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1、影響滅活的因素主講人:第四組二〇一三年六月九日滅活的概念是指破壞病原微生物的生物學活性、繁殖能力及致病作用,或者破壞外毒素的毒性作用但盡可能不影響其免疫原性,用以只別的滅活疫苗活類毒素。滅活是獸用生物制品制備過程中的一項必不少的環(huán)節(jié)。滅活的方法滅活方法可分為:1、物理滅活法熱滅活、超聲波滅活法、紫外線滅活法、射線滅活法等。2、化學滅活法利用化學藥品或酶使微生物、活性物質的一些結構發(fā)生改變而產(chǎn)生的使其喪失生命力、感染性或活性的方法。常用的滅活劑甲醛甲醛及其37%——40%溶液即福爾馬林,是病毒學中普遍應用的一種病毒滅活劑,在動物滅活疫
2、苗制作中尤為常用。用甲醛滅活的時間長,一半需要在37—39oC處理24h以上或者更長的時間。滅活的濃度為0.1%--0.8%結晶紫它主要是它的陽離子與微生物蛋白質的羧基形成帶弱點的化合物,妨礙微生物的正常代謝,擾亂微生物的氧化還原作用,使電勢升高而不適于衛(wèi)生物的生長繁殖。對革蘭氏陽性菌主要是干擾細胞壁肽聚糖的合成。苯酚為無色結晶或白色榕塊,有特殊氣味,有毒及腐敗性,易潮解,溶于水及有機溶劑。苯酚的滅活機制是使微生物的蛋白質發(fā)生變性和抑制特異的酶系統(tǒng)(脫氨酶、氧化酶等)的活性,從而導致微生物死亡,常用濃度為0.3%--0.5%。常用滅
3、活疫苗及滅活方法豬丹毒滅活疫苗0.2%—0.25%甲醛370C18—24h禽巴氏桿菌蜂膠滅活疫苗0.1%甲醛370C7—12h豬多殺性巴氏桿菌病疫苗0.1%甲醛370C7—12h犬瘟熱肝脾組織滅活苗0.1%甲醛370C24h雞傳染性法氏囊病組織滅活苗0.4%370C20—24h豬瘟結晶紫疫苗血毒4:甘油結晶紫1(1000ml甘油+2.5g結晶紫)370C--380C6—8d狂犬病羊腦組織苗組織苗1:苯酚甘油溶液4(含60%甘油及1%苯酚的蒸餾水。360C7d破傷風類毒素0.4%甲醛370C--380C21—31d影響滅活的因素所謂的
4、滅活效果,是指滅活的完全性,即被滅活物的活性是否能完全喪失或破壞,并且滅活后是否保留良好的抗原性。滅活效果,常受滅活劑量、溫度、時間、PH、滅活物種類、濃度等因素的影響。1、滅活的特異性指某些滅活劑只對一部分微生物有明顯的滅活作用,而對另一些微生物則效力很差。酚類能抑制和殺滅大部分細菌的繁殖體,對真菌和病毒不太敏感;陽離子表面活性劑抗菌譜廣,效力快,對組織無刺激性,能殺死多鐘革蘭氏陽性菌和陰性菌,但對綠膿桿菌和細菌芽孢作用弱。2、微生物的種類及其特性不同種類的微生物如細菌、病毒、真菌等對滅活劑的敏感性不同,同一種微生物在不同的生長階
5、段對其滅火劑的敏感性不同,如細菌的芽孢對其滅活劑的抵抗力大于繁殖體,生長期細菌對滅活劑的敏感度應大于靜止期。另外微生物的含氧濃度也會影響滅活的效果,一般含氧量越高,甲醛等滅活劑的消耗越大,滅活脫毒越慢。3、滅活溫度通常同一濃度滅活劑的滅活速度與溫度成正比。溫度每上升100C,細菌死亡率可成倍增加。金屬鹽類的殺菌效果增加2.5倍;苯酚的殺菌作用增加5--8倍。但是,如果溫度超過400C或更高,將會影響微生物的抗原性。4、滅活劑的濃度滅活劑的濃度越高,微生物滅活脫毒的速度越快,抗原損失的也越大。分批加入滅活劑棵保護抗原的免疫原性。5、滅
6、活時間一般滅火時間與滅活濃度及滅活溫度反比。但是為了保證品質質量,短時間能達到滅活效果最好。6、pHpH對細菌的滅活作用影響很大。在微酸性是滅活速度慢,細菌抗原性保持較好;在堿性時滅活速度快,蛋抗原性易受破壞;pH也影響滅活劑的電離度,一般來說,未電離的分子較易通過細菌細胞膜,滅活效果較好。7、有機物的存在生物制品中含有較多的蛋白質等有機物質,這些有機物質吸附于滅活劑的表面或者與滅活劑的化學基團結合,影響滅活劑的滅活能力。受這種因素影響較大的滅活劑有苯胺類染料、汞制劑、陽離子去污劑等。謝謝觀看第四組成員:劉峰、楊俊、趙珊、曾子軒、任
7、繼川、付楊12畜牧6班