIA)特點
5、:簡便、快速、靈敏,種類有限,試劑較貴。應(yīng)用:吸毒者和運動員尿液中毒品或興奮劑的篩查。尿樣滴入S孔內(nèi),樣品在毛細(xì)效應(yīng)作用下向前遷移。尿樣中無嗎啡存在或嗎啡濃度低于閾值濃度時,因膠體金抗體全部或部分與被固定在板上的嗎啡偶聯(lián)物結(jié)合,使測試區(qū)(T)內(nèi)出現(xiàn)一條紫紅色的條帶。當(dāng)嗎啡高于閾值濃度時,膠體金抗體全部與樣品中的嗎啡結(jié)合,未與嗎啡偶聯(lián)物結(jié)合,因此,在測試區(qū)不出現(xiàn)紫紅色條帶。質(zhì)控區(qū)未出現(xiàn)紅色線條,說明操作有誤或試劑盒失效,結(jié)果無效。尿樣中嗎啡檢測閾值濃度為300ng/ml。測試區(qū)(T)嗎啡偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗嗎啡單克隆抗體質(zhì)控區(qū)(C)加樣孔(S)顏色和沉淀反應(yīng)機理大多為生物堿,能與具有氧
6、化性質(zhì)的酸性試劑反應(yīng)生成有色物質(zhì);或與某些試劑生成沉淀,甚至特殊晶體。方法顏色反應(yīng):點滴板沉淀或結(jié)晶反應(yīng):載玻片顯微鏡選用原則選擇性和實用性鴉片生物堿的顏色和結(jié)晶反應(yīng)嗎啡+碘-碘化鎘鉀馬尾松狀結(jié)晶用于可疑毒品的預(yù)試。理化方法常用毒物分析方法方法類別方法原理方法特點儀器分析法主要包括利用毒物光學(xué)性質(zhì)的光譜分析法(spectralanalysis)利用毒物色譜行為差別的色譜分析法(chromatography)根據(jù)物質(zhì)分子量、斷裂碎片質(zhì)量大小及結(jié)構(gòu)特征信息的質(zhì)譜分析法(massspectrographicanalysis)常用的有紫外分光光度法(ultravioletspectrophoto
7、metry)原子吸收分光光度法(atomicabsorptionspectrophotometry)氣相色譜法(gaschromatography)高效液相色譜法(highperformancechromatography)薄層色譜法(thinlayerchromatography)毛細(xì)管電泳法(capillaryelectrophoresis)各類質(zhì)譜法及多級色質(zhì)聯(lián)用法靈敏,準(zhǔn)確,自動化程度高,適用范圍廣,但儀器設(shè)備昂貴,對使用人