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《畢業(yè)論文--貴州西南蔗區(qū)甘蔗宿根矮化病調(diào)查》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、-5-：貴州西南蔗區(qū)甘蔗宿根矮化病調(diào)查貴州西南蔗區(qū)甘蔗宿根矮化病調(diào)查摘要：為了解貴州西南蔗區(qū)甘蔗宿根矮化病發(fā)病情況，應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)該蔗區(qū)的甘蔗樣品進(jìn)行宿根矮化病檢測(cè)。結(jié)果表明：貴州西南蔗區(qū)的13個(gè)甘蔗主要栽培品種和主推品種，共118個(gè)樣品中有98個(gè)樣品檢出RSD，陽(yáng)性檢出率為83.05%；其中粵糖00-236，巴西45，羅漢蔗，拔地拉，黔糖3，ROC21等6個(gè)品種發(fā)病較嚴(yán)重，陽(yáng)性檢出率高達(dá)100%；其余7個(gè)品種也均發(fā)病，陽(yáng)性檢出率在42.86%～90.00%之間。關(guān)鍵詞：甘蔗；宿根矮化?。籔CRtASurveyofSugarcane
2、RatoonStuntingDiseaseinSouthwestGuizhouAbstract:Theaimofthisworkwastoinvestigateofsugarcaneratoonstuntingdisease(RSD).SugarcanesamplesfromdifferentcaneareasinsouthwestGuizhouweredetectedbyPCRtechnology.Theresultsshowedthatamong13sugarcanevarietiesincludingmajorplantvari
3、etiesandmainrecommendedvarieties,98samples(83.05%)of118sampleswereRSDpositive.ThesixvarietiesofYuetang00-236,Brazil45,Luohancane,Badila,Qiantang3andROC21wereseriouslyinfected,positivedetectionrateswereashighas100%.Therestofthe7varietieswerealsoinfected,positivedetection
4、ratesbetween42.86%~90.00%.Keywords:Sugarcane;Ratoonstuntingdisease;PCR0引言甘蔗宿根矮化病(RatoonStuntingDisease,RSD)是目前世界上最為嚴(yán)重的甘蔗病害之一。該病害最早于1944～1945年在澳大利亞昆土蘭州甘蔗品種Q28上發(fā)現(xiàn)[1]。目前，RSD在巴西、印度、南非、美國(guó)等甘蔗主要生產(chǎn)國(guó)和地區(qū)均有報(bào)道。1986年，我國(guó)廣東首次確診甘蔗RSD[2]，隨后在我國(guó)其他甘蔗主產(chǎn)區(qū)廣西、福建、海南、云南等地普遍發(fā)現(xiàn)RSD發(fā)生。RSD由一種木質(zhì)部寄生細(xì)菌L
5、eifsoniaxylisubsp.xyli(Lxx)引起[3]，主要通過(guò)帶病蔗種和砍蔗工具傳播，一般造成甘蔗減產(chǎn)12%～37%(干旱時(shí)減產(chǎn)甚至高達(dá)60%以上)，糖分降低0.5%（絕對(duì)值），宿根年限縮短1～2年[4-5]。甘蔗感病癥狀不易從外表判斷，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)植株矮化，蔗莖變細(xì)、分蘗減少、生長(zhǎng)緩慢等癥狀；其內(nèi)部在近基部節(jié)維管束上出現(xiàn)粉紅色或橘紅色的小圓點(diǎn)或痘點(diǎn)[6]。隨著RSD檢測(cè)技術(shù)的提高及完善，其經(jīng)歷了內(nèi)部癥狀診斷─顯微鏡法─免疫學(xué)檢測(cè)─PCR檢測(cè)等階段[7-10]，其中，PCR檢測(cè)技術(shù)是一項(xiàng)靈敏度高、特異性好的分子檢測(cè)技術(shù)。
6、優(yōu)化的PCR能從稀釋1000倍的Lxx基因組DNA(15.9pg/μL)中檢測(cè)到Lxx[11-12]。由于受土地資源限制，我國(guó)大部分蔗區(qū)已連作15～20年以上。長(zhǎng)期連作加劇了RSD發(fā)病率，嚴(yán)重威脅甘蔗安全生產(chǎn)。近年來(lái)，我國(guó)大部分蔗區(qū)開展了甘蔗樣品RSD發(fā)病情況調(diào)查研究，但針對(duì)貴州蔗區(qū)的RSD發(fā)病情況調(diào)查尚未見報(bào)道。本研究在前人的研究基礎(chǔ)上應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)貴州西南蔗區(qū)13個(gè)常見品種RSD發(fā)病情況展開調(diào)查。1材料與方法1.1樣品采集在貴州西南主要蔗區(qū)興義、貞豐、冊(cè)亨、望謨等地采集甘蔗樣品，包括主栽品種8個(gè)和主推品種5個(gè)，共13個(gè)品種118
7、個(gè)樣品。所有樣品均為隨機(jī)取樣，每個(gè)樣品5～10株，取成熟期蔗莖基部倒數(shù)第2～3節(jié)，蔗莖采集時(shí)要嚴(yán)格避免樣品之間的交叉污染，對(duì)于不同植株砍刀均用70%酒精消毒，截取的蔗莖去皮后切成2～3mm大小的顆粒，置于-70℃冰箱保存待用。-5-：貴州西南蔗區(qū)甘蔗宿根矮化病調(diào)查1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1DNA提取取50～100mg樣品用液氮充分研磨，用天根快捷型植物基因組DNA提取試劑盒提取蔗莖DNA。1.2.2PCR檢測(cè)使用Pan等報(bào)道的Lxx16S～23SrDNA基因間隔區(qū)(ITS)特異引物：上游引物L(fēng)xx1：ACCCTGTGTTGTTTTCAA
8、CG；下游引物L(fēng)xx2：CCGAAGTGAGCAGATTGACC；以上引物由上海生工生物工程有限公司合成，其預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為438bp[13]。PCR反應(yīng)體系：DNA模板1.0μL，Lxx1和Lxx2(10mmol/L
