《病毒學(xué)Virology》PPT課件

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1、病毒學(xué)(Virology)病毒學(xué)（Virology）病毒學(xué)是研究病毒這一特殊生命形式的性質(zhì)及其與宿主相互作用的關(guān)系的自然學(xué)科，是跨生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)的交叉學(xué)科，是分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的前沿學(xué)科。第一章緒論第一節(jié)病毒學(xué)研究的對象與任務(wù)一、病毒學(xué)研究的對象病毒（Virus）是一種特殊的生命形式，是一種極為簡單的生命形式。（一）病毒的特點1、病毒結(jié)構(gòu)簡單(1)不具有細胞結(jié)構(gòu)(2)只具有一種核酸（DNA或RNA）(3)不含核糖體和完整的酶系統(tǒng)，也不具有能量合成和代謝系統(tǒng)。2、獨特的繁殖方式(1)不具有雙分裂(2)以復(fù)制方式進行繁殖3、絕對的細胞內(nèi)寄

2、生4、病毒的二重性(1)病毒存在形式的二重性*細胞外具有感染性的顆粒形式*細胞內(nèi)具有繁殖性的基因形式(2)病毒結(jié)構(gòu)形式的二重性*完全病毒與缺損病毒（defectvirus）*病毒與假型病毒(pseudotypevirus)、假毒粒(pseudovirion)*病毒顆粒與空殼(3)病毒來源的二重性*外源性病毒從細胞外到細胞內(nèi)在細胞間水平傳播的病毒*內(nèi)源性病毒在宿主發(fā)育早期感染宿主，病毒基因組整合于宿主基因組并與其同步復(fù)制，隨細胞分裂垂直傳遞給子代細胞，但因其受宿主細胞控制，病毒基因組只能部分表達，故沒有子代病毒產(chǎn)生，且對宿主一般不造成傷害。

3、（二）病毒的定義病毒是占據(jù)一定生境，并具有獨立于其宿主進化史的絕對細胞內(nèi)寄生物，其基因組（DNA或RNA）被其自身編碼的蛋白質(zhì)外殼所包圍。(三）、病毒的宿主范圍宿主范圍：病毒所能感染的宿主和宿主細胞的種類按宿主種類劃分EuvirusVirusSubvirusViroidSatelliteagentSatelliteRNASatellitevirusPrionPlantVirusesInsectVirusesAnimalViruses蟲媒病毒（arbovirus）以蚊、蜱、螨、白蛉等節(jié)肢動物為媒介，在脊椎動物中廣泛傳播的病毒。（四）、病毒的

4、起源三種假說：病毒起源于細胞的DNA/RNA病毒的退行性進化假說病毒起源于具有復(fù)制能力的寡聚核苷酸四、病毒學(xué)研究任務(wù)理論方面：推進現(xiàn)代生物學(xué)的發(fā)展應(yīng)用方面：控制和消滅危害人類健康和社會發(fā)展的病毒危害利用病毒對有害生物進行生物防治促進生物高新技術(shù)的發(fā)展第二章病毒學(xué)研究的基本方法一、病毒的分離（一）標(biāo)本的采集與處理（二）標(biāo)本的接種：實驗宿主（動物、植物或細菌），雞胚或細胞培養(yǎng)（三）病毒存在的認(rèn)定1、系統(tǒng)癥狀2、局部反應(yīng)(1)噬菌體—噬菌斑(plaque)噬菌體感染生長在營養(yǎng)瓊脂平板上的細菌所形成的，具有一定大小和形狀的透明區(qū)域。(2)動物病毒

5、—蝕斑或稱空斑(plaque)動物病毒感染單層細胞培養(yǎng)所形成的局部病損區(qū)域，系由病毒的致細胞病變作用所引起．致細胞病變作用（Cytopathiceffect，CPE）：病毒感染細胞培養(yǎng)引起的細胞顯微表現(xiàn)的改變，如細胞聚集成團，腫大、園縮、脫落、細胞融合形成多核細胞、細胞內(nèi)出現(xiàn)包涵體（inclusionbody），乃至細胞裂解等（３）植物病毒－壞死斑或稱枯斑（necrosisspot）植物病毒感染敏感植物葉片所形成的局部病損區(qū)域．（四）盲傳（blindpassage）將取自經(jīng)接種而末出現(xiàn)感染癥狀的宿主或細胞培養(yǎng)的材料，再接種于新的宿主或細胞

6、培養(yǎng)，以提高病毒的毒力或效價．二、病毒的純化(一)病毒的純化1.病毒純化的標(biāo)準(zhǔn)(1)純化的病毒制備物應(yīng)保持感染性(2)純化的病毒制備物應(yīng)具有均一性病毒制備物均一性檢查的方法包括：電鏡檢查、超速離心、電泳和免疫學(xué)方法（二）病毒純化的方法1,病毒純化方法的依據(jù)(1)病毒顆粒具有一定的大小和密度，在離心場中能以一定的沉降速率沉降(2)病毒顆粒的主要化學(xué)組成為蛋白質(zhì)2.病毒純化的方法包括:超速離心,沉淀法,凝集技術(shù),液態(tài)兩相分配系統(tǒng),有機溶劑萃取,層析和電泳等三、病毒的測定（assayofvrvuses）病毒的測定即病毒的定量分析(一)病毒的物理

7、顆粒計數(shù)1.電鏡計數(shù)，將待測病毒樣品與已知數(shù)目的聚苯乙烯乳膠顆粒均勻混合后置電鏡觀察，統(tǒng)計病毒顆粒數(shù)目與乳膠顆粒數(shù)目，根據(jù)兩類顆粒數(shù)目之比即可計算出待測樣品中的病毒顆粒數(shù)目。2.血細胞凝集試驗血細胞凝集作用（Hemagglution）許多動物病毒的包膜蛋白或外殼蛋白在一定條件下（溫度、pH、離子濃度等）能引起體外的一定種類的脊椎動物紅血球細胞凝集，此即血細胞凝集作用。血細胞凝集試驗由于具有血凝性質(zhì)的病毒所能凝集血細胞的量與病毒濃度成正比，根據(jù)這一原理設(shè)計的血細胞凝集試驗即可用于病毒定量測定。待測病毒樣品2倍稀釋1:11:101:201:4

8、01:801:1601:3201:6401:12801:2560每孔分別加入等體積一定濃度的紅球血細胞置室溫孵育一定時間觀察結(jié)果并計算病毒血凝效價（二）病毒的感染性測定（assayofvira