淀粉糊化實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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1、淀粉糊化度的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆彰附夥y定淀粉糊化度原理和方法二.實(shí)驗(yàn)原理酶解法，淀粉經(jīng)糊化后才能被淀粉酶作用，未糊化的淀粉（生淀粉）不能被淀粉酶作用。加工樣品中的淀粉通常為部分糊化，需要測定其糊化度。將樣品、完全糊化樣品分別用淀粉酶（本實(shí)驗(yàn)用糖化酶）水解，測定釋放出的葡萄糖含量，以樣品的葡萄糖釋放量與同一來源的完全糊化樣品的葡萄糖釋放量之比來表示淀粉糊化（熟化）度。二．實(shí)驗(yàn)儀器和試劑儀器：天平（靈敏度0.001）、恒溫水浴、分光光度計(jì)試劑：緩沖液（將3.7ml冰醋酸和4.1g無水乙酸鈉溶于100ml蒸餾水，定容至1000ml，必要時(shí)

2、可滴加乙酸或乙酸鈉調(diào)節(jié)PH值至4.5左右）、酶溶液（將1g葡萄糖淀粉酶（糖化酶）溶于100mL緩沖液，過濾。（現(xiàn)配，共用））、蛋白質(zhì)沉淀劑、蒸餾水溶液、、銅試劑、磷鉬酸試劑三．實(shí)驗(yàn)步驟1、準(zhǔn)確稱取兩份樣品（加工后的碎米粉）100mg于25ml刻度試管，其中一份供制備完全糊化樣品，另一份為測定樣品。（1）完全糊化樣品：向樣品中加入15ml緩沖液，記錄液面高度，混勻后將試管置于沸水浴中加熱50min（期間搖動(dòng)2~3次），用自來水冷卻試管，滴加適量蒸餾水使液面恢復(fù)到加熱前位置，即為完全糊化樣品。（2）測定樣品：向待測樣品中加入15ml緩沖液

3、。（3）空白：取一支空的25ml刻度試管，加入15ml緩沖液。2、分別向上述3支刻度試管中加入1ml酶溶液，在40℃水浴中保溫50min，起初搖動(dòng)一次，以后每隔15mln搖動(dòng)一次。3、保溫50min之后，分別加入2ml10%的,混勻，再加1ml，用水稀釋至25ml，混勻，過濾。4、準(zhǔn)確吸取0.1ml濾液和2ml銅試劑，分別加入3支25ml刻度試管中（清洗干凈再標(biāo)號(hào)），將試管置于沸水浴中6min（開蓋），保持沸騰，沸水浴加2ml磷鉬酸試劑，繼續(xù)加熱2min。5、用自來水將試管冷卻，加蒸餾水定容至25ml，堵住試管口（可用手套的拇指或手掌

4、），反復(fù)顛倒試管使之混勻。6、用分光光度計(jì)在420nm處讀出吸光值7、測定樣品糊化（熟化）度的公式計(jì)算四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果每份加工的米粉分別稱量100mg，分別進(jìn)行糊化，酶解，最后測定的吸光值如下樣品吸光值完全糊化樣品待測樣品空白0.1750.1090.032測定樣品的糊化度為：×100%==53.85%五．結(jié)果分析：1、完全糊化時(shí)，經(jīng)常要打開水浴鍋的鍋蓋，儀器的設(shè)定問題，溫度不夠100℃，糊化程度不夠。2、配制酶溶液中，可能有一部分酶已經(jīng)在貯存的過程中變形或者失效，導(dǎo)致糊化度偏低。3、樣液定容過程中，由于溫度過高，導(dǎo)致定容不準(zhǔn)確，結(jié)果有偏差

5、。