番茄煙粉虱傳雙生病毒PCR檢測

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1、維普資訊http://www.cqvip.com第l9卷1期中國病毒學(xué)67—_692004年2月VIR0L0GICASINICAFebruary20O4番茄煙粉虱傳雙生病毒PCR檢測何自福,虞皓,羅方芳(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,廣東廣州510640)DetectionofWhitefly-transmittedGeminivirusesfromTomatobyPCRHEZi.fu,YUHao,LUOFang—fang(InstituteofPlantProtection,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences

2、,GuangzhOU510640,ChinaJAbstract:Fromtheconservedregionsofthereportednucleotidesequencesofwhitefly—transmittedgeminiviruses(WTGV),apairofdegenerateprimerswasdesignedtoannealtotheconservedsequence.Thetomatosamplesinfectedgeminivirus—likefromGuangdongweredetectedbyPCR.Theresultsshow

3、edthata356bpspecificfragmentwasamplifiedfromthesamples.Thespecificfragmentwasclonedandsequenced,andthesequencewascomparedwithallnucleotidesequencesinGenBankbyBlastofNCBI.TheresultshowedthatthefragmentbelongedtoGeminiviridaeDNA.SothedegenerateprimersmaybeusedtodetecttheWTGVfromtom

4、atoinGuangdong.Moreover,bothofthehomologyofthefragmentbetweenWTGVfromtomatoinGuangdongandthereportedWTGVintheworldandWTGVfromtomatoinGuangxiwereunder82%.TheseresultsimpliedthattheWTGVfromtomatoinGuangdongdifferedfromtheabove—mentionedWTGV.Keywords:Whitefly—transmittedgeminivirus(

5、WTGV),PCRdetection,Sequenceanalysis關(guān)鍵詞:煙粉虱傳雙生病毒:PCR檢測:寧列分析中圖分類號:$432.41文獻(xiàn)標(biāo)識:A文章編號:1003—5152(2004)01—0067—03煙粉虱傳雙生病毒(Whitefly.transmittedGemini—了弄清該病毒病在我省番茄等作物上的發(fā)生及為viruses.WTGV)病是世界番茄生產(chǎn)上重要病害之害情況,進(jìn)而開展綜合控制對策研究,從2001年一起,我們即開始對其進(jìn)行研究。本文報(bào)道的是對該,已給美國、以色列、埃及、澳大利亞等國的番茄生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失,病原是一類具有孿生顆粒

6、病毒病檢測方法研究。形態(tài)的單鏈環(huán)狀DNA植物病毒,屬雙生病毒科1材料與方法fGeminiviridae)菜豆金色花葉病毒屬(Begomovirus),其基因組由2個(gè)組分(DNA—A和DNA—B)組成,1.1簡并引物的設(shè)計(jì)每個(gè)組分的大小為2.5~2.8kb,少數(shù)病毒為單組分:已有研究I4,5j表明,煙粉虱傳雙生病毒DNA間由煙粉虱(Bemisiatabaci)以持久方式傳播?。同源性較高。比較GenBank中已報(bào)道的煙粉虱傳雙據(jù)報(bào)道,目前該病毒病已在我國的廣西、云生病毒DNA序列,根據(jù)其保守區(qū)序列,我們設(shè)計(jì)南[31等省發(fā)生。我們在』’。東菜區(qū)田問調(diào)查時(shí)也發(fā)

7、現(xiàn),了I對簡并引物,用于擴(kuò)增該保守區(qū)的356bp片段。一些番茄植株上的病癥與文獻(xiàn)描述的雙生病毒病簡并引物序列分別為:CoPL5’>AA(AG)(AG)T癥狀十分相似,而煙粉虱自二卜世紀(jì)九卜年代中期fACT)TGGATGGA(CT)G(AG)(AGT)AA<3’(位于以來即在廣東普遍發(fā)生。因而推測,煙粉虱傳雙生Begomovirus代表種BGMV—PRDNA的708nt-病毒病很可能已在廣東番茄等作物上發(fā)生為害。為727nt):CoPR5’>GA(AGCT)G(GC)ATG(ACT)GT收稿Et期:2003—06—12,修回Et期:2003—07一I1基金

8、資助:廣東省自然科學(xué)基金(031992);廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院卜五”重點(diǎn)科技項(xiàng)目(2

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